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Smad4-siRNA真核表达载体的构建与鉴定
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作者 李萍 范玉强 +7 位作者 曹武奎 梁树人 李顺天 郄春花 戴晨阳 李秀梅 徐健 刘莉 《实用预防医学》 CAS 2007年第4期1028-1030,共3页
目的构建Smad4特异的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Smad4表达在肝纤维化治疗中的意义奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的Smad4基因核苷酸序列,选择设计能转录小发夹结构RNA(Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与psilencer3.1-H1-h... 目的构建Smad4特异的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Smad4表达在肝纤维化治疗中的意义奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的Smad4基因核苷酸序列,选择设计能转录小发夹结构RNA(Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与psilencer3.1-H1-hygro质粒载体连接,构建真核表达载体,使用限制性内切酶鉴定及测序鉴定是否为阳性克隆。结果成功构建psilencer3.1-Smad4载体,拟进一步采用RNAi技术观察其对Smad4基因表达的抑制情况,从而研究其在肝纤维化治疗中的作用。结论Smad4-siRNA真核表达载体被成功构建。 展开更多
关键词 SMAD4 RNA干扰 肝纤维化 载体构建
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富含多糖多酚的侧柏叶片总RNA提取方法 被引量:28
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作者 王暑辉 徐倩 +1 位作者 徐筱 徐吉臣 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期76-80,89,共6页
以侧柏叶片为试验材料,利用Trizol法、CTAB法、SDS酚法和改进的SDS酚法提取RNA,结果表明:Tri-zol法和CTAB法都不能提出侧柏叶片总RNA;SDS酚法提取,提取物中含有大量多糖,提取的RNA质量少,不足以用于后续的研究;改进的SDS酚法提取的RNA... 以侧柏叶片为试验材料,利用Trizol法、CTAB法、SDS酚法和改进的SDS酚法提取RNA,结果表明:Tri-zol法和CTAB法都不能提出侧柏叶片总RNA;SDS酚法提取,提取物中含有大量多糖,提取的RNA质量少,不足以用于后续的研究;改进的SDS酚法提取的RNA纯度高,电泳效果好。进一步通过反转录和特异引物扩增试验发现:利用改进的SDS酚法提取的RNA反转录效果好,能扩增出预期的基因片段,可很好地应用于基因克隆与基因表达分析等分子生物学试验研究。 展开更多
关键词 侧柏 RNA 多糖 多酚 改进的SDS酚法
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全转录组水平研究长非编码RNA方法学进展 被引量:2
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作者 刘楚霄 李响 陈玲玲 《生命的化学》 CAS CSCD 2016年第6期745-752,共8页
近年来越来越多的长非编码RNAs(long noncoding RNA,lncRNAs)在不同的物种中被相继发现。lncRNAs广泛参与细胞中多种重要的功能调控。如何通过细胞生物学、分子生物学、生物化学及计算生物学的方法有效地研究lncRNAs是众多研究者关注的... 近年来越来越多的长非编码RNAs(long noncoding RNA,lncRNAs)在不同的物种中被相继发现。lncRNAs广泛参与细胞中多种重要的功能调控。如何通过细胞生物学、分子生物学、生物化学及计算生物学的方法有效地研究lncRNAs是众多研究者关注的话题之一。该文总结了近年来基于高通量测序技术在全转录组水平研究lncRNAs领域的相关方法学进展,包括lncRNAs的发现与鉴定、如何研究lncRNAs在细胞中的功能及相互作用方式、lncRNAs的二级结构以及新生lncRNAs的研究方法等。 展开更多
关键词 长非编码RNAs 转录组水平 RNA.蛋白质相互作用 二级结构 新生转录本
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中科院上海生化与细胞所发明安全高效的RNAi新技术
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《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1169-1169,共1页
2015年10月12日,国际学术期刊Nature Communications在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)吴立刚研究组的最新研究成果'Ribozyme-enhanced single-stranded Ago2-processed i... 2015年10月12日,国际学术期刊Nature Communications在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)吴立刚研究组的最新研究成果'Ribozyme-enhanced single-stranded Ago2-processed interfering RNA triggers efficient 展开更多
关键词 上海生化 细胞生物学 PROCESSED 国际学术期刊 研究成果 stranded interfer
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改良盐酸胍法提取水稻纹枯病菌RNA的效果分析 被引量:1
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作者 冯典兴 李平 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期86-88,共3页
为了选出一种适合水稻纹枯病菌RNA的提取方法,比较了改良的盐酸胍法同热酚法、Trizol法提取水稻纹枯病菌RNA的效果。结果表明:3种方法中,改良的盐酸胍法和Trizol法可以提取到高质量的RNA,热酚法的提取效果不理想。改良的盐酸胍法提取的... 为了选出一种适合水稻纹枯病菌RNA的提取方法,比较了改良的盐酸胍法同热酚法、Trizol法提取水稻纹枯病菌RNA的效果。结果表明:3种方法中,改良的盐酸胍法和Trizol法可以提取到高质量的RNA,热酚法的提取效果不理想。改良的盐酸胍法提取的RNA进行mRNA差异显示的结果表明,没有多糖对后继反应的干扰,是一种经济有效的水稻纹枯病菌RNA的提取方法。用该法提取RNA,可以满足分子克隆与基因表达分析等分子生物学后继试验。 展开更多
