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禽致病性大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2 EivC点突变的构建及其ATPase活性分析
被引量：
1
1
作者
许漩
王少辉
+7 位作者
刘新
王栋
梁华
黄彩兰
吴晓君
丁铲
王桂军
于圣青
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2017年第3期47-53,共7页
为了分析禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)Ⅲ型分泌系统2(E.coli TypeⅢsecretion system2,ETT2)Eiv C ATPase关键活性位点,本研究通过比对分析病原菌ATPase序列,筛选APEC ETT2 Eiv C的关键位点。然后设计点...
为了分析禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)Ⅲ型分泌系统2(E.coli TypeⅢsecretion system2,ETT2)Eiv C ATPase关键活性位点,本研究通过比对分析病原菌ATPase序列,筛选APEC ETT2 Eiv C的关键位点。然后设计点突变引物,通过PCR方法构建Eiv C点突变片段,构建Eiv C点突变重组表达质粒。经IPTG诱导表达后纯化相应蛋白,并检测其ATPase活性。结果显示,Eiv C蛋白包含F0F1 ATPase的保守序列,且具有ATPase活性。测序结果显示Eiv C第175、199、201、233位氨基酸突变成功,融合蛋白获得成功表达与纯化。然而,点突变与野生型Eiv C的ATPase活性差异不具有显著统计学意义。本研究结果表明第175、199、201、233位氨基酸不影响Eiv C的ATPase活性。
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关键词
禽致病性大肠杆菌
Ⅲ型分泌系统2
eivC基因
ATPASE
下载PDF
职称材料
题名
禽致病性大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2 EivC点突变的构建及其ATPase活性分析
被引量：
1
1
作者
许漩
王少辉
刘新
王栋
梁华
黄彩兰
吴晓君
丁铲
王桂军
于圣青
机构
安徽农业大学动物科技学院
中国农业科学院上海兽医研究所
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2017年第3期47-53,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.31572523)
公益性农业(科研)专项项目(No.201303044)
文摘
为了分析禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)Ⅲ型分泌系统2(E.coli TypeⅢsecretion system2,ETT2)Eiv C ATPase关键活性位点,本研究通过比对分析病原菌ATPase序列,筛选APEC ETT2 Eiv C的关键位点。然后设计点突变引物,通过PCR方法构建Eiv C点突变片段,构建Eiv C点突变重组表达质粒。经IPTG诱导表达后纯化相应蛋白,并检测其ATPase活性。结果显示,Eiv C蛋白包含F0F1 ATPase的保守序列,且具有ATPase活性。测序结果显示Eiv C第175、199、201、233位氨基酸突变成功,融合蛋白获得成功表达与纯化。然而,点突变与野生型Eiv C的ATPase活性差异不具有显著统计学意义。本研究结果表明第175、199、201、233位氨基酸不影响Eiv C的ATPase活性。
关键词
禽致病性大肠杆菌
Ⅲ型分泌系统2
eivC基因
ATPASE
Keywords
Avian pathogenic Escherichia coli
Type Ⅲ secretion system 2
eivC gene
ATPase
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
禽致病性大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2 EivC点突变的构建及其ATPase活性分析
许漩
王少辉
刘新
王栋
梁华
黄彩兰
吴晓君
丁铲
王桂军
于圣青
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2017
1
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