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MicroRNA-219a-5p和AFAP1L2对胰腺癌细胞的作用研究
1
作者 刘博 戚诚 +5 位作者 赵爽 常晓静 赵晓东 张立超 刘学臣 刘斌 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第21期38-46,共9页
目的探讨microRNA-219a-5p(miR-219a-5p)和肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2(AFAP1L2)对胰腺癌细胞的作用。方法分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting法检测胰腺癌细胞株(PANC-1、BXPC-3、SW1990、Capan-1)及正常... 目的探讨microRNA-219a-5p(miR-219a-5p)和肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2(AFAP1L2)对胰腺癌细胞的作用。方法分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting法检测胰腺癌细胞株(PANC-1、BXPC-3、SW1990、Capan-1)及正常胰腺导管上皮细胞(HPDE)miR-219a-5p、AFAP1L2的表达,采用siRNA及过表达质粒下调或上调AFAP1L2表达,CCK-8法观察胰腺癌细胞株增殖变化。采用mimics或inhibitor上调或下调miR-219a-5p表达,CCK-8法观察胰腺癌细胞株增殖变化。流式细胞术检测不同干预条件下细胞凋亡和细胞周期。生物信息学预测两者可能具有靶向调控关系。qRT-PCR和Western blotting法检测AFAP1L2 mRNA及蛋白表达,荧光素酶实验观察二者碱基配对关系,进一步验证miR-219a-5p对AFAP1L2具有靶向调控作用。结果与HPDE细胞比较,胰腺癌细胞株中miR-219a-5p表达较低(P<0.05)。AFAP1L2 mRNA及蛋白在胰腺癌细胞株中的表达高于在HPDE细胞中的表达(P<0.05)。Capan-1或SW1990细胞培养48 h后,与空白对照组(NC组)比较,pCMV-EGFP-AFAP1L2组光密度(OD)值升高(P<0.05),siAFAP1L2组OD值下降(P<0.05),AFAP1L2对胰腺癌细胞增殖具有正向调控作用。Capan-1及SW1990细胞培养48 h后,与miR-NC组比较,miR-219a-5p mimics组OD值下降(P<0.05),miR-219a-5p inhibitor组OD值升高(P<0.05),miR-219a-5p表达对胰腺癌细胞增殖具有负向调控作用;上调miR-219a-5p表达,可诱导细胞S期阻滞,导致细胞凋亡增加。miR-219a-5p负向调控AFAP1L2表达;荧光素酶实验显示,miR-219a-5p与AFAP1L2的3'-URT互补结合,miR-219a-5p与AFAP1L2存在靶向调控关系。结论miR-219a-5p通过靶向调控AFAP1L2表达负向介导胰腺癌细胞增殖及凋亡。 展开更多
关键词 胰腺癌 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2 microRNA-219a-5p 增殖
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嗜水气单胞菌双重荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：5
2
作者 高智玲 纪雪 +7 位作者 郭学军 陈萍 刘彦晶 刘军 祝令伟 周伟 冯书章 孙洋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1126-1130,共5页
