新型超临界流体色谱仪在糖类分离分析中的应用研究 被引量：5

1

作者 齐建平 陈海 +2 位作者 张大兵 李枝玲 尤慧艳 《分析仪器》 CAS 2018年第3期112-114,共3页

采用自行研发的超临界流体色谱仪成功分离了木糖、葡萄糖、蔗糖,考察了固定相种类、有机改性剂种类、系统背压、改性剂流速、改性剂比例对分离的影响,结果表明:在考察的5种代表性固定相中,样品在硅胶固定相上有较好的分离。有机改性剂... 采用自行研发的超临界流体色谱仪成功分离了木糖、葡萄糖、蔗糖,考察了固定相种类、有机改性剂种类、系统背压、改性剂流速、改性剂比例对分离的影响,结果表明:在考察的5种代表性固定相中,样品在硅胶固定相上有较好的分离。有机改性剂种类及浓度对分离均有影响,在5种常用改性剂中,甲醇为改性剂分离效果最好,且改性剂浓度越大,洗脱能力越强,分离度越小。同时流速越大,保留时间越短。 展开更多

关键词 超临界流体色谱 糖 优化 分离

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精准扶贫背景下农产品种植流通体系DEA绩效评价——以广东省英德市鱼咀村为例 被引量：5

2

作者 张大斌 许翔宇 +1 位作者 凌立文 李倩 《广东农业科学》 CAS 2019年第4期146-155,共10页

【目的】减贫和消贫是世界各国共同面临的难题,自习近平总书记提出精准扶贫的战略思想后,如何科学评价精准扶贫项目的实施成效,提高评估的科学性与公信力成为新的研究热点。【方法】以广东省英德市鱼咀村在精准扶贫政策背景下构建的&qu... 【目的】减贫和消贫是世界各国共同面临的难题,自习近平总书记提出精准扶贫的战略思想后,如何科学评价精准扶贫项目的实施成效,提高评估的科学性与公信力成为新的研究热点。【方法】以广东省英德市鱼咀村在精准扶贫政策背景下构建的"五位一体"农产品种植流通体系为研究对象,运用数据包络分析(DEA)模型,对流通体系中12种农产品进行投入产出效率分析,并基于投影分析的结果优化非DEA有效的决策单元。【结果】(1)土地规模成本是资源总成本中的重要组成部分,占比高达63.7%;(2)除番薯外,其余农产品均未达到DEA有效的产出效率;(3)对未达到有效产出效率的农产品进行投影分析,发现土地投入可减少约10%、资金投入可减少5%～15%,应简化销售模式和节约包装加工成本。【结论】"五位一体"精准扶贫体系通过有效整合各种资源,为如期完成精准扶贫任务奠定坚实基础。投影分析结果为优化农产品资源投入提供切实可行的方案,如何进一步提高扶贫资源的产出效率,将成为下一阶段精准扶贫工作的思考重点。 展开更多

关键词 农产品流通 数据包络分析 投影分析 绩效评价 精准扶贫

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Stellite6/WC复合涂层微观组织和性能研究 被引量：4

3

作者 张田力 张大兵 +1 位作者 阳建君 彭英彪 《机械强度》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1081-1087,共7页

采用激光熔覆技术在Q960钢板表面熔覆Stelllite6耐腐蚀涂层,为提高涂层的耐磨性能,分别向涂层中加入质量分数为15%、20%、30%、35%和40%的WC粉末。并采用金相显微镜、XRD、显微维氏硬度计和电化学工作站对复合涂层的微观组织形貌、物相... 采用激光熔覆技术在Q960钢板表面熔覆Stelllite6耐腐蚀涂层,为提高涂层的耐磨性能,分别向涂层中加入质量分数为15%、20%、30%、35%和40%的WC粉末。并采用金相显微镜、XRD、显微维氏硬度计和电化学工作站对复合涂层的微观组织形貌、物相、显微硬度和电化学性能进行测试分析。研究结果表明:随WC含量增加,复合涂层生成钴碳复杂相,并出现少量气孔和裂纹,涂层耐磨性能明显提高,与之相反,复合涂层的耐腐蚀性能不断恶化。综合分析涂层的耐磨和耐腐蚀性能,加入30%WC的涂层综合性能最佳。 展开更多

