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RNAi结肠癌HOXB7基因表达对癌细胞增殖及凋亡的机制研究 被引量：9
1
作者 朱克祥 袁得峰 +2 位作者 张正聪 吕鹏飞 白小平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期371-375,共5页
目的:探讨抑制HOXB7基因表达对结肠癌细胞增殖凋亡的影响。方法:通过LipofectamineTM2000脂质体介导法将合成的阴性对照siRNA(阴性对照组)及HOXB7-siRNA(HOXB7转染组)转染人结肠癌SW480细胞,未经特殊处理的细胞为空白组。收集转染48 h... 目的:探讨抑制HOXB7基因表达对结肠癌细胞增殖凋亡的影响。方法:通过LipofectamineTM2000脂质体介导法将合成的阴性对照siRNA(阴性对照组)及HOXB7-siRNA(HOXB7转染组)转染人结肠癌SW480细胞,未经特殊处理的细胞为空白组。收集转染48 h的细胞,RT-PCR及Western blot分别检测细胞中HOXB7的mRNA及蛋白表达;分别于转染后的24、48、72、96 h,CCK8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测转染后48 h细胞的凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及Notch1信号通路Notch1、Hes1的蛋白表达。结果:HOXB7转染组HOXB7的mRNA及蛋白表达均显著低于空白组(P<0.05);转染24 h后三组细胞的OD值间差异无统计学意义(P>0.05),48、72、96 h后,与空白组比较,HOXB7转染组OD值均显著降低(P<0.05);与空白组比较,HOXB7转染组细胞凋亡率显著升高,Bcl-2、Notch1、Hes1蛋白显著下调表达,Bax蛋白显著上调表达(P<0.05)。结论:RNAi结肠癌HOXB7基因表达可通过抑制Notch1信号通路降低癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 RNAI 结肠癌 HOXB7基因 Notch1信号通路
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结肠癌细胞裂解物致敏的树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞抗自体结肠癌细胞效应研究 被引量：4
2
作者 朱克祥 王锦明 +5 位作者 袁得峰 张正聪 吕鹏飞 白小平 李汛 潘藤 《临床军医杂志》 CAS 2018年第8期878-881,共4页
目的探讨负载结肠癌细胞裂解产物的树突状细胞(DC)-细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对自体结肠癌细胞的体外杀伤作用。方法选取结肠癌患者切除的肿瘤组织反复冻融,制备结肠癌细胞裂解产物,将结肠癌细胞裂解产物与自体DC共培养。将负载自体... 目的探讨负载结肠癌细胞裂解产物的树突状细胞(DC)-细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对自体结肠癌细胞的体外杀伤作用。方法选取结肠癌患者切除的肿瘤组织反复冻融,制备结肠癌细胞裂解产物,将结肠癌细胞裂解产物与自体DC共培养。将负载自体结肠癌细胞裂解产物致敏的DC与CIK共培养,形成抗原(Ag)-DC-CIK细胞,检测Ag-DC-CIK细胞的免疫活性以及对自体结肠癌细胞的杀伤效应。结果 Ag-DC-CIK组和DC-CIK组CD3+、CD56+双阳性细胞比例分别为(31.0%±4.1%)和(29.0%±3.4%),显著高于CIK组的(19.0%±2.5%),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在同等效靶比条件下,Ag-DC-CIK组对自体肿瘤细胞的杀伤能力强于DC-CIK组和CIK组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ag-DC-CIK细胞对自体结肠癌细胞的杀伤效应显著强于DC-CIK和CIK细胞。 展开更多
关键词 结肠癌 树突状细胞 细胞因子 杀伤细胞 细胞免疫治疗
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lincRNA-p21通过STAT3信号抑制结直肠癌HCT116细胞增殖 被引量：2
3
作者 朱克祥 张正聪 +2 位作者 袁得峰 吕鹏飞 白小平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期797-803,共7页
