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题名慢病毒介导沉默PD-L1基因在乳腺癌细胞中的表达
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作者
欧阳婧
孙园园
唐泽民
唐政山
李放军
杨寅柯
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机构
湖南大学生物学院
湖南省人民医院社会医学部
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期259-266,共8页
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基金
湖南大学"985工程"专项资金资助项目(531109020011)
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文摘
构建含细胞程序性死亡因子配体1(PD-L1)基因的慢病毒载体三质粒体系,并检测其在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达情况。p MAGic 7.1慢病毒表达载体与质粒△8.91和p VSVG用聚乙烯亚胺(PEI)共转293T包装病毒,感染并筛选获得MDA-MB-231稳转细胞系,检测PD-L1表达情况。(1)MDA-MB-231在3种乳腺癌细胞中PD-L1表达量最高;(2)三质粒转染293T细胞48 h后荧光强度增强,达到90%以上;用病毒感染MDA-MB-231细胞,48 h获得20%左右荧光强度;(3)经筛选的MDA-MB-231稳转细胞系在m RNA水平和蛋白水平低表达PD-L1,其中由p MAGic-sh1包装的病毒干扰能力最强;(4)分别加入病毒后,干扰组细胞增殖能力下降,p MAGic-sh1干扰组细胞在加入病毒7 d后生长速度约为阴性对照的64.77%;(5)混合淋巴实验显示,sh-1干扰组的肿瘤抑制率为35.8%,是正常组的3.06倍,且干扰组的T淋巴细胞活性显著增强。成功通过PEI转染试剂建立了三质粒慢病毒包装体系,该体系获得的慢病毒可有效干扰乳腺癌MDA-MB-231细胞中PD-L1的表达量,所得的干扰细胞株细胞增殖能力下降,可增强T细胞增殖活性及肿瘤细胞杀伤活性。
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关键词
乳腺癌
细胞程序性死亡因子配体1基因
慢病毒载体
聚乙烯亚胺
共转染
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Keywords
breast cancer
programmed death factor ligant 1 gene
lentiviral vector
PEI
co-transfected
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分类号
R737.9
[医药卫生—肿瘤]
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