masD和bamA是控制石油烃厌氧降解的关键基因,利用实时荧光定量PCR技术检测masD和bamA基因具有简便快速和易操作等优点.但目前所用方法存在扩增效率低,方法灵敏度较差的问题.本文根据引物设计原则,利用Allele ID6软件重新设计了扩增masD...masD和bamA是控制石油烃厌氧降解的关键基因,利用实时荧光定量PCR技术检测masD和bamA基因具有简便快速和易操作等优点.但目前所用方法存在扩增效率低,方法灵敏度较差的问题.本文根据引物设计原则,利用Allele ID6软件重新设计了扩增masD和bamA的实时荧光定量PCR引物,将质粒DNA进行8次10倍梯度稀释后构建实时荧光定量PCR标准曲线.优化后的体系(20μL)为:FastStart Essential DNA Green Master 10.0μL,上下游引物各0.4μL,RNase-Free Water 4.2μL,5.0μL DNA模板.利用新设计的引物扩增masD和bamA基因的最适退火温度分别为61℃和57℃.优化后的检测方法扩增效率提高至97.5%和71.2%,比文献报道的方法提高了7.6%—44.5%,具有更高的重复性和灵敏度.利用设计的引物对陕北5个地区石油污染土壤中的masD和bamA基因进行定量检测结果表明,石油污染土壤中普遍存在着控制石油烃厌氧降解的关键基因,所测定的土壤中bamA降解基因的拷贝数远高于masD降解基因.展开更多
目的整合大学生心理健康管理相关证据,为制定大学生心理健康管理策略提供参考。方法计算机检索权威指南库和Cochrane Library、CINAHL、Web of Science、PubMed、PsycINFO、循证社会科学数据库、中国知网、万方数据库、维普数据库中关...目的整合大学生心理健康管理相关证据,为制定大学生心理健康管理策略提供参考。方法计算机检索权威指南库和Cochrane Library、CINAHL、Web of Science、PubMed、PsycINFO、循证社会科学数据库、中国知网、万方数据库、维普数据库中关于大学生心理健康管理的有关标准、指南、专家共识、证据总结、最佳实践、系统评价。由8名研究者对文献质量进行评价和证据提取、汇总。结果共纳入37篇文献,全部为系统评价。共提取了37条证据,包括心理健康教育、体育、社会支持、自我意识、团体心理辅导、其他心理辅导、自杀自伤和常见心理问题共8个方面。结论高等院校管理者可采取加强心理健康教育、体育、社会支持,并基于影响因素确定高危人群,积极采用团体心理辅导的方法实施大学生的心理健康管理。但目前证据尚不充分,还需要继续开展相关的高质量研究。展开更多
文摘masD和bamA是控制石油烃厌氧降解的关键基因,利用实时荧光定量PCR技术检测masD和bamA基因具有简便快速和易操作等优点.但目前所用方法存在扩增效率低,方法灵敏度较差的问题.本文根据引物设计原则,利用Allele ID6软件重新设计了扩增masD和bamA的实时荧光定量PCR引物,将质粒DNA进行8次10倍梯度稀释后构建实时荧光定量PCR标准曲线.优化后的体系(20μL)为:FastStart Essential DNA Green Master 10.0μL,上下游引物各0.4μL,RNase-Free Water 4.2μL,5.0μL DNA模板.利用新设计的引物扩增masD和bamA基因的最适退火温度分别为61℃和57℃.优化后的检测方法扩增效率提高至97.5%和71.2%,比文献报道的方法提高了7.6%—44.5%,具有更高的重复性和灵敏度.利用设计的引物对陕北5个地区石油污染土壤中的masD和bamA基因进行定量检测结果表明,石油污染土壤中普遍存在着控制石油烃厌氧降解的关键基因,所测定的土壤中bamA降解基因的拷贝数远高于masD降解基因.
文摘目的整合大学生心理健康管理相关证据,为制定大学生心理健康管理策略提供参考。方法计算机检索权威指南库和Cochrane Library、CINAHL、Web of Science、PubMed、PsycINFO、循证社会科学数据库、中国知网、万方数据库、维普数据库中关于大学生心理健康管理的有关标准、指南、专家共识、证据总结、最佳实践、系统评价。由8名研究者对文献质量进行评价和证据提取、汇总。结果共纳入37篇文献,全部为系统评价。共提取了37条证据,包括心理健康教育、体育、社会支持、自我意识、团体心理辅导、其他心理辅导、自杀自伤和常见心理问题共8个方面。结论高等院校管理者可采取加强心理健康教育、体育、社会支持,并基于影响因素确定高危人群,积极采用团体心理辅导的方法实施大学生的心理健康管理。但目前证据尚不充分,还需要继续开展相关的高质量研究。