人类ERMAP基因在不同胎龄胎儿组织中表达的研究 被引量：1

1

作者 何新荣 何映谊 +1 位作者 陈滢 叶铁真 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期972-975,共4页

人类ERMAP基因是新近发现的编码红细胞膜相关蛋白基因,其功能可能与红系造血活动有关。为探讨该基因在胎儿造血过程中的作用,收集9-36周难免流产胎儿共29例,分别抽提其肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺脏、胸腺、大脑、骨髓和肌肉等9种脏器... 人类ERMAP基因是新近发现的编码红细胞膜相关蛋白基因,其功能可能与红系造血活动有关。为探讨该基因在胎儿造血过程中的作用,收集9-36周难免流产胎儿共29例,分别抽提其肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺脏、胸腺、大脑、骨髓和肌肉等9种脏器组织的RNA,取其中胎龄25+5周(25周过5天,下同)的胎儿各脏器组织的RNA进行Northernblot检测,了解人类ERMAP基因在胎儿脏器组织中的表达谱,同时采用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法观察该基因在不同胎龄胎儿组织中表达量的变化规律。结果Northernblot检测显示,人类ERMAP基因在25+5周胎儿肝脏和骨髓中表达阳性,而在脾脏、肾脏、胸腺、心脏、肺脏、大脑及肌肉中表达阴性。FQ-PCR结果显示,人类ERMAP基因在9-36周胎儿肝脏中均有表达,其表达量从第12周开始升高,18-20周达高峰,21周后逐渐下降;该基因在胎儿骨髓中的表达则从15周开始,27-32周达高峰,之后迅速下降,其表达量低于肝脏;在其余7个脏器中仅有部分标本呈现低水平表达。结论:人类ERMAP基因在胎儿肝脏中的表达规律与胎儿肝脏造血过程基本一致,在15-32周胎儿骨髓中的表达规律与胎儿期骨髓造血活动基本吻合,推测该基因的功能可能与胎儿发育过程中红系细胞向肝脏和骨髓的迁移活动有关。 展开更多

关键词 ERMAP基因 胎儿期 造血

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人胚胎造血的AGM区基质细胞基因表达谱分析 被引量：1

2

作者 付劲蓉 陈惠芹 +3 位作者 张绪超 黄绍良 周敦华 黄科 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期726-730,共5页

为了筛选在主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞中差异表达的基因,以药物流产的孕30-35天的人胚胎AGM区来源基质细胞为“实验方”,以源自意外而致流产的孕4-5月的水囊引产的胎儿肝组织的基质细胞为“驱动方”,建立了在人AGM区基质细胞中差... 为了筛选在主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞中差异表达的基因,以药物流产的孕30-35天的人胚胎AGM区来源基质细胞为“实验方”,以源自意外而致流产的孕4-5月的水囊引产的胎儿肝组织的基质细胞为“驱动方”,建立了在人AGM区基质细胞中差异表达基因的消减杂交文库。进一步用基因芯片技术对所建立的抑制消减杂交文库进行筛选,并挑选其中明显差异表达的18个克隆进行序列测定和同源性分析。结果表明在所构建的AGM抑制消减杂交文库中,经过PCR鉴定有特异性扩增带且扩增带分子量在200-700bp的克隆有211个,阳性率高达76.4%。经过基因芯片筛选,挑选出ratio值大于5的克隆共18个进行序列测定显示,在测序的18个明显差异表达的阳性克隆中,4个为未知基因,14个为已知基因,其中这些已知基因分别参与了细胞迁移、分化、生长、细胞周期、信号转导及血管发生等细胞重要生命过程。这些基因大多数在胚胎分化造血发育中的作用尚未见报道。结论筛选AGM区基质细胞中差异表达的基因为进一步研究胚胎造血发育的分化调控的分子机理提供了必要的理论基础。 展开更多

关键词 AGM区 胎肝 基质细胞 抑制消减杂交 基因芯片

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人胎盘CD133^+细胞具有LTC-IC集落启动细胞特性 被引量：2

3

作者 刘虹麟 陈代雄 +5 位作者 方宁 章涛 刘祖林 刘金伟 万卫红 祁莹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期125-128,共4页