关键词 激光熔覆 Stellite6/WC 耐磨性能 耐腐蚀性能

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云南大红山铜矿Ⅰ号矿带金赋存规律研究 被引量：3

4

作者 张达兵 查寿才 +2 位作者 张武鹏 蒙六清 张永彬 《矿产与地质》 2019年第5期851-860,共10页

大红山铜矿自发现至今,前人对本区开展了大量研究,地质成果丰硕,但对于金的赋存特征、分布规律等总体研究程度较低。通过扫描电镜、电子探针测试研究,表明大红山铜矿I号矿带中既有以独立金矿物形式赋存的金,也有呈亚显微状态或胶体状态... 大红山铜矿自发现至今,前人对本区开展了大量研究,地质成果丰硕,但对于金的赋存特征、分布规律等总体研究程度较低。通过扫描电镜、电子探针测试研究,表明大红山铜矿I号矿带中既有以独立金矿物形式赋存的金,也有呈亚显微状态或胶体状态的金。微量元素及统计分析表明金的富集与铜、铁及亲铁元素间关系密切,表现为铜、铁品位高的地段,金品位也相对较高;同时,亲铁元素相对富集的矿段,金的浓度克拉克值相对较高。 展开更多

关键词 大红山铜矿 金的赋存状态 富集特征 扫描电镜 电子探针 云南

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活塞杆表面激光熔覆硬度和残余应力的数值模拟

5

作者 张大兵 梁鹏 +1 位作者 童昶 刘浩 《应用激光》 CSCD 北大核心 2023年第8期39-47,共9页

针对20钢表面采用激光熔覆M2粉末后涂层难以同时获得低残余应力和高硬度的问题,通过建立活塞杆和涂层有限元模型,设定活塞杆不同的预热温度,仿真分析得到不同预热温度下残余应力和硬度的变化规律。结果表明,工件残余应力和硬度与激光熔... 针对20钢表面采用激光熔覆M2粉末后涂层难以同时获得低残余应力和高硬度的问题,通过建立活塞杆和涂层有限元模型,设定活塞杆不同的预热温度,仿真分析得到不同预热温度下残余应力和硬度的变化规律。结果表明,工件残余应力和硬度与激光熔覆后工件冷却速度有很大的关系,预热辅助可以降低工件冷却速度、减小残余应力,但是同时对涂层硬度有明显影响。激光熔覆前设置活塞杆不同的预热温度并随室温冷却,活塞杆径向和轴向残余应力随着预热温度的升高出现下降趋势。与未预热工况比较,当预热300~475℃时,涂层硬度基本没有变化,熔合区和热影响区硬度减小;当预热500℃时,涂层、熔合区及热影响区硬度都开始明显减小。在相同的室温(20℃)条件下,活塞杆预热至475℃后进行激光熔覆与未预热的工况相比,径向最大残余应力下降了39.8%,轴向最大残余应力下降了42.1%,涂层硬度基本无变化。结论,预热活塞杆温度至475℃后开始激光熔覆有利于降低涂层残余应力,同时可以获得较好的涂层硬度。 展开更多

关键词 激光熔覆 活塞杆涂层 残余应力 硬度 预热

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虎跳峡金沙江大桥隧道式锚碇模型试验研究与承载机理 被引量：4

6

作者 祁雪梅 张大兵 陶路 《施工技术》 CAS 2018年第13期127-131,147,共6页

介绍了香丽高速虎跳峡金沙江大桥香格里拉岸隧道式锚碇1∶10缩尺模型试验过程。试验表明,在主缆拉力作用下,锚碇系统的变形以锚塞体携裹着围岩一起沿拉力方向移动,混凝土与围岩之间无相对滑动,后部1/3长度范围的围岩分担了不少于60%的... 介绍了香丽高速虎跳峡金沙江大桥香格里拉岸隧道式锚碇1∶10缩尺模型试验过程。试验表明,在主缆拉力作用下,锚碇系统的变形以锚塞体携裹着围岩一起沿拉力方向移动,混凝土与围岩之间无相对滑动,后部1/3长度范围的围岩分担了不少于60%的主缆拉力,中隔墩岩体变形较大,锚碇总的变形和承载能力满足规范要求。 展开更多