关键词 RNA 提取方法 水稻纹枯病菌 TRIZOL 盐酸胍法 热酚法
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系统性RNAi研究进展
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作者 陈留存 邵宁生 沈倍奋 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期26-29,共4页
系统性是RNAi效应的一个重要特征,在线虫、原生动物及植物中RNAi均具有系统性,即RNAi效应可在细胞间与组织间进行传递。本文主要介绍线虫及植物中的系统性RNAi及与此效应有关的基因及信号分子,并探讨了其可能的作用机制及生物学意义。
关键词 RNA干扰 系统性 信号分子
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RNAi干扰抑制癌症活跃基因
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《生命世界》 2010年第7期79-79,共1页
加拿大麦吉尔大学生物化学系研究人员发现,与核糖核酸相结合的一种蛋白质片断能够控制基因的正常表达,其中包括那些在癌症中活跃的基因。专家认为,这是癌症研究工作的一项重要突破,可立即将其应用到实验室的研究工作中,该研究成果... 加拿大麦吉尔大学生物化学系研究人员发现,与核糖核酸相结合的一种蛋白质片断能够控制基因的正常表达,其中包括那些在癌症中活跃的基因。专家认为,这是癌症研究工作的一项重要突破,可立即将其应用到实验室的研究工作中,该研究成果将推进目前各国科学家广泛开展的癌症个性化治疗工作。 展开更多
关键词 控制基因 癌症 干扰抑制 RNAI 研究人员 研究成果 化学系 蛋白质
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轮状病毒入侵细胞机制的研究进展
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作者 蔡秀清 董永红 周鹏 《热带农业科学》 2005年第5期81-84,共4页
轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿腹泻死亡的主要病原体之一,是一种没有外膜的RNA病毒,由3层同心的蛋白质衣壳包被双链RNA基因组构成。RV入侵宿主细胞是一个有机的多步骤过程,有多种受体参与,其作用机理还不完全清楚,目前认为,病毒... 轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿腹泻死亡的主要病原体之一,是一种没有外膜的RNA病毒,由3层同心的蛋白质衣壳包被双链RNA基因组构成。RV入侵宿主细胞是一个有机的多步骤过程,有多种受体参与,其作用机理还不完全清楚,目前认为,病毒与宿主细胞表面受体之间至少存在4种相互作用关系。 展开更多
关键词 轮状病毒 细胞入侵 整合素 热休克蛋白 唾液酸
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核糖体结构与功能简介——2009年诺贝尔化学奖简介
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作者 朱海英 《化学教学》 CAS 2010年第2期46-48,共3页
核糖体是除哺乳类成熟的红细胞外.一切活细胞中均有的。核糖体是最小的细胞器,是细胞内一种核糖核蛋白颗粒,主要由核糖核酸(rRNA)和蛋白质构成,其惟一功能是按照mRNA的指令。将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以,核糖体是将所有的生... 核糖体是除哺乳类成熟的红细胞外.一切活细胞中均有的。核糖体是最小的细胞器,是细胞内一种核糖核蛋白颗粒,主要由核糖核酸(rRNA)和蛋白质构成,其惟一功能是按照mRNA的指令。将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以,核糖体是将所有的生命中的遗传信息翻译成蛋白质的分子工厂。 展开更多
关键词 核糖体 诺贝尔化学奖 功能简介 体结构 核糖核蛋白 核糖核酸 mRNA 遗传信息
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大鼠牙胚组织总RNA的制备
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作者 隋文 肖明振 洪咏龙 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1999年第3期241-241,共1页
关键词 牙胚组织 RNA 制备
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Phylogenetic relationships among six species of Epistylis inferred from 18S-ITS1 sequences 被引量:1
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作者 缪炜 余育和 +1 位作者 沈韫芬 张锡元 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2002年第3期280-288,共9页
Phylogenetic relationships among six species of Epistylis (i. e. E. plicatilis, E. urceolata, E. chrysemydis, E. hentscheli, E. wenrichi, and E. galea) were investigated using sequences of the first internal transcrib... Phylogenetic relationships among six species of Epistylis (i. e. E. plicatilis, E. urceolata, E. chrysemydis, E. hentscheli, E. wenrichi, and E. galea) were investigated using sequences of the first internal transcribed spacer region (ITS-1) of ribosomal DNA (rDNA). Amplified rDNA fragment sequences consisted of 215 or 217 bases of the flanking 18S and 5.8S regions, and the entire ITS-1 region (from 145 to 155 bases). There were more than 33 variable bases between E. galea and the other five species in both the 18S region and the ITS-1 region. The affiliation of them was assessed using Neighbor-joining (NJ), maximum parsimony (MP) and maximum likelihood (ML) analyses. In