目的:研究基因间区长链非编码RNA-p21(lincRNA-p21)通过STAT3信号通路对结直肠癌HCT116细胞生长抑制的影响。方法:通过细胞转染法构建lincRNA-p21过表达的人结直肠癌细胞株HCT116,转染空载体pcDNA3.1作为阴性对照组。转染后采用RT-qPCR... 目的:研究基因间区长链非编码RNA-p21(lincRNA-p21)通过STAT3信号通路对结直肠癌HCT116细胞生长抑制的影响。方法:通过细胞转染法构建lincRNA-p21过表达的人结直肠癌细胞株HCT116,转染空载体pcDNA3.1作为阴性对照组。转染后采用RT-qPCR法检测细胞中lincRNA-p21的水平,分别采用MTT法和平板集落形成实验检测细胞的活力和增殖情况,采用Western blot法测定细胞中STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白水平。用STAT3信号通路激活剂SD19处理lincRNA-p21过表达的HCT116细胞,Western blot检测STAT3和p-STAT3的蛋白水平,MTT法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:与control组和pcDNA组相比,pcDNA-lincRNA-p21组细胞中lincRNA-p21的表达明显上调,细胞生长受到抑制,STAT3和p-STAT3的蛋白水平降低(P<0.05)。STAT3激活剂SD19处理过表达lincRNA-p21的HCT116细胞后,与pcDNA-lincRNA-p21组相比,pcDNA-lincRNA-p21+SD19组细胞中STAT3和p-STAT3的蛋白水平升高,细胞活力升高,细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论:lincRNA-p21过表达可以抑制结直肠癌HCT116细胞的生长;激活STAT3信号通路可促进HCT116细胞的生长;lincRNA-p21可通过抑制STAT3信号激活而抑制HCT116细胞的增殖。 展开更多
关键词 基因间区长链非编码RNA-p21 结直肠癌 STAT3信号通路 细胞增殖 细胞凋亡
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DC-CIK治疗对晚期肝细胞癌患者免疫功能及循环肿瘤细胞的影响 被引量：2
4
作者 李月月 张立婷 +3 位作者 张璨 朱克祥 李俊峰 陈青锋 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第6期1066-1069,1116,共5页
目的:研究DC-CIK细胞治疗对晚期肝细胞癌患者甲胎蛋白、免疫功能及循环肿瘤细胞数的影响。方法:选取2013年至2015年我院收治的26例肝细胞癌并伴有复发或转移的患者,对其治疗前后甲胎蛋白、免疫功能及循环肿瘤细胞数的数据进行分析,比较D... 目的:研究DC-CIK细胞治疗对晚期肝细胞癌患者甲胎蛋白、免疫功能及循环肿瘤细胞数的影响。方法:选取2013年至2015年我院收治的26例肝细胞癌并伴有复发或转移的患者,对其治疗前后甲胎蛋白、免疫功能及循环肿瘤细胞数的数据进行分析,比较DC-CIK细胞治疗前后甲胎蛋白、循环肿瘤细胞、免疫功能的变化。根据细胞治疗次数分为1次组及>1次组,比较两组免疫功能的变化。结果:DC-CIK细胞治疗前甲胎蛋白为(603.32±155.78)ng/mL细胞回输后为(571.24±147.49)ng/mL差异无统计学意义(P>0.05)。DC-CIK细胞治疗前及细胞回输后CTC检测阳性率分别为81.8%、36.4%治疗前及回输后循环肿瘤细胞数量分别为(8.36±10.642)、(1.55±2.464),细胞治疗前后比较差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞治疗前1天T细胞亚群CD3+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD4/CD8分别为(66.05±15.31)%、(41.89±12.33)%、(23.15±8.05)%、(2.10±0.77),回输后分别为(69.69±12.91)%、(44.80±11.11)%、(23.13±7.12)%、(2.29±0.91)治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞治疗次数1次组和>1次组免疫功能变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DC-CIK细胞治疗可减少肝细胞癌伴复发或转移患者循环肿瘤细胞的数量,但对甲胎蛋白和免疫功能无明显影响。 展开更多
关键词 DC-CIK细胞治疗 肝细胞癌 甲胎蛋白 循环肿瘤细胞 T细胞亚群
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