本研究从功能上评价人胎盘CD133+细胞是否具有长期造血重建功能。采用免疫磁珠激活分选系统(MACS)富集胎盘CD133+细胞作为测试细胞,采用有限稀释法(LDA)设置4种不同浓度的测试细胞,用胎儿原代骨髓基质细胞制备的饲养层细胞共培养于长期... 本研究从功能上评价人胎盘CD133+细胞是否具有长期造血重建功能。采用免疫磁珠激活分选系统(MACS)富集胎盘CD133+细胞作为测试细胞,采用有限稀释法(LDA)设置4种不同浓度的测试细胞,用胎儿原代骨髓基质细胞制备的饲养层细胞共培养于长期培养体系中,以检测测试细胞中长期培养启动细胞(LTC-IC)的发生率及其增殖分化能力。结果表明:人胎盘CD133+细胞群中含有LTC-IC,其发生率为1/645;LTC-IC具有增殖分化为粒-单集落形成单位(CFU-GM)和混合集落形成单位(CFU-Mix)的能力;在所有LTC-IC阳性孔中,产生CFU-GM的孔占总阳性孔的71.4%,产生CFU-GM和CFU-Mix的孔占总阳性孔的28.6%。结论:人胎盘组织CD133+细胞群中存在LTC-IC,并具有造血早期祖细胞集落形成能力。 展开更多

关键词 CD133^+细胞 长期培养启动细胞 造血干/祖细胞 磁珠激活细胞分选 胎盘

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鸡胚PGC向造血系统细胞分化的原位观察

4

作者 周东雨 刘荣秀 裴月湖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期129-132,共4页

为探讨血发生与原生殖细胞的关系,用自制的胚胎固定圈对取自不同发育时期的早期鸡胚展平、定位,经戊二醛固定后分别进行PAS染色和HE染色,经系列脱水、透明、封固,对其进行整装原位和平切切片观察。结果表明:①用经典的识别原生殖细胞(PG... 为探讨血发生与原生殖细胞的关系,用自制的胚胎固定圈对取自不同发育时期的早期鸡胚展平、定位,经戊二醛固定后分别进行PAS染色和HE染色,经系列脱水、透明、封固,对其进行整装原位和平切切片观察。结果表明:①用经典的识别原生殖细胞(PGCs)的PAS染色方法与HE染色所观察到的PGC在鸡胚的分布及细胞形态基本一致,而HE染色较PAS法能更有助于清晰、完整、准确地识别PGC的细胞内部结构特征;②在孵化26小时的鸡胚胚外胚盘的明暗交界处可见血岛的发生,血岛发生的时间比真正的卵黄囊产生时间(大约44-48小时)要早很多;③血岛周围的血管内皮细胞与管腔中游离细胞都来自PGC。结论:血岛最早发生的解剖位置可能不是卵黄囊而是胚外胚盘中胚层,血管内皮细胞与血细胞平行发生,PGC是成血管-造血干细胞的共同祖先。 展开更多

关键词 鸡胚 原生殖细胞 造血 造血系统

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银杏提取物对大鼠肺缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量：4

5

作者 张乐蒙 沈璐 +3 位作者 陈燕斐 杨炜青 李建华 刘国辉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期20-21,共2页

目的:观察银杏提取物(EGB)对大鼠体外循环肺缺血/再灌注损伤(I/R)的保护作用。方法:建立离体大鼠肺灌流模型,SD大鼠随机分成假手术组(Sham)、I/R组和EGB组,观察大鼠肺组织形态学改变、分别测定肺组织匀浆及灌流液中超氧化物歧化酶(SOD)... 目的:观察银杏提取物(EGB)对大鼠体外循环肺缺血/再灌注损伤(I/R)的保护作用。方法:建立离体大鼠肺灌流模型,SD大鼠随机分成假手术组(Sham)、I/R组和EGB组,观察大鼠肺组织形态学改变、分别测定肺组织匀浆及灌流液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量、肺湿干重比(W/D)和平均肺动脉压(MPAP)。结果:HE染色显示EGB组肺损伤明显减轻、肺组织湿/干重比和MPAP显著低于I/R组:EGB组肺脏灌流液和组织匀浆中SOD的活性显著高于I/R组,MDA含量则显著低于I/R组。结论:EGB对大鼠肺I/R损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 银杏提取物 缺血/再灌注 肺