all the NJ, MP and ML analyses E. galea, whose macronucleic position and shape are distinctly different from those of the other five species, was probably diverged from the ancestor of Epistylis earlier than the other five species. The topology in which E. plicatilis and E. hentscheli formed a strongly supported sister clade to E. urceolata, E. chrysemydis, and E. wenrichi was consistent with variations in the thickness of the peristomial lip. We concluded that the macronucleus and peristomial lip might be the important phylogenetic characteristics within the genus Epistylis. 展开更多
关键词 Epistylis 18S-ITS1 region PHYLOGENETIC relationships method in SITU (prepare DNA from field-sampled SPECIES for PCR) macronucleus.
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异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取组织中的RNA 被引量:15
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作者 王尧河 张云汉 +8 位作者 卞丽红 王宏 郑宇 李春海 张立新 付淑莉 高冬玲 张宏新 付保进 《河南医科大学学报》 1997年第3期25-27,共3页
为寻找一种简便、低消耗、提取高质量RNA的方法,基于异硫氰酸胍酚氯仿一步法,省去变性液D二次溶解RNA提取组织中的RNA。结果:从200多例肿瘤组织中提取出高质量的RNA,所需费用与购买试剂盒相比节约了75%。结... 为寻找一种简便、低消耗、提取高质量RNA的方法,基于异硫氰酸胍酚氯仿一步法,省去变性液D二次溶解RNA提取组织中的RNA。结果:从200多例肿瘤组织中提取出高质量的RNA,所需费用与购买试剂盒相比节约了75%。结果提示:异硫氰酸胍酚氯仿一步法是一种简便、经济、适合大量样本的RNA提取方法。 展开更多
关键词 提取 RNA 异硫氰酸胍 氯仿 肿瘤
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Overview of guide RNA design tools for CRISPR-Cas9 genome editing technology 被引量:1
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作者 Lihua Julie Zhu 《Frontiers in Biology》 CAS CSCD 2015年第4期289-296,共8页
CRISPR-Cas (Clustered, Regularly Interspaced, Short Palindromic Repeats - CRISPR-associated (Cas)) RNA guided endonuclease has emerged as the most effective and widely used genome editing technology, which has bec... CRISPR-Cas (Clustered, Regularly Interspaced, Short Palindromic Repeats - CRISPR-associated (Cas)) RNA guided endonuclease has emerged as the most effective and widely used genome editing technology, which has become the most exciting and rapidly advancing research field. Efficient genome editing by the CRISPR-Cas9 system has been demonstrated in many species, and several laboratories have established CRISPR-Cas9 as a screening tool for systematic genetic analysis, similar to sbRNA screening. At least three companies have been founded to leverage this technology for therapeutic uses. To facilitate the implementation of this technology, many software tools have been developed to identify guide RNAs that effectively target a desired genomic region. Here, I provide an overview of the technology, focusing on guide RNA design principles, available software tools and their strengths and weaknesses. 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9 genome editing gRNA design off-target analysis gRNA efficacy
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Visual BASIC编程在核酸序列分析中的应用研究初探 被引量:1
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作者 葛威 鲍大鹏 +1 位作者 董战峰 施铮 《生物信息学》 2004年第4期42-46,共5页
利用可视化的编程语言VisualBASIC编写了一个简易实用的核酸序列分析程序 ,能够自动实现对已知核酸序列的分子质量、Tm值、碱基组成的测定、各种核酸序列的转换和氨基酸序列的推导。同时也详细描述了核酸序列自动分析各功能实现的Visual... 利用可视化的编程语言VisualBASIC编写了一个简易实用的核酸序列分析程序 ,能够自动实现对已知核酸序列的分子质量、Tm值、碱基组成的测定、各种核酸序列的转换和氨基酸序列的推导。同时也详细描述了核酸序列自动分析各功能实现的VisualBASIC语言编程过程。 展开更多
关键词 分子生物学软件 VISUAL BASIC编程 核酸序列分析