关键词 桥梁工程 悬索桥 隧道式锚碇 试验 承载机理 扩散角

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水稻NRL基因家族的全基因组鉴定与生物信息学分析 被引量：3

7

作者 胡阳阳 孙琳琳 +2 位作者 王多祥 张大兵 蔡文国 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第21期6961-6971,共11页

NRL (NPH3/RPT2-Like)基因家族是植物中特异存在的基因家族,根据拟南芥NRL基因家族中参与植物向光性响应的NPH3 (NONPHOTOTROPIC HYPOCOTYL 3)和RPT2 (ROOT PHOTOTROPISM 2)命名。本研究利用生物信息学方法鉴定到27个水稻NRL基因,分布在... NRL (NPH3/RPT2-Like)基因家族是植物中特异存在的基因家族,根据拟南芥NRL基因家族中参与植物向光性响应的NPH3 (NONPHOTOTROPIC HYPOCOTYL 3)和RPT2 (ROOT PHOTOTROPISM 2)命名。本研究利用生物信息学方法鉴定到27个水稻NRL基因,分布在除10号染色体外的染色体上,同时基因复制分析结果表明,全基因复制或片段复制比串联复制在水稻NRL基因家族扩张中起更大的作用。利用单、双子叶植物的7个物种进行系统进化关系分析,将192个NRL基因家族成员分为6个不同的组。水稻NRL家族的结构特征分析显示,多数成员含有NRL基因家族的特征结构域,而基于RNA-Seq和微阵列数据的表达分析结果表明,水稻NRL家族基因在多个组织表达,同时部分基因在叶片、花序和花药中高表达。本研究对水稻NRL基因家族进行鉴定和分析,为进一步研究水稻NRL基因家族的功能提供了一定的参考和依据。 展开更多

关键词 水稻 NRL 基因家族 生物信息学

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酮类物质合成酶OsPKS1和Os PKS2对水稻花粉外壁形成的作用 被引量：2

8

作者 周雨露 林泓 +2 位作者 张大兵 王灿华 余婧 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1295-1307,共13页

【背景】植物花粉外围包裹的花粉外壁作为植物雄性配子的天然保护屏障对植物的生殖发育起到非常重要的作用。植物花粉外壁的主要成分是孢粉素,主要由脂类物质和酚类物质构成。因此,脂类物质和酚类物质的代谢是植物花药内外壁形成和花粉... 【背景】植物花粉外围包裹的花粉外壁作为植物雄性配子的天然保护屏障对植物的生殖发育起到非常重要的作用。植物花粉外壁的主要成分是孢粉素,主要由脂类物质和酚类物质构成。因此,脂类物质和酚类物质的代谢是植物花药内外壁形成和花粉外壁形成的关键步骤。在其合成过程中,PKS1/PKSA/LAP6和PKS2/PKSB/LAP5在不同物种间发挥保守的生化功能。【目的】通过研究水稻OsPKS1和OsPKS2在花药内外壁和花粉外壁发育过程中的作用,为水稻花药内外壁和花粉外壁合成机理提供新认识。【方法】水稻花药发育基因共表达网络AntherNet预测到一个可能参与孢粉素合成的基因OsPKS1,利用CRISPR/Cas9技术在野生型9522背景和突变体ospks2背景下敲除OsPKS1获得ospks1单突变体和ospks1 ospks2双突变体。在同一生长条件下比较野生型和突变体植株表型,分析突变体植株的营养生长和花器官发育情况。通过I2-KI染色分析ospks1和ospks1 ospks2的花粉活力。通过半薄切片观察野生型和突变体各个时期花药四层细胞发育及小孢子发育,利用扫描电子显微镜观察野生型和突变体花药外壁、花药内壁和花粉外壁表面的精细结构,利用透射电子显微镜观察野生型和突变体花药壁细胞、花粉外壁和乌氏体的精细结构。【结果】获得4个ospks1单突变体和4个ospks1 ospks2双突变体,其中,ospks1-3是纯合的单突变体,ospks1-4 ospks2是纯合的双突变体。ospks1-3和ospks1-4 ospks2均呈现雄性不育的表型。ospks1-3与ospks2的花粉外壁和乌氏体结构均不正常,但两者结构不同。ospks1-3花药表面可形成凸起的外壁结构;绒毡层可正常降解。花粉外壁内部形成大量微小的空洞,柱状体变短,无法有效连接覆盖层和花粉外壁内层;乌氏体的底部结构减小,顶部结构增多,并且较野生型更为尖锐。ospks1-4 ospks2花药外壁角质层减少;绒毡层无法正常降解 展开更多

