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人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)的提取及其抗血清的制备和鉴定
被引量:
2
1
作者
李晓楠
卢鼎厚
《生物化学杂志》
CSCD
1994年第1期45-49,共5页
本文提取人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)是综合了文献报导有关提取兔肌α-actinin的和提取鸡胗α-actinin的方法,稍加修改而确定的。用Hasselbach-Schneider缓冲液提取骨骼肌中的肌...
本文提取人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)是综合了文献报导有关提取兔肌α-actinin的和提取鸡胗α-actinin的方法,稍加修改而确定的。用Hasselbach-Schneider缓冲液提取骨骼肌中的肌球蛋白后,将残余物经硼酸-缓冲液提取、匀浆及高速离心去掉肌动蛋白和肌原纤维的其它成份,上清加硫酸铵至30%,35%饱合度所得的沉淀用220mmol/LTris-乙酸溶解、透析、离心后经DE-52柱层析可得电泳纯。α-actinin。将人骨骼肌α-actinin纯化制品免疫了三只大耳白纯种家兔,两个多月后,三只兔子都产生免抗人骨骼肌α-actinin的特异抗血清,用双向免疫扩散法和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定,产生的抗体效价较高,用双扩散法测定效价为1:32,用ELISA测定,用比率法判断结果,效价最高者为1:100,000左右,经免疫电镜观察结果证实,上述抗血清可以满足进一步实验要求。
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关键词
骨骼肌
抗血清
辅肌动蛋白
制备
下载PDF
职称材料
兔骨骼肌肌球蛋白轻链的分离纯化
被引量:
5
2
作者
鲁云霞
周青
+3 位作者
汪惠园
刘虎
朱华庆
汪渊
《安徽医科大学学报》
CAS
2000年第1期14-17,共4页
目的从兔骨骼肌中提取肌球蛋白轻链,为下一步研究肌肉收缩原理提供可磷酸化的底物。方法用离心、透析、柱层析、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电泳转移等方法纯化兔骨骼肌肌球蛋白轻链。结果提取纯化得到较纯的肌球蛋白,进一...
目的从兔骨骼肌中提取肌球蛋白轻链,为下一步研究肌肉收缩原理提供可磷酸化的底物。方法用离心、透析、柱层析、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电泳转移等方法纯化兔骨骼肌肌球蛋白轻链。结果提取纯化得到较纯的肌球蛋白,进一步得到轻链混合液和各种轻链纯品,经紫外吸收检测及SDS0PAG证实其分子量分别为25000(MLC1)、19000(MLC2)和16500(MLC3),均与文献报道基本一致。结论研究所用的方法可行,所得到的肌球蛋白及其轻链样品较纯,可用于下一步实验。
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关键词
分离
提纯
兔
骨骼肌
肌球蛋白轻链
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职称材料
题名
人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)的提取及其抗血清的制备和鉴定
被引量:
2
1
作者
李晓楠
卢鼎厚
机构
北京体育学院运动生理教研室
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1994年第1期45-49,共5页
基金
国家自然科学基金
文摘
本文提取人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)是综合了文献报导有关提取兔肌α-actinin的和提取鸡胗α-actinin的方法,稍加修改而确定的。用Hasselbach-Schneider缓冲液提取骨骼肌中的肌球蛋白后,将残余物经硼酸-缓冲液提取、匀浆及高速离心去掉肌动蛋白和肌原纤维的其它成份,上清加硫酸铵至30%,35%饱合度所得的沉淀用220mmol/LTris-乙酸溶解、透析、离心后经DE-52柱层析可得电泳纯。α-actinin。将人骨骼肌α-actinin纯化制品免疫了三只大耳白纯种家兔,两个多月后,三只兔子都产生免抗人骨骼肌α-actinin的特异抗血清,用双向免疫扩散法和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定,产生的抗体效价较高,用双扩散法测定效价为1:32,用ELISA测定,用比率法判断结果,效价最高者为1:100,000左右,经免疫电镜观察结果证实,上述抗血清可以满足进一步实验要求。
关键词
骨骼肌
抗血清
辅肌动蛋白
制备
Keywords
Skeletal muscle
α-actinin
Antiserum
分类号
Q593.303 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
兔骨骼肌肌球蛋白轻链的分离纯化
被引量:
5
2
作者
鲁云霞
周青
汪惠园
刘虎
朱华庆
汪渊
机构
安徽医科大学分子生物学实验室和生物化学教研室
安徽医科大学第一附属医院血液内科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
2000年第1期14-17,共4页
基金
中华人民共和国教育部优秀年轻教师研究基金!99044312
国家自然科学研究基金!39870324
安徽省教委科学研究基金!99JL0090
文摘
目的从兔骨骼肌中提取肌球蛋白轻链,为下一步研究肌肉收缩原理提供可磷酸化的底物。方法用离心、透析、柱层析、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电泳转移等方法纯化兔骨骼肌肌球蛋白轻链。结果提取纯化得到较纯的肌球蛋白,进一步得到轻链混合液和各种轻链纯品,经紫外吸收检测及SDS0PAG证实其分子量分别为25000(MLC1)、19000(MLC2)和16500(MLC3),均与文献报道基本一致。结论研究所用的方法可行,所得到的肌球蛋白及其轻链样品较纯,可用于下一步实验。
关键词
分离
提纯
兔
骨骼肌
肌球蛋白轻链
Keywords
myosin light chains/isolation and purification
phosphorylatable substrate
SDS-PAGE
rabbit skeletal muscle
分类号
Q593.303 [生物学—生物化学]
Q445
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)的提取及其抗血清的制备和鉴定
李晓楠
卢鼎厚
《生物化学杂志》
CSCD
1994
2
下载PDF
职称材料
2
兔骨骼肌肌球蛋白轻链的分离纯化
鲁云霞
周青
汪惠园
刘虎
朱华庆
汪渊
《安徽医科大学学报》
CAS
2000
5
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职称材料
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