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内淋巴囊的光、电镜观察 被引量：1

6

作者 尉传社 姚家庆 戴衡茹 《蚌埠医学院学报》 CAS 1990年第3期147-149,共3页

本文利用20例足月引产胎儿的材料,对内淋巴囊的一般组织学结构和超微结构进行了观察。扫描电镜显示囊腔内面有两种类型细胞。透射电镜观察则显示内淋巴囊上皮有三种类型细胞:A型细胞具有较多的微绒毛,丰富的线粒体和内质网;B型细胞有广... 本文利用20例足月引产胎儿的材料,对内淋巴囊的一般组织学结构和超微结构进行了观察。扫描电镜显示囊腔内面有两种类型细胞。透射电镜观察则显示内淋巴囊上皮有三种类型细胞:A型细胞具有较多的微绒毛,丰富的线粒体和内质网;B型细胞有广泛的细胞侧褶,少量的高尔基体、内质网、溶酶体等;C型细胞的最显著特征是胞质内充满大量的包含体、溶酶体和残余体等。内淋巴囊近侧部上皮下结缔组织疏松,血管丰富;远侧部上皮下结缔组织致密、血管稀少。 展开更多

关键词 内淋巴囊 光镜 电镜 超微结构

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外用斑蝥致急性造血功能停滞3例报告 被引量：2

7

作者 刘艳奎 迟艳 《临床血液学杂志》 CAS 2008年第1期50-51,共2页

关键词 斑蝥 不良反应 造血系统

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小鼠骨髓树突状细胞的培养扩增及生物学特性分析 被引量：2

8

作者 彭福华 钟秀风 +3 位作者 胡学强 王敦进 朱灿胜 王玉鸽 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第B12期10547-10550,共4页

背景:树突状细胞是目前已知功能最强的专职性抗原递呈细胞,但树突状细胞在体内分布广泛且数量较少,获得大量的树突状细胞是研究树突状细胞特性和功能的前提。目的:建立小鼠骨髓源树突状细胞体外培养和扩增方法,观察其形态和相关特征。... 背景:树突状细胞是目前已知功能最强的专职性抗原递呈细胞,但树突状细胞在体内分布广泛且数量较少,获得大量的树突状细胞是研究树突状细胞特性和功能的前提。目的:建立小鼠骨髓源树突状细胞体外培养和扩增方法,观察其形态和相关特征。设计、时间及地点:树突状细胞形态学观察实验,于2006-08/2007-05在中山大学中山眼科中心实验室完成。材料:健康雌性C57BL/6小鼠。方法:在无菌条件下提取C57BL/6鼠骨髓细胞,分离单个核细胞,以小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4协同诱导下培养,加用磷酸脂多糖刺激,分成磷酸酯多糖-树突状细胞和单纯树突状细胞组,前者在培养加入磷酸酯多糖,后者不加。主要观察指标:应用光镜和电镜下观察树突状细胞的形态,流色细胞仪检测鉴定其生物学特征。结果:体外培养2周后具有典型的树突状细胞形态,光镜下显示细胞表面不规则,呈树突状突起,电镜下可见培养的细胞具有典型树突状细胞的形态特征,流式细胞鉴定为髓系树突状细胞,高表达MHCII类分子及共刺激分子(MHCII,CD80,CD83,CD11c)。单纯树突状细胞组的细胞中度表达MHCⅡ类分子,低水平表达共刺激分子,刺激T细胞增殖的能力较弱;磷酸酯多糖-树突状细胞组细胞高水平表达MHCII类分子和共刺激分子。结论:实验所采用的树突状细胞体外原代培养的方法能在体外培养出大量的未成熟树突状细胞,具有典型树突状细胞的形态特征及较高的纯度。 展开更多

关键词 树突状细胞 骨髓 细胞培养

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非诱导同种异体骨髓基质细胞心肌移植后细胞增殖分化的结局(英文)