目的建立快速准确检测致病性嗜水气单胞菌的双重荧光定量PCR方法。方法针对嗜水气单胞菌的16S rDNA和气溶素基因aerA的序列设计特异性引物及TaqMan探针,优化双重荧光定量PCR反应条件,并结合常规PCR方法及分离培养鉴定对临床样品进行检... 目的建立快速准确检测致病性嗜水气单胞菌的双重荧光定量PCR方法。方法针对嗜水气单胞菌的16S rDNA和气溶素基因aerA的序列设计特异性引物及TaqMan探针,优化双重荧光定量PCR反应条件,并结合常规PCR方法及分离培养鉴定对临床样品进行检测和对比验证。结果荧光定量PCR反应体系对质粒标准品的敏感性为10拷贝/反应,是常规PCR检测方法的100倍;该方法检测12种其他种属细菌时未出现假阳性;对实际样品的检测结果其敏感性同样高于普通PCR,定量检测目的基因的拷贝数与样品中目的菌的分离率成正比。结论本方法敏感性高,特异性好,可用于致病性嗜水气单胞菌感染的诊断、疾病防控及流行病学研究。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 荧光定量PCR 检测 应用
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体外循环术后应用不同剂量乌司他丁对肺功能的保护作用 被引量：4
3
作者 景小勇 杨学勇 +1 位作者 陈哲 刘迎龙 《临床肺科杂志》 2017年第3期493-496,共4页
目的探讨不同剂量乌司他丁对体外循环术后患者肺功能的保护作用。方法回顾性分析我院2010年2月-2014年12月,90例体外循环下实施先天性心脏病手术矫治患者临床资料,按照随机抛硬币法分组为对照组、甲组、乙组,各30例,其中对照组采用与甲... 目的探讨不同剂量乌司他丁对体外循环术后患者肺功能的保护作用。方法回顾性分析我院2010年2月-2014年12月,90例体外循环下实施先天性心脏病手术矫治患者临床资料,按照随机抛硬币法分组为对照组、甲组、乙组,各30例,其中对照组采用与甲乙两组等容量的生理盐水;甲组采用0.8万U/kg乌司他丁;乙组采用1.2万U/kg乌司他丁。分别于麻醉诱导后切皮前(T_1)、停止体外循环后1 h(T_2)、4h(T_3)及24 h(T_4)时抽取其静脉血液以检测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及细胞间粘附分子-1(sICAM-1)浓度;同时记录T_1、T_2、T_3、T_4时动脉血气、呼吸功能等指标,并计算肺动态顺应性(Cd)、呼吸指数(RI)、氧合指数(OI)级肺静态顺应性(Cs)。结果 3组患者于T_1时的各项炎症因子浓度及呼吸功能指标比较,P>0.05;甲、乙两组于T_3、T_4时TNF-α、IL-6及sICAM-1浓度较对照组明显下降,而OI和Cs及Cd明显增大,RI值明显减少,P<0.05;甲、乙两组于T_2、T_3时IL-10浓度较对照组明显升高。乙组于T_3、T_4时TNF-α、IL-6及sICAM-1浓度较甲组低,而IL-10浓度较甲组高,OR值增加且RI值减少,P<0.05;乙组于T_2、T_3时Cs及Cd值较甲组明显增加,P<0.05。结论所有患者均于体外循环期间发生炎症反应,同时应用不同剂量乌司他丁可起到炎症因子抑制作用,从而减轻患者肺功能损伤,有利于改善患者术后肺功能,且剂量高的保护效果更理想。 展开更多
关键词 乌司他丁 体外循环 肺功能 炎症因子 肺功能
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药师参与多元药物过敏患者围术期抗菌药物品种选择的临床实践 被引量：2
4
作者 潘莹 李晓燕 +4 位作者 魏雪 梁蔚婷 陈卓佳 刘韬 黄红兵 《今日药学》 CAS 2016年第12期873-874,884,共3页
目的为多元药物过敏患者围术期抗菌药物的选用提供参考。方法患者多元药物过敏,既往对莫西沙星、头孢类抗菌药物严重过敏,亚胺培南、阿奇霉素皮试强阳性,临床药师介入后提出使用庆大霉素5 mg·kg-1作为围术期预防用药,采用两步法进... 目的为多元药物过敏患者围术期抗菌药物的选用提供参考。方法患者多元药物过敏,既往对莫西沙星、头孢类抗菌药物严重过敏,亚胺培南、阿奇霉素皮试强阳性,临床药师介入后提出使用庆大霉素5 mg·kg-1作为围术期预防用药,采用两步法进行庆大霉素过敏试验以减少假阳性发生率。结果临床选用庆大霉素预防感染,患者围术期无过敏反应发生,亦未出现感染症状,最终顺利出院。结论药物过敏史评估与过敏试验有效性对于多元药物过敏患者抗菌药物选择策略的制定十分重要,庆大霉素可作为该类患者围术期预防用药的替代选择。 展开更多