关键词 水稻 OsPKS1 OsPKS2 孢粉素 花粉外壁 雄性不育

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基于模糊神经网络PID在线配液控制系统设计 被引量：1

9

作者 刘根水 张大兵 沈健增 《自动化应用》 2022年第11期97-100,共4页

针对在线配液系统具有多变量、非线性和运行机理复杂等特点,提出一种模糊神经网络PID在线配液系统控制方案,该方案利用模糊神经网络的模糊推理能力和自学习能力,实现对PID控制参数的实时在线整定,并通过采用粒子群优化算法和改进BP算法... 针对在线配液系统具有多变量、非线性和运行机理复杂等特点,提出一种模糊神经网络PID在线配液系统控制方案,该方案利用模糊神经网络的模糊推理能力和自学习能力,实现对PID控制参数的实时在线整定,并通过采用粒子群优化算法和改进BP算法相结合的学习方法提高网络的学习效率,实现对在线配液系统的控制。并将本方案应用于Bio-Con600在线配液系统上进行了配液实验,实验结果表明系统的控制精度完全符合技术指标要求,证明了方案的有效性和可行性。 展开更多

关键词 模糊神经网络 PID 神经网络 在线配液系统

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euAP2类转录因子在水稻花器官发育中功能的初步研究 被引量：2

10

作者 范均怡 陈晓菲 +3 位作者 林参 沈舟远 张大兵 袁政 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期939-948,共10页

euAP2类转录因子作为一类特殊的AP2/ERF转录因子家族成员,在调节植物开花时间、分生组织活性维持与转化以及花器官属性建成等发育过程中具有重要作用。水稻基因组中共有5个euAP2同源基因,部分成员已被报道参与调控穗分枝、花器官发育、... euAP2类转录因子作为一类特殊的AP2/ERF转录因子家族成员,在调节植物开花时间、分生组织活性维持与转化以及花器官属性建成等发育过程中具有重要作用。水稻基因组中共有5个euAP2同源基因,部分成员已被报道参与调控穗分枝、花器官发育、离层发育以及淀粉合成等过程,但是这些euAP2基因在水稻花器官发育调控中功能的协同与分化尚不明确。通过启动子顺式作用元件分析、突变体表型观察以及基因表达模式分析,本研究初步探讨了水稻5个euAP2类转录因子在花器官发育中的作用。结果表明,水稻euAP2家族成员的表达具有特异性,转录水平会因其他成员的缺失而发生改变;euAP2家族突变体的花器官表型不尽相同,仅有OsAP2-3/SNB和OsAP2-5/SHAT1的CRISPR敲除突变体显现明显的花器官异常发育表型,暗示这些基因在调节水稻花器官发育中具有不同的功能。 展开更多

关键词 水稻 euAP2类转录因子 花器官 功能分化

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OsAP2-4调控水稻分蘖功能的初步研究 被引量：1

11

作者 刘宜林 范均怡 +3 位作者 陈晓菲 徐淑月 张大兵 袁政 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期817-824,共8页

分蘖数是影响水稻(Oryza sativa)株型和产量形成的重要经济性状,受环境、营养、植物激素和遗传因子共同调控。本研究发现水稻euAP2类转录因子OsAP2-4参与调控腋芽分化和侧枝伸长。表达模式分析显示,OsAP2-4在腋芽高表达。通过CRISPR-Cas... 分蘖数是影响水稻(Oryza sativa)株型和产量形成的重要经济性状,受环境、营养、植物激素和遗传因子共同调控。本研究发现水稻euAP2类转录因子OsAP2-4参与调控腋芽分化和侧枝伸长。表达模式分析显示,OsAP2-4在腋芽高表达。通过CRISPR-Cas9基因定向编辑技术,获得了功能缺失等位突变体Osap2-4-1和Osap2-4-2;形态学和组织学观察表明,Osap2-4突变体分蘖数在苗期和成熟期均显著高于野生型‘武运粳7号’,腋芽数量也显著增加。RT-qPCR分析显示,分蘖调控相关基因OsMADS57表达水平显著下调,而D3的表达水平极显著下调。因此,OsAP2-4可能通过调控独脚金内酯信号通路参与调控水稻分蘖和株型建成,丰富了OsAP2-4调控水稻分蘖的分子作用网络。 展开更多