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Grammar Model Based on Lexical Substring Extraction for RNA Secondary Structure Prediction
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作者 唐四薪 谭晓兰 周勇 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第4期704-707,745,共5页
[Objective] To examine the grammar model based on lexical substring exac- tion for RNA secondary structure prediction. [Method] By introducing cloud model into stochastic grammar model, a machine learning algorithm su... [Objective] To examine the grammar model based on lexical substring exac- tion for RNA secondary structure prediction. [Method] By introducing cloud model into stochastic grammar model, a machine learning algorithm suitable for the lexicalized stochastic grammar model was proposed. The word grid mode was used to extract and divide RNA sequence to acquire lexical substring, and the cloud classifier was used to search the maximum probability of each lemma which was marked as a certain sec- ondary structure type. Then, the lemma information was introduced into the training stochastic grammar process as prior information, realizing the prediction on the sec- ondary structure of RNA, and the method was tested by experiment. [Result] The experimental results showed that the prediction accuracy and searching speed of stochastic grammar cloud model were significantly improved from the prediction with simple stochastic grammar. [Conclusion] This study laid the foundation for the wide application of stochastic grammar model for RNA secondary structure prediction. 展开更多
关键词 RNA secondary structure Stochastic grammar Lexicalize Structure prediction
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mRNA 5′端二级结构的预测法 被引量:3
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作者 郑仲承 《生命的化学》 CAS CSCD 2000年第4期176-178,共3页
关键词 MRNA 二级结构 预测
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Plasma miRNA expression profile in the diagnosis o' late-onset hypogonadism
17
作者 Nicholas Russell Mathis Grossmann 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2016年第5期713-715,共3页
Researchers reporting in the Nature journal Scientific Reports haveused next generation sequencing and quantitative reverse transcriptase PCR (RT-PCR) technology to profile plasma microRNA (miRNA) expression in co... Researchers reporting in the Nature journal Scientific Reports haveused next generation sequencing and quantitative reverse transcriptase PCR (RT-PCR) technology to profile plasma microRNA (miRNA) expression in cohorts of men with and without late-onset hypogonadism (LOH). The study proposes a panel of three miRNAs as novel biomarkers to aid in the diagnosis of LOH. 展开更多
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Rethinking quasispecies theory: From fittest type to cooperative consortia
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作者 Luis P Villarreal Guenther Witzany 《World Journal of Biological Chemistry》 CAS 2013年第4期79-90,共12页