9

作者 昌薇 毛晓波 +1 位作者 曾秋棠 曹林生 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第25期167-169,F0003,共4页

背景:关于骨髓基质细胞心肌成形的研究,目前都集中在模拟自体细胞移植方面。而同种异体骨髓基质细胞心肌移植的研究,国内报道较少。目的:观察大鼠同种异体骨髓基质细胞移植到心肌梗死区后能否存活,并进一步增殖、分化,以及对宿主心脏的... 背景:关于骨髓基质细胞心肌成形的研究,目前都集中在模拟自体细胞移植方面。而同种异体骨髓基质细胞心肌移植的研究,国内报道较少。目的:观察大鼠同种异体骨髓基质细胞移植到心肌梗死区后能否存活,并进一步增殖、分化,以及对宿主心脏的影响。设计:随机对照动物实验。单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管内科实验室。材料:1月龄Wistar大鼠10只,雌雄不拘,体质量100～120g,用于取材培养骨髓基质细胞。3月龄雌性Wistar大鼠80只,体质量200～250g,用于制造动物模型。方法:实验于2004-06/12在华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管内科实验室完成。①80只大鼠结扎冠状动脉左前降支制作急性心肌梗死模型,45只大鼠制作模型成功。②4周后,取传两代非经诱导的体外培养的同种异体大鼠骨髓基质细胞,注射到大鼠心肌梗死区,为移植组(25只)。同时设置注射培养基的对照组(20只)。③移植4周后检测受体心脏的血流动力学指标,然后取标本,检测移植细胞存活、分化和组织的血管新生状况。主要观察指标:①两组大鼠血流动力学检测结果比较。②移植细胞的结局。③两组大鼠血管新生的改变。结果:细胞移植组13只,对照组11只大鼠进入结果分析。①移植组大鼠心脏血流动力学指标较对照组明显改善犤左心室收缩压:(88.61±5.99),(76.93±4.75)mmHg,左心室舒张末压:(7.72±1.36),(12.77±2.76)mmHg,P均<0.05;左心室收缩压最大变化速率:(2365.26±266.31),(2025.04±230.25)(mmHg/s),左心室舒张压最大变化速率:(2313.26±159.30),(2140.12±191.03)mmHg/s犦。②同种异体骨髓基质细胞移植入心肌梗死区后能够度过急性炎症期而且不引起明显移植排斥反应;位于梗死区的移植细胞主要分化为成纤维细胞,部分位于心肌梗死区周围的细胞分化为血管内皮细胞,并促进了血管新生。③移植组心肌梗� 展开更多

关键词 骨髓细胞 心肌梗塞 干细胞移植 移植 同种

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露蜂房蛋白对红白血病小鼠脾和骨髓的超微结构的影响 被引量：1

10

作者 张雪莉 张圣明 +2 位作者 王强 吴洪娟 李锋杰 《潍坊医学院学报》 2008年第4期345-346,I0002,共3页

目的观察露蜂房蛋白对红白血病小鼠的脾和骨髓的影响。方法用EL9611细胞株制备红白血病小鼠模型,常规制备超薄切片,透射电镜下观察红白血病小鼠脾和骨髓的超微结构。结果红白血病小鼠脾和骨髓红白血病细胞染色质边集,滑面内质网扩张,线... 目的观察露蜂房蛋白对红白血病小鼠的脾和骨髓的影响。方法用EL9611细胞株制备红白血病小鼠模型,常规制备超薄切片,透射电镜下观察红白血病小鼠脾和骨髓的超微结构。结果红白血病小鼠脾和骨髓红白血病细胞染色质边集,滑面内质网扩张,线粒体呈现空泡样改变,有的出现凋亡小体。结论露蜂房蛋白在体内具有明显的诱导红白血病细胞凋亡的作用,并且白血病细胞呈现典型细胞凋亡的超微结构改变。 展开更多

关键词 露蜂房 蛋白 红白血病 超微结构 EL9611

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过热对脂多糖介导的大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的影响 被引量：9

11

作者 林晓静 邹飞 +3 位作者 李亚洁 王斌 韩雪琳 贺文静 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第24期2255-2257,共3页

