反胶团提取脂肪酶动力学研究 (Ⅱ)反萃取过程 被引量：1

1

作者 陈少欣 林文銮 《华侨大学学报（自然科学版）》 CAS 1999年第2期182-185,共4页

研究以ＡＯＴ／异辛烷反胶团溶液的反萃取脂肪酶动力学．通过改变水相ｐＨ值、离子强度、搅拌速度和反胶团中脂肪酶浓度来测定总质量传质系数．结果表明，传质系数与水相的ｐＨ值、离子强度有关，而与搅拌速度、反胶团中脂肪酶浓度无关... 研究以ＡＯＴ／异辛烷反胶团溶液的反萃取脂肪酶动力学．通过改变水相ｐＨ值、离子强度、搅拌速度和反胶团中脂肪酶浓度来测定总质量传质系数．结果表明，传质系数与水相的ｐＨ值、离子强度有关，而与搅拌速度、反胶团中脂肪酶浓度无关．说明该反萃取过程属于界面控制，进而提出反萃取过程机理． 展开更多

关键词 反胶团 反萃取 动力学 脂肪酶

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一种新的酯酶同工酶染色方法 被引量：6

2

作者 卢萍 刘军 邬惠梅 《内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）》 CAS 1999年第4期327-328,共2页

A new method of easter isozyme dyeimg about Leymus chinensis is introduced and some methods are compared.

关键词 酯酶同工酶 染色法 电泳法 活性染色检测

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疏水作用层析纯化脂肪酶 被引量：1

3

作者 应国清 王伟娜 周晓云 《生物技术》 CAS CSCD 1997年第5期15-17,共3页

报道了以对β-硫酸酯己砜基苯胺（SESA）为活化剂制备疏水作用层析剂方法及其柱层析纯化脂肪酶的工艺条件。实验结果表明：活化剂对-β-硫酸酯己砜基苯胺（SESA）最适用量为1．0g／g湿纸纤维素。笨胺：丙酮比为1：4．以0．2mol／L磷酸... 报道了以对β-硫酸酯己砜基苯胺（SESA）为活化剂制备疏水作用层析剂方法及其柱层析纯化脂肪酶的工艺条件。实验结果表明：活化剂对-β-硫酸酯己砜基苯胺（SESA）最适用量为1．0g／g湿纸纤维素。笨胺：丙酮比为1：4．以0．2mol／L磷酸缓冲液（pH8.0）=1mol／LNaCl为淋洗剂，以0．2mol／L磷酸缓冲液（pH8．0）＋8％吐温80为洗脱刘纯化脂肪酶具有较好的分辨率，酶活回收率64．0％，比活提高6．70倍。 展开更多

关键词 脂肪酶 疏水作用层析 层析纯化

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酶放大镧系元素发光法测定碱性磷酸酶 被引量：6

4

作者 赵启仁 李美佳 +4 位作者 刘洁 宋娜玲 庄湘莲 陈艾 林汉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第1期71-74,共4页

报告了应用酶放大镧系元素发光法测定碱性磷酸酶的方法．应用５氟水杨酸磷酸酯作为酶底物，并对方法学中的多种因素进行了最佳比．用甲基硅油（Ｉ）改进了信／噪比的稳定性．方法的灵敏度为４Ｕ／Ｌ．精密度为１０％．精密度为１０％... 报告了应用酶放大镧系元素发光法测定碱性磷酸酶的方法．应用５氟水杨酸磷酸酯作为酶底物，并对方法学中的多种因素进行了最佳比．用甲基硅油（Ｉ）改进了信／噪比的稳定性．方法的灵敏度为４Ｕ／Ｌ．精密度为１０％．精密度为１０％的浓度范围是２００～３００×１０２Ｕ／Ｌ．测量值的相对误差＜１０％．测定了血清中的碱性磷酸酶浓度，回收率为９３％～９５％． 展开更多

关键词 酶放大 镧系元素 发光分析法 碱性磷酸酶

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脂肪酶固定化工艺 被引量：2

5

作者 应国清 周晓云 《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CAS CSCD 1999年第1期50-52,共3页

