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人胚肺成纤维细胞复制性衰老的基因表达变化 被引量：1
1
作者 李国栋 马宏 +1 位作者 童坦君 张宗玉 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期3216-3220,共5页
目的检测人胚肺成纤维细胞(2BS细胞)复制性衰老过程中的基因表达变化,并试图寻找细胞衰老的标志性基因。方法利用cDNA芯片对比检测28代龄和64代龄的2BS细胞基因表达谱,通过RT-PCR对挑选的9个差异基因在7个不同代龄2BS细胞中的表达进行... 目的检测人胚肺成纤维细胞(2BS细胞)复制性衰老过程中的基因表达变化,并试图寻找细胞衰老的标志性基因。方法利用cDNA芯片对比检测28代龄和64代龄的2BS细胞基因表达谱,通过RT-PCR对挑选的9个差异基因在7个不同代龄2BS细胞中的表达进行验证分析。结果和年轻细胞相比,衰老2BS细胞有117种基因的变化幅度在2倍以上,46种基因在2.5倍以上;细胞衰老过程中下调的基因主要是细胞周期相关基因,上调基因主要参与细胞应激反应和蛋白分泌等过程;9个差异基因的RT-PCR验证结果与芯片结果基本一致。结论基因芯片是研究细胞衰老基因表达和调控网络的重要工具,可用于衰老特征性基因的筛选。 展开更多
关键词 细胞衰老 基因芯片 基因表达
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MicroRNA-21对p53基因的转录后调控作用 被引量：1
2
作者 姜彬 唐颢 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期5653-5655,共3页
目的研究microRNA-21与p53的关系,验证microRNA-21对p53是否具有转录后调节作用。方法成功构建MicroRNA-21过表达载体,转染肿瘤细胞使其在细胞中表达,用RT-PCR和Western印迹检测Micro-RNA21过表达与Micro-21knockdown在转录水平上表达... 目的研究microRNA-21与p53的关系,验证microRNA-21对p53是否具有转录后调节作用。方法成功构建MicroRNA-21过表达载体,转染肿瘤细胞使其在细胞中表达,用RT-PCR和Western印迹检测Micro-RNA21过表达与Micro-21knockdown在转录水平上表达量的差异及p53基因在Micro-RNA21过表达的细胞中的表达情况。结果实验结果显示,过表达Micro-RNA21的细胞与转染空载体的细胞相比,其MicroRNA21的表达量显著提高;Micro-RNA21过表达之后,其P53的表达量显著减少。而microRNA-21knockdown之后,可见P53的蛋白水平明显升高。结论 microRNA-21与p53有着密切的联系,microRNA-21对p53具有一定的转录后抑制作用。 展开更多
关键词 细胞衰老 肿瘤 非编码微小RNA P53基因
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不同鼠龄小鼠脾细胞对过氧化氢诱导DNA损伤的修复能力 被引量：1
3
作者 李国栋 阎雪冬 +1 位作者 童坦君 张宗玉 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期599-601,共3页
目的观察青年鼠和老年鼠脾细胞对过氧化氢(H2O2)诱导DNA损伤的修复能力的差异。方法通过S1核酸酶消化实验,对比分析两组小鼠脾细胞在H2O2刺激前后单链DNA的比例及修复程度。通过非程序性DNA合成(UDS)实验观察脾细胞在H2O2刺激后的切除... 目的观察青年鼠和老年鼠脾细胞对过氧化氢(H2O2)诱导DNA损伤的修复能力的差异。方法通过S1核酸酶消化实验,对比分析两组小鼠脾细胞在H2O2刺激前后单链DNA的比例及修复程度。通过非程序性DNA合成(UDS)实验观察脾细胞在H2O2刺激后的切除修复水平。结果两组小鼠脾细胞的单链DNA含量与处理前相比均有明显提高,但修复后,青年鼠单链DNA含量的下降比例(13.4%)显著大于老年鼠(6.8%)(P<0.05)。UDS实验表明,两组小鼠均在DNA损伤大约12 h后达到修复高峰,但老年鼠的绝对修复水平大约只有青年鼠的1/3(P<0.01)。结论青年鼠和老年鼠脾细胞对H2O2刺激具有类似的敏感性,但DNA的修复能力随小鼠的增龄显著降低。H2O2通过加速DNA损伤的积累从而促进细胞衰老。 展开更多
关键词 过氧化氢 脾细胞 DNA修复
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