目的研究过热对脂多糖(LPS)介导的大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)的影响.方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为常温生理盐水组(C组),高温生理盐水组(H组),常温脂多糖组(L组),高温脂多糖组(HL组).持续描计动物直肠温度(Tr),并... 目的研究过热对脂多糖(LPS)介导的大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)的影响.方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为常温生理盐水组(C组),高温生理盐水组(H组),常温脂多糖组(L组),高温脂多糖组(HL组).持续描计动物直肠温度(Tr),并检测动物应激0,40,80,120min时血浆TNF-α,IL-6含量,动脉血气,血浆肺湿质量/干质量比值(W/D)以及肺病理改变.结果①HL组Tr上升到(43.04±0.11)℃,与C组,L组之间存在显著性差异(P<0.01),与H组之间不存在显著性差异(P>0.05);②HL组动物血浆TNF-α峰值(80min)及IL-6表达水平显著升高(P<0.01);③HL组HCO3-,PaCO2于致伤40min时即出现显著下降(P<0.01),致伤120min时分别为(10.42±1.06)mmol/L,(2.82±0.81)kPa;④HL组动物W/D显著性升高(P<0.05);肺急性微血管损伤有病理学改变.结论过热应激能够加重LPS介导的大鼠ALI/ARDS. 展开更多

关键词 过热 脂多糖 急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征 大鼠

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成人骨髓间充质干细胞体外培养方法的建立及生长特性分析 被引量：3

12

作者 庞荣清 周平 +5 位作者 尹波 李雪梅 张永云 杨勇琴 曲璐 潘兴华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期2436-2439,2443,共5页

目的建立成人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MMSCs)体外分离培养和扩增方法,观察MMSCs在体外培养的生物学特性,为MMSCs的临床应用奠定技术基础。方法采集成人骨髓,密度梯度法分离单个核细胞,利用DMEM/F12培养基添加自体... 目的建立成人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MMSCs)体外分离培养和扩增方法,观察MMSCs在体外培养的生物学特性,为MMSCs的临床应用奠定技术基础。方法采集成人骨髓,密度梯度法分离单个核细胞,利用DMEM/F12培养基添加自体血清进行黏附培养和扩增MMSCs,光镜观察MMSCs生长和形态变化,计数和MTT法观察原代和传代培养的增殖及生长特征,免疫组化法分析MMSCs纯度。结果MMSCs贴壁生长,呈典型MMSCs形态和生长特征,原代及传代5代内的MMSCs均有活跃的增殖能力,其中CD105阳性细胞>98%。结论密度梯度离心结合贴壁培养法可获得高纯度和高增殖活性的MMSCs,成人MMSCs至少在传代培养5代内生长旺盛并维持其生物特性,可满足临床治疗和人体生物组织研究要求。 展开更多

关键词 人 骨髓 间充质干细胞 体外培养 生长特性

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慢性阻塞性肺疾病伴甲功异常36例

13

作者 李复红 赵静 +1 位作者 李朝晖 杨德昌 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第11期1023-1023,共1页

关键词 慢性阻塞性肺疾病 甲功异常

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四种缓解化学药物治疗后骨髓抑制中成药对环磷酰胺所致小鼠血虚模型外周血和骨髓象的影响 被引量：14

14

作者 苗明三 周立华 +2 位作者 侯江红 陈纲领 张玉林 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期3998-4000,共3页