研究了以纸纤维素为载体，对－β－硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）为活化剂共价偶联法固定化脂肪酶的最适条件及固定化酶的稳定性。结果表明：醚化反应最适ｐＨ为１０．０，偶联最适条件为ｐＨ８．０，酶量控制在８００μｍｏｌ／（ｍｉ... 研究了以纸纤维素为载体，对－β－硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）为活化剂共价偶联法固定化脂肪酶的最适条件及固定化酶的稳定性。结果表明：醚化反应最适ｐＨ为１０．０，偶联最适条件为ｐＨ８．０，酶量控制在８００μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｇ），所获得固定化脂肪酶具有较高的酶活和酶回收率，且有较好的稳定性，其半衰期为３７５ｈ． 展开更多

关键词 脂肪酶 固定化 纸纤维素 SESA 偶联法

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影响血清中GPI-PLD活性检测的因素

6

作者 龚隽 余明琨 《生命科学研究》 CAS CSCD 1999年第4期321-325,共5页

采用在碱性条件下正丁醇抽提的人胎盘膜上的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）作底物， 检测血清中糖基磷脂酰肌醇－ 特异性的磷脂酶Ｄ （ＧＰＩ－ＰＬＤ） 的活性水平． 这种ＡＬＰ 含疏水的ＧＰＩ锚定膜结构（ａｎｃｈｏｒ）， 与血清保温后能被... 采用在碱性条件下正丁醇抽提的人胎盘膜上的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）作底物， 检测血清中糖基磷脂酰肌醇－ 特异性的磷脂酶Ｄ （ＧＰＩ－ＰＬＤ） 的活性水平． 这种ＡＬＰ 含疏水的ＧＰＩ锚定膜结构（ａｎｃｈｏｒ）， 与血清保温后能被其中的ＧＰＩ－ＰＬＤ降解成亲水的不含ＧＰＩ－锚定的ＡＬＰ． 采用Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４ 二相分离法和梯度凝胶电泳法来分离含ＧＰＩ的ＡＬＰ和不含ＧＰＩ的ＡＬＰ， 计算出转化率（％ ）， 用来表示ＧＰＩ－ＰＬＤ酶活性． 对这两种方法进行比较后， 表明在一般实验室条件下， 二相分离法更为简便， 并对其影响因素进行了全面探讨． 展开更多

关键词 寡聚糖基 磷酯酰肌醇 血清检测 磷脂酶D TritonX

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超临界CO_2处理脂肪酶的研究

7

作者 林春绵 施梅勤 茅惠忠 《浙江工业大学学报》 CAS 1997年第2期132-136,共5页

建立了一套超临界CO2处理脂肪酶的装置，并在不同条件下进行了超临界CO2处理脂肪酶的实验。结果表明脂肪酶不溶于超临界CO2，处理后酶活力略有下降，但不影响其最适温度和p0值。

关键词 超临界 二氧化碳处理 脂肪酶

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钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶的制备 被引量：2

8

作者 丁文勇 任凤 赵宝昌 《吉林大学自然科学学报》 CSCD 1999年第3期81-84,共4页

通过两次离子交换柱层析， 从牛脑中制备钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶． 所得酶不含内源性钙调素， 能被足量外加的钙调素激活 １４ 倍，

关键词 环核苷酸 磷酸二酯酶 钙调素 制备 PDE

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Candida rugosa脂肪酶同工酶的分离及选择固定化 被引量：5

9

作者 辛嘉英 徐毅 +1 位作者 李树本 王来来 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第5期513-516,共4页

采用“界面亲和层析” ,从商品Candidarugosa脂肪酶 (CRL)中分离到三个同工酶 (CRL 1、CRL 2和CRL 3) ,它们在水 有机溶剂双液相体系中催化 (R ,S) 萘普生甲酯的不对称水解反应 ,具有不同的立体选择性 .分析表明 :CRL 1和CRL 2上不同... 采用“界面亲和层析” ,从商品Candidarugosa脂肪酶 (CRL)中分离到三个同工酶 (CRL 1、CRL 2和CRL 3) ,它们在水 有机溶剂双液相体系中催化 (R ,S) 萘普生甲酯的不对称水解反应 ,具有不同的立体选择性 .分析表明 :CRL 1和CRL 2上不同程度地非共价结合有小分子的酸性化合物 ,阻碍了其活性位点处疏水腔的完全开放 ;CRL 3上不含有该小分子酸性化合物 ,活性位点处疏水腔可处于完全开放构象 .据此分别将CRL同工酶选择性地固定在不同的载体 (GDX10 1和YWG NH2 )上 .通过简单易行的选择吸附步骤 ,可同时达到同工酶的分离及固定化目的 。 展开更多

