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利用CRISPR-Cas9系统构建新型异戊酰螺旋霉素Ⅰ产生菌
被引量：
5
1
作者
张晓婷
张妍
+2 位作者
戴剑漉
王以光
赫卫清
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期472-481,共10页
异戊酰螺旋霉素(Isovalerylspiramycin,ISP)Ⅰ是必特螺旋霉素(Bitespiramycin,BT)的一种主组分,其抗菌活性与BT相似,而且作为单一组分在质控和剂型上更具优势,目前正在进行临床前研究。原有的 ISPⅠ工程菌株经过3次基因改造,已经具有2...
异戊酰螺旋霉素(Isovalerylspiramycin,ISP)Ⅰ是必特螺旋霉素(Bitespiramycin,BT)的一种主组分,其抗菌活性与BT相似,而且作为单一组分在质控和剂型上更具优势,目前正在进行临床前研究。原有的 ISPⅠ工程菌株经过3次基因改造,已经具有2种抗性基因,很难再进行遗传操作。前期研究利用经典同源重组的方法无法构建无抗性的ISPⅠ产生菌,文中利用CRISPR-Cas9基因编辑系统在螺旋霉素(Spiramycin,SP)产生菌中成功将3位酰基化酶的基因bsm4替换为组成型强启动子ermEp~*控制下的异戊酰基转移酶基因(Isovaleryltansferase gene,ist)。删除bsm4后突变株只能产生SPⅠ组分,外源基因ist的表达产物催化SPⅠ在其4″位进行异戊酰化修饰形成ISPⅠ。经过HPLC和质谱鉴定,阳性菌株ΔEI的发酵产物中只有ISPⅠ一种ISP组分,证实新的ISPⅠ工程菌株构建成功。ΔEI菌株不带有抗性基因,可重复利用CRISPR-Cas9系统进行基因操作来获得新的改良菌株。
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关键词
异戊酰螺旋霉素Ⅰ
酰基转移酶基因
CRISPR-Cas9系统
原文传递
比率成像纳米探针在内源性小分子成像中的应用
2
作者
殷晴晴
陈梅芳
+2 位作者
陈斌龙
王增辉
汪贻广
《中国科学：化学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1376-1384,共9页
内源性信号小分子在生命活动过程中起着重要的作用,其浓度的变化和分布的异常与多种生理病理状态相关.设计可实时检测其在体内动态变化的成像体系对疾病诊断、病因探讨及细胞信号转导机制的研究至关重要.传统的检测方式多采用单一通道成...
内源性信号小分子在生命活动过程中起着重要的作用,其浓度的变化和分布的异常与多种生理病理状态相关.设计可实时检测其在体内动态变化的成像体系对疾病诊断、病因探讨及细胞信号转导机制的研究至关重要.传统的检测方式多采用单一通道成像,干扰因素较多难以精确定量.近年来,比率成像纳米探针借助其独特的优势被广泛应用于生物医学领域.本文简要综述了响应于氢离子、活性氧/氮物种(ROS/RNS)和气体信号分子的比率成像纳米探针的设计原理及生物学应用.
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关键词
比率成像
纳米探针
PH敏感
ROS/RNS
气体信号分子
原文传递
题名
利用CRISPR-Cas9系统构建新型异戊酰螺旋霉素Ⅰ产生菌
被引量：
5
1
作者
张晓婷
张妍
戴剑漉
王以光
赫卫清
机构
中国医学科学院医药生物技术研究所卫健委抗生素生物工程重点实验室
沈阳同联集团有限公司
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期472-481,共10页
基金
国家科技重大专项(No.2014ZX09201003-002)
国家自然科学基金(No.81773617)
医科院创新工程项目(No.2017-I2M-1-012)~~
文摘
异戊酰螺旋霉素(Isovalerylspiramycin,ISP)Ⅰ是必特螺旋霉素(Bitespiramycin,BT)的一种主组分,其抗菌活性与BT相似,而且作为单一组分在质控和剂型上更具优势,目前正在进行临床前研究。原有的 ISPⅠ工程菌株经过3次基因改造,已经具有2种抗性基因,很难再进行遗传操作。前期研究利用经典同源重组的方法无法构建无抗性的ISPⅠ产生菌,文中利用CRISPR-Cas9基因编辑系统在螺旋霉素(Spiramycin,SP)产生菌中成功将3位酰基化酶的基因bsm4替换为组成型强启动子ermEp~*控制下的异戊酰基转移酶基因(Isovaleryltansferase gene,ist)。删除bsm4后突变株只能产生SPⅠ组分,外源基因ist的表达产物催化SPⅠ在其4″位进行异戊酰化修饰形成ISPⅠ。经过HPLC和质谱鉴定,阳性菌株ΔEI的发酵产物中只有ISPⅠ一种ISP组分,证实新的ISPⅠ工程菌株构建成功。ΔEI菌株不带有抗性基因,可重复利用CRISPR-Cas9系统进行基因操作来获得新的改良菌株。
关键词
异戊酰螺旋霉素Ⅰ
酰基转移酶基因
CRISPR-Cas9系统
Keywords
IsovalerylspiramycinⅠ
acyltransferase gene
CRISPR-Cas9 system
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
比率成像纳米探针在内源性小分子成像中的应用
2
作者
殷晴晴
陈梅芳
陈斌龙
王增辉
汪贻广
机构
北京大学药学院药剂学系
北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室
出处
《中国科学：化学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1376-1384,共9页
基金
国家重点研发计划(编号:2017YFA0205600)
国家自然科学基金(编号:81473157
81622046)资助项目
文摘
内源性信号小分子在生命活动过程中起着重要的作用,其浓度的变化和分布的异常与多种生理病理状态相关.设计可实时检测其在体内动态变化的成像体系对疾病诊断、病因探讨及细胞信号转导机制的研究至关重要.传统的检测方式多采用单一通道成像,干扰因素较多难以精确定量.近年来,比率成像纳米探针借助其独特的优势被广泛应用于生物医学领域.本文简要综述了响应于氢离子、活性氧/氮物种(ROS/RNS)和气体信号分子的比率成像纳米探针的设计原理及生物学应用.
关键词
比率成像
纳米探针
PH敏感
ROS/RNS
气体信号分子
Keywords
ratiometric imaging
nanoprobe
pH-sensitive
ROS/RNS
gasotransmitter
分类号
O657.3 [理学—分析化学]
R318 [理学—化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用CRISPR-Cas9系统构建新型异戊酰螺旋霉素Ⅰ产生菌
张晓婷
张妍
戴剑漉
王以光
赫卫清
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
原文传递
2
比率成像纳米探针在内源性小分子成像中的应用
殷晴晴
陈梅芳
陈斌龙
王增辉
汪贻广
《中国科学：化学》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
原文传递
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