目的:观察补气养血、健脾益肾的参芪颗粒,补气养血的复方阿胶浆,补气养阴的贞芪扶正颗粒,温肾健髓、益气养阴、生血止血的复方皂矾丸4种中成药对环磷酰胺所致小鼠血虚模型外周血及骨髓象的影响。方法:实验于2005-06/09在河南中医学院药... 目的:观察补气养血、健脾益肾的参芪颗粒,补气养血的复方阿胶浆,补气养阴的贞芪扶正颗粒,温肾健髓、益气养阴、生血止血的复方皂矾丸4种中成药对环磷酰胺所致小鼠血虚模型外周血及骨髓象的影响。方法:实验于2005-06/09在河南中医学院药理实验室完成。①选用健康昆明种成年小鼠150只,雌雄不拘。按随机数字表法分为15组,每组10只:高、中、低剂量贞芪扶正颗粒组分别按15,10,5g/kg(20mL/kg)剂量灌胃贞芪扶正颗粒混悬液(主要成分:黄芪、女贞子;甘肃扶正药业科技股份有限公司生产,批号040803);高、中、低剂量复方阿胶浆组分别按10,20,30mL/kg剂量灌胃复方阿胶浆(主要成分:阿胶、熟地黄、党参等;山东东阿阿胶股份有限公司生产,批号050446);高、中、低剂量复方皂矾丸组分别按2.4,1.6,0.8g/kg(20mL/kg)剂量灌胃复方皂矾丸混悬液(主要成分:皂矾、西洋参、海马等;陕西郝其军制药有限责任公司生产,批号041014);高、中、低剂量参芪颗粒组按3,2,1g/kg(0.2mL/10g)剂量灌胃参芪颗粒混悬液(主要成分:人参、黄芪、当归等;江西山高制药有限公司生产,批号040702);鲨肝醇组按10g(20mL)/kg剂量灌胃鲨肝醇混悬液;空白组和模型组灌胃同体积的生理盐水(0.2mL/10g)。每天给药1次,连续给药10d。从实验的第6天开始除空白组外,各组小鼠腹腔注射环磷酰胺40mg/kg,连续给药5d。②各组小鼠分别于末次给药后24h,进行血常规检测。另取右侧股骨,镜下计数骨髓有核细胞数。③计量资料符合正态分布、方差齐者用t检验。结果:小鼠150只均进入结果分析。①对外周血的影响:模型组小鼠血白细胞、红细胞和血小板计数及血红蛋白水平、血细胞比容均明显低于空白组(t=2.49～8.19,P<0.05￣0.01)。鲨肝醇组、各剂量参芪颗粒组和复方阿胶浆组及贞芪扶正颗粒组、复方皂矾丸组小鼠血白细胞计数均明显高于模型� 展开更多

关键词 中成药 血虚模型 血象

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东北梅花鹿初级卵母细胞的超微结构 被引量：6

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作者 马泽芳 张林媛 +1 位作者 郑丁团 刘焕奇 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期59-63,共5页

研究东北梅花鹿初级卵母细胞发育的超微结构变化，目的是为探索东北梅花鹿初级卵母细胞的发育规律提供组织学和形态学依据。本研究于2003年和2004年的6月初到8月末取3只、9月中旬到10月初取4只，共计7只健康经产2～3胎的成年东北梅花鹿... 研究东北梅花鹿初级卵母细胞发育的超微结构变化，目的是为探索东北梅花鹿初级卵母细胞的发育规律提供组织学和形态学依据。本研究于2003年和2004年的6月初到8月末取3只、9月中旬到10月初取4只，共计7只健康经产2～3胎的成年东北梅花鹿卵巢；卵巢经2．5％戊二醛固定液固定后，切取约1mm^3的卵巢皮质和直径0．5～1．5mm及1．5～3mm的卵泡作为电镜观察用材料；该材料经0．1MpH7．2的PBS漂洗、1％锇酸固定、不同浓度乙醇脱水后，再经Epon812和丙酮等量混合液浸透，最后用Epon812包埋制块，并用半薄切片机切成0．5～2μm半薄切片；再经亚甲基兰-天青Ⅱ染色后，在光镜下进行卵泡分类和卵母细胞定位；将经定位的材料用超薄切片机切成厚度为700～800A的切片，经醋酸铀和柠檬酸铅双重染色后，用透射电镜观察、记录并照相。观察时将卵泡依其直径大小、透明带的形成、卵泡腔的出现等分为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和三级卵泡4类。研究结果表明，在原始卵泡阶段，卵母细胞为较规则的圆形，质膜与卵泡细胞膜紧密相贴，有时形成桥粒，细胞器多分布于近核区，高尔基体不典型，线粒体多为圆形，嵴较少；在次级卵泡阶段，2～4层的卵泡细胞局部开始形成透明带，4层以上时形成薄的透明带，微绒毛斜伸人透明带内，方向不规律；在直径为0．5～1．5mm的三级卵泡阶段，卵母细胞的透明带增厚，各种细胞器在皮质区内数量较多，皮质区内高尔基体的数目增多，粗面内质网明显减少；在直径为1．5～3mm的三级卵泡阶段，卵母细胞的透明带继续加厚，微绒毛缩短变弯，开始从透明带退出，许多皮质颗粒开始排列在卵母细胞膜下。 展开更多