关键词 CRL同工酶 分离 界面亲和层析 选择性固定化

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牛小脑肌醇磷脂激酶PI(4)K高产率纯化与特征 被引量：2

10

作者 乐加昌 盖丽云 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第5期473-477,共5页

对牛小脑膜区肌醇磷脂激酶进行了１１ ５００ 倍纯化， 过程包括： ＴｒｉｔｏｎＸ１００ 抽提， 硫酸铵沉淀， 阳离子交换层析（ｐｈｏｓｐｈｏｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）， 亲和层析（Ｈｅｐａｒｉｎ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ６Ｂ） ... 对牛小脑膜区肌醇磷脂激酶进行了１１ ５００ 倍纯化， 过程包括： ＴｒｉｔｏｎＸ１００ 抽提， 硫酸铵沉淀， 阳离子交换层析（ｐｈｏｓｐｈｏｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）， 亲和层析（Ｈｅｐａｒｉｎ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ６Ｂ） 和阴离子交换层析（ＤＥＡＥ１０， ＦＰＬＣ） 等． 纯化程度可达９５ ％ 以上， 对ＳＤＳＰＡＧＥ电泳结果进行扫描分析测其分子质量为５６ ｋｕ． 纯化的肌醇磷脂激酶的特异活性为４５０ ｎｍｏｌ／ｍｇ·ｍｉｎ， 动力学性质表现为ＡＴＰ的表观Ｋｍ 值为７９ ×１０－７ ｍｏｌ／Ｌ， ＰＩ的表观Ｋｍ 值为６６ ×１０－ ７ ｍｏｌ／Ｌ． 腺嘌呤核苷是该酶的有效抑制剂， ３５ ×１０－７ ｍｏｌ／Ｌ 腺嘌呤核苷可使该酶活力降低约５０ ％ ， 而ＴｒｉｔｏｎＸ１００ 对该酶活力具有刺激作用， ０５％ ＴｒｉｔｏｎＸ１００ 可使该酶表现为最高活力． 展开更多

关键词 信号传导 牛 小脑 肌醇磷脂激酶 纯化

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AOT/异辛烷反胶团体系提取脂肪酶的研究 被引量：2

11

作者 于艳春 郑纯智 +1 位作者 褚莹 吴子生 《淮海工学院学报（自然科学版）》 CAS 1998年第3期49-51,共3页

研究了表面活性剂 AOT的浓度及相体积比对 AOT/异辛烷反胶团体系提取脂肪酶的影响。随表面活性剂浓度增加提取率增大 ;表面活性剂浓度一定时 ,p H值低提取率高 ;提取率一定时 ,p H值低所需表面活性剂浓度也低。相体积比 (V油 /V水 )增... 研究了表面活性剂 AOT的浓度及相体积比对 AOT/异辛烷反胶团体系提取脂肪酶的影响。随表面活性剂浓度增加提取率增大 ;表面活性剂浓度一定时 ,p H值低提取率高 ;提取率一定时 ,p H值低所需表面活性剂浓度也低。相体积比 (V油 /V水 )增大 ,提取率增大。 展开更多

关键词 反胶团 相转移 脂肪酶 表面活性剂 AOT 提取

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大麦根磷脂酶提取条件研究

12

作者 张晋陆 朱国洪 《淮海工学院学报（自然科学版）》 CAS 1998年第3期52-55,58,共5页

大麦根中含有较高活力的磷脂酶。提取磷脂酶的条件为 1 0倍大麦根重量的水浸提 2 0小时 ,浸提温度 2 0℃ ,p H6.5。温度对磷脂酶提取影响最大 ,依次为 p H和提取时间。Ca2 +对磷脂酶有激活作用 ,当 Ca2 +浓度 0 .0 0 5mol/L,反应温度 4... 大麦根中含有较高活力的磷脂酶。提取磷脂酶的条件为 1 0倍大麦根重量的水浸提 2 0小时 ,浸提温度 2 0℃ ,p H6.5。温度对磷脂酶提取影响最大 ,依次为 p H和提取时间。Ca2 +对磷脂酶有激活作用 ,当 Ca2 +浓度 0 .0 0 5mol/L,反应温度 40℃时酶活力达最大值 。 展开更多