关键词 水稻 分蘖 OsAP2-4 D3 独脚金内酯

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云南省普洱市金矿床成因类型 被引量：1

12

作者 张达兵 查寿才 +3 位作者 李勤美 刘建平 张武鹏 陈明贵 《矿产与地质》 2020年第6期1051-1061,1068,共12页

云南三江成矿带澜沧江南段以前发现的矿床均为铜矿床,普洱市思茅区金矿床是近年来在此带内发现的独立金矿床。矿体呈透镜状产于大凹子组烟灰色的强硅化蚀变带内。金的主要赋存形式为碲化物,其次有少量自然金。稀土元素特征显示矿床成矿... 云南三江成矿带澜沧江南段以前发现的矿床均为铜矿床,普洱市思茅区金矿床是近年来在此带内发现的独立金矿床。矿体呈透镜状产于大凹子组烟灰色的强硅化蚀变带内。金的主要赋存形式为碲化物,其次有少量自然金。稀土元素特征显示矿床成矿流体总体为还原性质。石英流体包裹体均一温度的平均值为330℃,方解石流体包裹体均一温度平均为180℃。通过闪锌矿的Fe/Zn比值估算矿物沉淀温度为230℃,表明金矿的成矿温度可能为在180℃~330℃之间。硫同位素显示硫源相对较为单一,以深源岩浆硫为主,与金有关的黄铁矿为火山成因。经与典型碲化物型金矿对比,表明矿床为低温热液碲化物型金矿床。 展开更多

关键词 金矿床 碲化物 稀土元素 包裹体 硫同位素 云南

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基于神经网络逆系统的超临界流体色谱系统控制

13

作者 刘根水 沈健增 张大兵 《自动化应用》 2022年第3期4-6,共3页

针对超临界流体色谱系统具有多变量、非线性、强耦合的特点,提出一种基于神经网络逆系统的超临界流体色谱系统控制方案。通过RBF神经网络在线逆辨识建立了超临界流体色谱系统的神经网络逆系统模型,并将辨识得到的逆模型作为控制器模型... 针对超临界流体色谱系统具有多变量、非线性、强耦合的特点,提出一种基于神经网络逆系统的超临界流体色谱系统控制方案。通过RBF神经网络在线逆辨识建立了超临界流体色谱系统的神经网络逆系统模型,并将辨识得到的逆模型作为控制器模型与超临界流体色谱系统进行串联,构成一个伪线性复合系统。并将本方案应用于SFC-SEP600超临界流体色谱系统上进行了梯度洗脱流量控制实验,实验结果表明该模型梯度流量控制精度完全符合技术指标要求,实验结果验证了方案的有效性和可行性。 展开更多

关键词 神经网络 逆系统 超临界流体色谱 解耦

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北京燃气的企业信息标准化建设之路

14

作者 金洁羽 张大兵 《城市燃气》 2019年第1期4-7,共4页

信息化的本质是标准化问题,本文介绍了近年来北京燃气在企业信息标准化建设方面,通过参加的《城镇燃气工程智能化技术规范》、《城镇燃气自动化技术规范》、《城镇燃气设备材料分类与编码》等几部行业标准及中国城市燃气协会标准、本企... 信息化的本质是标准化问题,本文介绍了近年来北京燃气在企业信息标准化建设方面,通过参加的《城镇燃气工程智能化技术规范》、《城镇燃气自动化技术规范》、《城镇燃气设备材料分类与编码》等几部行业标准及中国城市燃气协会标准、本企业信息化标准的编制进展,总结了企业信息标准化工作的体会及后续推进措施。 展开更多