关键词 东北梅花鹿 初级卵母细胞 发育 超微结构

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老龄兔骨髓间充质干细胞体外培养影响因素的研究 被引量：3

16

作者 王晔玲 赵学忠 +5 位作者 郑连文 秦玲 汲宏磊 李洋 张志国 杨世杰 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期229-231,共3页

目的 研究体外培养老龄兔骨髓间充质干细胞（MSCs）的影响因素。方法 以密度梯度离心技术及贴壁筛选法相结合，在体外分离检测MSCs表面CD29、CD34、CD44、CD45的表达；诱导分化反向证明部分细胞可分化为成骨细胞及脂肪细胞，具有分化潜... 目的 研究体外培养老龄兔骨髓间充质干细胞（MSCs）的影响因素。方法 以密度梯度离心技术及贴壁筛选法相结合，在体外分离检测MSCs表面CD29、CD34、CD44、CD45的表达；诱导分化反向证明部分细胞可分化为成骨细胞及脂肪细胞，具有分化潜能，鉴定该细胞群为干细胞。细胞记数法计算MSCs倍增时间；观察供体自然老龄情况下。不同换液时间、不同血清浓度、不同种植密度等因素对MSCs生长的影响。结果 MSCs CD29和CD44表达阳性，不表达造血干细胞标志CD34和CD45。高密度接种（3×10^6-4×10^6个／cm^2），低浓度（8％-10％）血清的低糖DMEM培养，在体外可保持MSCs未分化增殖状态，并获得纯度较高同源性较好的干细胞群，高浓度血清（20％）并不加速细胞生长，而促进分化。结论 MSCs具有体外多分化潜能。老龄供体骨髓中MSCs的生长、增殖特性受不同换液时间、不同血清浓度及不同种植密度等因素的影响。 展开更多

关键词 老龄兔 骨髓间充质干细胞 细胞培养

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树突状细胞在再生障碍性贫血患者T细胞寡克隆增生中的作用 被引量：2

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作者 傅晋翔 张勇 +1 位作者 张晓慧 孙谕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期174-178,共5页

目的:探讨树突状细胞(Dendritic cell,DC)在再生障碍性贫血(AA)发病中的作用,尤其是对淋巴细胞异常活化的激发作用。方法:采用直接免疫荧光标记流式细胞术分析AA患者骨髓中I型DC的比例;在体外用重组人粒单细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)及... 目的:探讨树突状细胞(Dendritic cell,DC)在再生障碍性贫血(AA)发病中的作用,尤其是对淋巴细胞异常活化的激发作用。方法:采用直接免疫荧光标记流式细胞术分析AA患者骨髓中I型DC的比例;在体外用重组人粒单细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)及白介素4(IL-4)诱导外周血单个核细胞成为DC,流式细胞仪检测DC表型,并观察经纯化人脐血CD34+细胞抗原,经可溶性人CD40配体(rhsCD40L)激发后对自体T细胞活化和扩增效应;实时定量PCR(RQ-PCR)定量测定DC载荷抗原前后T细胞TCRVβ基因谱的改变。结果:AA患者骨髓中CD1a+CD11c+细胞和CD11c+CD83+双阳性细胞比例增多,且以CD11c+CD83+双阳性的成熟DC为主;外周血来源的DC负载人脐血CD34+细胞后对自体淋巴细胞具有明显的刺激作用,并使T细胞TCRVβ基因谱发生取用偏移。结论:DC在AA淋巴细胞寡克隆增殖中起重要作用,但识别的何种抗原尚进一步研究。 展开更多

关键词 树突状细胞 再生障碍性贫血 T细胞受体库 VΒ基因 实时定量PCR

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湖南地区胸骨旁淋巴结解剖观察 被引量：5

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作者 孙萍 邹琼燕 +1 位作者 唐中华 易文君 《中国医学工程》 2007年第8期654-656,共3页