关键词 多元药物过敏 抗菌药物预防使用 临床药师
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TGF-β刺激对小鼠脾脏树突状细胞功能的影响 被引量：1
5
作者 杨菲 薛婷 +5 位作者 陈松 刘静茹 黄慧芳 罗悦晨 廖芳 冯晓明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期165-170,共6页
目的探索转化生长因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）通过调节树突状细胞（dendritic cells，DCs）的功能从而抑制CD4^＋ T细胞增殖活化的可能作用机制。方法应用CD11c＋免疫磁珠分选小鼠脾脏DCs，并检测其纯度。TGF-β处... 目的探索转化生长因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）通过调节树突状细胞（dendritic cells，DCs）的功能从而抑制CD4^＋ T细胞增殖活化的可能作用机制。方法应用CD11c＋免疫磁珠分选小鼠脾脏DCs，并检测其纯度。TGF-β处理DCs后，进行基因芯片检测。实时定量PCR验证基因芯片结果。DCs经TGF-β处理后和CD4^＋ T细胞共培养，流式细胞术检测CD4^＋ T细胞的活化和增殖。结果CD11c磁珠分选DCs纯度可以达到95%。TGF-β处理DCs后，抑制DCs表面CD53、CD69、CD33、CD74、CD93分子的表达；抑制趋化因子Ccl3、Ccl5、Ccl9、Ccl6、Ccl17、Cxcl10、Ccl22、Ccl4、Ccr7、Ccl2、Cxcl9、Ccl7的表达；抑制IL-2ra、IL-12rb2、IL-15ra、IL-1b、IL-15炎性细胞因子及其受体的表达；抑制CD4^＋ T细胞的增殖和活化。结论TGF-β可以抑制DCs部分重要的表面CD分子、趋化因子及其受体、细胞因子及其受体的表达，最终抑制CD4^＋T细胞的促活化和增殖。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 基因芯片 树突状细胞 CD4^+T细胞
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miR-16在金黄色葡萄球菌脓毒症中的表达及意义探讨
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作者 王家学 陈燕 +4 位作者 刘小香 孙爱华 杨珺 吕火烊 周永烈 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期427-431,共5页
目的探讨miR-16表达水平与金黄色葡萄球菌脓毒症严重程度的关联性,进一步探讨其潜在的临床意义。方法收集金黄色葡萄球菌脓毒症血液标本共计32例,脓毒性休克、严重脓毒症和一般脓毒症各8例,不同年龄段的健康对照24例;另外,收集革兰氏阴... 目的探讨miR-16表达水平与金黄色葡萄球菌脓毒症严重程度的关联性,进一步探讨其潜在的临床意义。方法收集金黄色葡萄球菌脓毒症血液标本共计32例,脓毒性休克、严重脓毒症和一般脓毒症各8例,不同年龄段的健康对照24例;另外,收集革兰氏阴性菌脓毒症血液标本8例。用Trizol液裂解全血后提取microRNA,采用荧光定量PCR测定miR-16在不同组的表达水平(2-△△Ct法),用SPSS 13.0软件分析各组之间的统计学差异。采用SPSS 13.0软件将miR-16定量值与相应CRP和PCT值进行相关性分析。结果 miR-16表达水平与金黄色葡萄球菌脓毒症严重程度呈明显的负关联,各实验组与对照组相比均有统计学差异(P<0.001),实验组之间也有统计学差异(P<0.01)。miR-16表达水平与CRP和PCT值呈负相关性,相关系数分别为-0.561和-0.769。结论 miR-16表达与金黄色葡萄球菌脓毒症有明显的负关联性,提示其可能作为该菌脓毒症严重程度的标记物。 展开更多
关键词 miR-16 金黄色葡萄球菌 脓毒症
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