关键词 大麦根 磷脂酶 酶活力 提取

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离子交换高效液相色谱法分析兔肝环核苷酸磷酸二酯酶反应体系 被引量：1

13

作者 廖飞 张晓萍 +4 位作者 周岐新 杨俊清 曾昭淳 陈文缘 汤先觉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期20-22,共3页

目的：用阴离子交换HPLC分析环核苷酸磷酸二酯酶反应体系。方法：用Shim-Pak WAX-1柱，30 mmol/L 的pH 4.0磷酸钾为流动相，洗脱速度0.5 ml/min，254 nm 检测，峰面积定量。结果：上述离子交换HPLC体系可分离并定量测定cAMP和AMP。在硫... 目的：用阴离子交换HPLC分析环核苷酸磷酸二酯酶反应体系。方法：用Shim-Pak WAX-1柱，30 mmol/L 的pH 4.0磷酸钾为流动相，洗脱速度0.5 ml/min，254 nm 检测，峰面积定量。结果：上述离子交换HPLC体系可分离并定量测定cAMP和AMP。在硫酸铵分级粗制兔肝PDE反应混合物中，cAMP 和AMP同杂质完全基线分离；随反应进行，cAMP逐步下降，AMP上升到平台后再下降。用米氏酶的积分速度方程作图分析cAMP下降的进程曲线，发现硫酸铵分级粗制的兔肝PDE的米氏常数为负数。结论：此离子交换HPLC方法可以分析无杂酶干扰时PDE对cAMP的水解。 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶 离子交换高效液相色谱法 3 5-cAMP 5-AMP

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Candida rugosa脂肪酶交联酶晶体稳定性研究 被引量：1

14

作者 潘力 林炜铁 姚汝华 《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1998年第4期397-400,共4页

交联酶晶体（ＣｒｏｓｓＬｉｎｋｅｄＥｎｚｙｍｅＣｒｙｓｔａｌ，ＣＬＥＣｓ）是一种新型的生物催化剂．本研究对Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ脂肪酶交联酶晶体的制备以及其稳定性进行了探索，制备得的交联酶晶体不仅保持酶原有的特性... 交联酶晶体（ＣｒｏｓｓＬｉｎｋｅｄＥｎｚｙｍｅＣｒｙｓｔａｌ，ＣＬＥＣｓ）是一种新型的生物催化剂．本研究对Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ脂肪酶交联酶晶体的制备以及其稳定性进行了探索，制备得的交联酶晶体不仅保持酶原有的特性，而且提高了酶在极端环境条件（高酸碱度、高温）下的稳定性。 展开更多

关键词 脂肪酶 交联酶晶体 稳定性 CRL 酶制剂

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微孔比色法在猪胰腺PLA_2制备中的应用 被引量：5

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作者 刘猛六 胡卓逸 徐龙川 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期570-575,共6页

微孔比色法采用合成的磷脂类似物２－硫代十六酰乙基磷酸胆碱作底物，在多孔聚苯乙烯板的小孔中反应，并用酶联免疫检测器连续测定和记录吸收值．同时应用此法及滴定法检测酶活力，从猪胰腺中制备了一种分子量低（１４．３ｋＤ），对热... 微孔比色法采用合成的磷脂类似物２－硫代十六酰乙基磷酸胆碱作底物，在多孔聚苯乙烯板的小孔中反应，并用酶联免疫检测器连续测定和记录吸收值．同时应用此法及滴定法检测酶活力，从猪胰腺中制备了一种分子量低（１４．３ｋＤ），对热、酸稳定，活性依赖Ｃａ２＋的ＰＬＡ２．两种方法检测结果具有可比性，而微孔比色法同时可测多个样品，有节约样品，灵敏度较高等优点．微孔比色法特别适用于大量的样品测定，如拮抗剂筛选、临床样品及制备酶时层析级分的检测等． 展开更多

关键词 磷脂酶A2 胰腺 微孔比色法 制备

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亲和层析分离纯化神经毒性酯酶

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作者 伍一军 冷欣夫 《昆虫知识》 CSCD 1995年第6期367-369,共3页

关键词 神经毒性酯酶 亲和层析 分离 提纯

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