目的探讨湖南地区胸骨旁淋巴结解剖特点。方法对30具成年尸体胸骨旁淋巴结进行解剖学观察。结果胸骨旁淋巴结总数目为(5.57±2.05),其中第一肋间隙数目为(2.90±1.24),第二肋间为(2.10±1.09),第三肋间为(0.57±0.68),... 目的探讨湖南地区胸骨旁淋巴结解剖特点。方法对30具成年尸体胸骨旁淋巴结进行解剖学观察。结果胸骨旁淋巴结总数目为(5.57±2.05),其中第一肋间隙数目为(2.90±1.24),第二肋间为(2.10±1.09),第三肋间为(0.57±0.68),第四肋间及以下未见淋巴结。结论胸骨旁淋巴结分布于第一、二、三肋间,以第一、第二肋间为主。其数目有性别差异,女性数目多于男性。 展开更多

关键词 胸骨旁淋巴结 肿瘤

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BLyS改组噬菌体文库的构建及初步筛选

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作者 沈琼 宋聿文 +3 位作者 韩威 丁艳丽 龚毅 袁勤生 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期49-52,共4页

从质粒pT7474-BLyS及人胎脑cDNA文库中分别扩增出BLyS和APRIL基因,用DNase I消化后,回收小于50 bp的片断,用于DNA改组。PCR产物与噬菌体载体pfUSE5连接后,电转E.coliER2738获得改组文库。构建的改组文库库容量为8.9×105。对文库进... 从质粒pT7474-BLyS及人胎脑cDNA文库中分别扩增出BLyS和APRIL基因,用DNase I消化后,回收小于50 bp的片断,用于DNA改组。PCR产物与噬菌体载体pfUSE5连接后,电转E.coliER2738获得改组文库。构建的改组文库库容量为8.9×105。对文库进行初步的筛选,获得了一个受体结合活性降低的突变克隆。成功构建了BLyS改组噬菌体文库,为蛋白结构与功能之间关系的深入研究打下了基础。 展开更多

关键词 B细胞刺激引子 DNA改组 噬菌体展示 文库

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BMP-4在人AGM区基质细胞的表达

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作者 陈惠芹 张绪超 +2 位作者 吴燕峰 吴北燕 黄绍良 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期772-775,共4页

本研究旨在观察BMP-4在人胚胎主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞的表达,为建立含AGM区基质细胞的诱导胚胎干细胞造血分化培养体系提供理论和实验依据。体外传代培养人胚胎AGM区基质细胞(hAGM S1-S5)及取自同期胚胎的躯干成纤维细胞(hFT)... 本研究旨在观察BMP-4在人胚胎主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞的表达,为建立含AGM区基质细胞的诱导胚胎干细胞造血分化培养体系提供理论和实验依据。体外传代培养人胚胎AGM区基质细胞(hAGM S1-S5)及取自同期胚胎的躯干成纤维细胞(hFT),采用RT-PCR方法在mRNA水平分析BMP-4在hAGM S1-S5的表达情况,并应用ELISA方法测定BMP-4在hAGM S1-S5细胞培养上清液中的分泌水平,同时以hFT细胞作为对照。结果表明:体外培养中的hAGM S1-S5细胞形态学表现主要为成纤维间质细胞样,少量呈内皮样,是早期胚胎AGM区来源的异质细胞群。hAGM S1-S5细胞均表达BMP-4 mRNA,hFT不表达BMP-4 mRNA。hAGM S1-S5细胞培养上清液中可测得分泌的BMP-4,其分泌水平(pg/ml)分别为55.98±11.20、61.16±9.39、76.26±11.31、86.38±18.34、85.39±21.22,与hFT对照组(16.76±7.04pg/ml)相比有显著性差异(p<0.05),hAGM S1-S5组间比较BMP-4水平无显著性差异(p>0.05)。结论:体外培养中的人AGM区基质细胞表达BMP-4,与AGM区基质细胞支持造血干细胞原始发生的功能相关。 展开更多

关键词 BMP-4 主动脉-性腺-中肾区 基质细胞

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