关键词 北京燃气 信息标准化 行业标准 协会标准 企业标准

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杂化硅基手性色谱填料的制备及表征

15

作者 韩海峰 范大双 +2 位作者 王涛 张大兵 尤慧艳 《分析仪器》 CAS 2019年第4期37-43,共7页

以1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷(BTEE)和3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTS)为原料,采用溶胶-凝胶法一步共聚制备杂化硅基填料,并通过水热法进一步扩孔。通过SEM、BET、IR、ICP以及MCT等仪器对合成的填料进行物理表征。在合成的氨基杂化介孔填料... 以1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷(BTEE)和3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTS)为原料,采用溶胶-凝胶法一步共聚制备杂化硅基填料,并通过水热法进一步扩孔。通过SEM、BET、IR、ICP以及MCT等仪器对合成的填料进行物理表征。在合成的氨基杂化介孔填料上进行手性涂覆,研制出纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)修饰的杂化硅基手性色谱填料,对反式-二苯乙烯氧化物(TSO)、扁桃酸甲酯、黄烷酮、己唑醇等手性样品进行了分离,取得了良好的分离效果。 展开更多

关键词 杂化硅基填料 手性色谱填料 液相色谱

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利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻OsYUCCA1基因突变体 被引量：13

16

作者 何先畅 黄国强 +2 位作者 王道洋 常淑伟 张大兵 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期4778-4784,共7页

为研究植物激素生长素在模式作物水稻中的功能,我们利用CRISPR-Cas9基因编辑技术,设计水稻生长素合成基因Os YUCCA1的两个靶位点,构建Os YUCCA1基因的敲除载体。通过对Os YUCCA1基因序列分析,将合成的靶点序列插入含hsp Cas9n的载体中,... 为研究植物激素生长素在模式作物水稻中的功能,我们利用CRISPR-Cas9基因编辑技术,设计水稻生长素合成基因Os YUCCA1的两个靶位点,构建Os YUCCA1基因的敲除载体。通过对Os YUCCA1基因序列分析,将合成的靶点序列插入含hsp Cas9n的载体中,再与p CAMBIA1300重组,构建基因编辑载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻品种9522。从78棵转基因苗中鉴定得到针对Os YUCCA1的3种突变类型,包括26棵在外显子第260号碱基处插入碱基A或T两种类型纯合突变和22棵在外显子第447号碱基处插入A、444号碱基C被T替换、445号碱基G被C替换的杂合突变类型。通过分析,发现3种突变株系都存在移码现象而使氨基酸提前终止致使基因突变。本研究成功利用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除了水稻Os YUCCA1基因,为进一步研究Os YUCCA1基因功能提供了理论参考依据。 展开更多

关键词 水稻 OsYUCCA1 生长素 CRISPR/Cas9 基因编辑技术

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虎跳峡金沙江大桥钢桁梁施工技术 被引量：8

17

作者 李明欢 张大兵 《施工技术》 CAS 2021年第12期72-75,共4页

香丽高速公路虎跳峡金沙江大桥为当今世界跨度最大的独塔单跨地锚式钢桁梁悬索桥,主缆孔跨布置为766m+160m,钢桁梁全长671m,共59个梁段,标准梁段长11.5m,最大梁段重103t。针对桥位区域山势陡峭、场地狭小、施工组织及技术难度大等特点,... 香丽高速公路虎跳峡金沙江大桥为当今世界跨度最大的独塔单跨地锚式钢桁梁悬索桥,主缆孔跨布置为766m+160m,钢桁梁全长671m,共59个梁段,标准梁段长11.5m,最大梁段重103t。针对桥位区域山势陡峭、场地狭小、施工组织及技术难度大等特点,详细介绍了大桥钢桁梁现场拼装、运输、存放和缆索吊装等施工技术。 展开更多

关键词 悬索桥 钢桁梁 独塔单跨 拼装 运输 缆索吊装 施工技术

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利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻OsMADS56基因突变体 被引量：5

18

作者 杨柳 李晓峰 +1 位作者 祝万万 张大兵 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期3571-3578,共8页