Recent investigations surprisingly indicate that single RNA "stem-loops" operate solely by chemical laws that act without selective forces, and in contrast, self-ligated consortia of RNA stem-loops operate b... Recent investigations surprisingly indicate that single RNA "stem-loops" operate solely by chemical laws that act without selective forces, and in contrast, self-ligated consortia of RNA stem-loops operate by biological selection. To understand consortial RNA selection, the concept of single quasi-species and its mutant spectra as drivers of RNA variation and evolution is rethought here. Instead, we evaluate the current RNA world scenario in which consortia of cooperating RNA stem-loops(not individuals) are the basic players. We thus redefine quasispecies as RNA quasispecies consortia(qs-c) and argue that it has essential behavioral motifs that are relevant to the inherent variation, evolution and diversity in biology. We propose that qs-c is an especially innovative force. We apply qs-c thinking to RNA stem-loops and evaluate how it yields altered bulges and loops in the stem-loop regions, not as errors, but as a natural capability to generate diversity. This basic competencenot error-opens a variety of combinatorial possibilities which may alter and create new biological interactions, identities and newly emerged self identity(immunity) functions. Thus RNA stem-loops typically operate as cooperative modules, like members of social groups. Fromsuch qs-c of stem-loop groups we can trace a variety of RNA secondary structures such as ribozymes, viroids, viruses, mobile genetic elements as abundant infection derived agents that provide the stem-loop societies of small and long non-coding RNAs. 展开更多
关键词 QUASISPECIES RNA stem-loops INFECTIOUS AGENTS COOPERATIVE interactions Evolution
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病毒性肝炎中一氧化氮合酶调节的分子生物学机制
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作者 郭风劲 成军 宋方洲 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期38-41,共4页
研究发现一氧化氮(NO)参与肝细胞的多项生理功能的调节,参与各种肝病的病理过程。一氧化氮具有潜在的抗病毒活性,一氧化氮合酶(NOs)作为产生一氧化氮的限速酶,不但参与一氧化氮的生成,还与一氧化氮的各种生理功能密切相关。了解与阐明... 研究发现一氧化氮(NO)参与肝细胞的多项生理功能的调节,参与各种肝病的病理过程。一氧化氮具有潜在的抗病毒活性,一氧化氮合酶(NOs)作为产生一氧化氮的限速酶,不但参与一氧化氮的生成,还与一氧化氮的各种生理功能密切相关。了解与阐明肝细胞中一氧化氮合酶的分子生物学作用调节机制。 展开更多
关键词 一氧化氮 一氧化氮合酶 病毒性肝炎
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RNA Structural Homology Search with a Succinct Stochastic Grammar Model
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作者 宋英磊 赵继贞 +3 位作者 刘春梅 刘戡 RussellMalmberg 蔡黎明 《Journal of Computer Science & Technology》 SCIE EI CSCD 2005年第4期454-464,共11页
An increasing number of structural homology search tools, mostly based on profile stochastic context-free grammars (SCFGs) have been recently developed for the non-coding RNA gene identification. SCFGs can include sta... An increasing number of structural homology search tools, mostly based on profile stochastic context-free grammars (SCFGs) have been recently developed for the non-coding RNA gene identification. SCFGs can include statistical biases that often occur in RNA sequences, necessary to profile specific RNA structures for structural homology search. In this paper, a succinct stochastic grammar model is introduced for RNA that has competitive search effectiveness. More importantly, the profiling model can be easily extended to include pseudoknots, structures that are beyond the capability of profile SCFGs. In addition, the model allows heuristics to be exploited, resulting in a significant speed-up for the CYK algorithm-based search. 展开更多
关键词 RNA 核糖核酸 SCFGs 结构
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