OsMADS56是水稻中长日照下的开花抑制基因,与拟南芥中同时影响开花时间和花发育的SOC1同源。为了深入探究OsMADS56基因对水稻开花时间的调控功能,本研究利用反向遗传学的方法通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsMADS56基因设计了2个特异性... OsMADS56是水稻中长日照下的开花抑制基因,与拟南芥中同时影响开花时间和花发育的SOC1同源。为了深入探究OsMADS56基因对水稻开花时间的调控功能,本研究利用反向遗传学的方法通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsMADS56基因设计了2个特异性敲除靶位点,构建了OsMADS56基因敲除载体,并通过农杆菌介导的转化方法成功获得了野生型粳稻9522背景的转基因苗。鉴定结果显示9棵OsMADS56转基因苗中包含了3种纯合突变类型,包括第一个外显子第45号碱基处缺失了一个G碱基、缺失了包含了第一个起始密码子的100个碱基对以及在第5个外显子第322号碱基处插入一个A碱基。通过蛋白序列比对分析,发现这三种类型的突变均造成移码突变和蛋白翻译提前终止引起保守结构域的缺失。本研究获得的水稻OsMADS56基因的三个突变体株系对今后进一步深入研究该基因的功能具有重要意义。 展开更多

关键词 水稻(Oryza sativa L.) OsMADS56 MADS-BOX CRISPR/Cas9

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水稻中介导基因沉默相关microRNA的SNP分析 被引量：5

19

作者 黄飘飘 李俊彦 张大兵 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期1280-1292,共13页

miRNA是重要的调节因子，在植物的生长发育和抗逆等过程中扮演不可替代的角色。和miRNA介导的基因沉默相关的单核苷酸多态性（SNP）可能和植物生长发育和农艺性状密切相关。为进一步了解在miRNA和其靶基因上的进化压力以及SNP如何通过影... miRNA是重要的调节因子，在植物的生长发育和抗逆等过程中扮演不可替代的角色。和miRNA介导的基因沉默相关的单核苷酸多态性（SNP）可能和植物生长发育和农艺性状密切相关。为进一步了解在miRNA和其靶基因上的进化压力以及SNP如何通过影响miRNA和靶基因对的互补模式从而影响miRNA相关的性状，我们利用3000份水稻基因组数据分析了编码miRNA的基因进行全基因组SNP，发现pre—miRNA上SNP的密度比基因间隔区低平均4％，比外显子区域低平均8％。对比成熟的保守miRNA和非保守miRNA发现，两者各位点上SNP分布的趋势并不相同，暗示了两者各位点上的进化压力存在差异；通过比较成熟的保守miRNA和其相应的靶基因结合位点，则发现它们之间SNP分布有相关性，说明miRNA和相应靶基因结合位点存在共同进化。另外，我们找到了两个靶基因OsARF13和OsMADS27的miRNA结合位点上携带有两个可能对miRNA介导的调节产生重要影响的SNP。该项研究从全基因组水平揭示miRNA和靶基因存在SNP，可能加深甚我们对miRNA介导的基因沉默机理的理解。 展开更多

关键词 水稻 MIRNA 单核苷酸多态性 互补性 形状改变

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OsMADS34与OsMADS56蛋白互作及OsMADS56表达模式分析 被引量：3

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作者 李晓峰 张大兵 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1556-1561,共6页

MADS-box蛋白可以通过形成多聚体复合物发挥功能。Os MADS34作为一个多样功能的SEPALLATA（SEP）基因,其可以控制水稻花序及小穗的发育。为了了解Os MADS34在控制水稻花序及花发育的机理,我们利用水稻Os MADS34作诱饵蛋白,从构建的水稻... MADS-box蛋白可以通过形成多聚体复合物发挥功能。Os MADS34作为一个多样功能的SEPALLATA（SEP）基因,其可以控制水稻花序及小穗的发育。为了了解Os MADS34在控制水稻花序及花发育的机理,我们利用水稻Os MADS34作诱饵蛋白,从构建的水稻枝梗分生组织的c DNA文库中筛选可以互作的未知蛋白。利用酵母双杂交分析,筛选到了互作蛋白Os MADS56,并通过自激活验证及蛋白定位分析降低了假阳性及假阴性的因素影响。利用定量PCR对Os MADS56的表达模式进行分析,Os MADS56在水稻花序和小穗发育时期表达,Os MADS56可能是在蛋白水平上与Os MADS34相互作用共同调控水稻花序的发育。本工作为今后进一步研究Os MADS34及开花基因如何调控水稻花序和花发育提供了见解。 展开更多

关键词 酵母双杂交 OsMADS34 OsMADS56

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