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重组人角质细胞生长因子-2工程菌的发酵条件研究
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作者 杨诗明 梁波 +1 位作者 王新星 冯红 《生物过程》 2018年第2期40-47,共8页
人角质细胞生长因子-2对烧伤、割伤等造成的皮肤损伤具有良好的促进修复和愈合功能,在临床、化妆品等方面具有极大的应用潜力。为此,人角质细胞生长因子-2的规模化生产和制备成为开发应用的一项重要前提。本文利用正交实验设计,在摇瓶... 人角质细胞生长因子-2对烧伤、割伤等造成的皮肤损伤具有良好的促进修复和愈合功能,在临床、化妆品等方面具有极大的应用潜力。为此,人角质细胞生长因子-2的规模化生产和制备成为开发应用的一项重要前提。本文利用正交实验设计,在摇瓶条件下优化了培养基组分和pH等培养条件对大肠杆菌工程菌细胞生长和重组人角质细胞生长因子-2重组表达的影响。结果表明工程菌生长及表达的最优培养基组分和条件确定为葡萄糖10g/L、蛋白胨20g/L、酵母提取物10g/L、pH7.5及IPTG诱导时间5~6h。最后,在100升的BLBIO-15SIA发酵罐中以优化的发酵条件进行了3个独立批次的发酵实验,工程菌的生物量达到100g/L(DCW)、重组人角质细胞生长因子-2表达量占全细胞总蛋白约为30%。这些结果为进一步中试开发奠定了基础。 展开更多
关键词 人角质细胞生长因子-2 重组表达 发酵条件 正交实验设计
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Ad5-CCL20联合热疗对结肠癌CT-26细胞小鼠移植瘤生长的抑制作用 被引量：3
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作者 祝徐军 苏宁 +5 位作者 姚骏 徐楷 李新星 王伟军 胡志前 孙延平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期633-639,共7页
目的:探讨重组腺病毒Ad5-CCL20联合热疗对结肠癌CT-26细胞小鼠移植瘤的抑制作用。方法:将Ad5-CCL20转染CT-26细胞,采用ELISA法和趋化实验分别检测CT-26细胞中CCL20的表达及其对DC的趋化作用。Western blotting检测热激结肠癌CT-26细胞中... 目的:探讨重组腺病毒Ad5-CCL20联合热疗对结肠癌CT-26细胞小鼠移植瘤的抑制作用。方法:将Ad5-CCL20转染CT-26细胞,采用ELISA法和趋化实验分别检测CT-26细胞中CCL20的表达及其对DC的趋化作用。Western blotting检测热激结肠癌CT-26细胞中HSP70、GP96的表达。用热激后细胞蛋白(Heat组)对DC进行诱导,并设对照组(Control组)和阴性对照组(Unheat组),流式细胞术检测DC的表型。建立CT-26细胞移植瘤模型,设Ad5-CCL20/Heat、Heat、Ad5-CCL20、Ad5-GFP和Control组,观察各组荷瘤小鼠肿瘤生长和生存时间;采用ELISAPOT法和LDH法分别检测脾组织T淋巴细胞分泌IFN-γ的能力和对CT-26细胞的CTL杀伤活性,免疫组化法检测肿瘤组织DC浸润情况。结果:Ad5-CCL20转染CT-26细胞后可高表达CCL20,且对i DC、m DC都具有趋化活性,对i DC更为明显(P<0.05)。CT-26细胞热激后可高表达诱导型HSP70和GP96。与Control、Unheat组相比,Heat组细胞蛋白诱导后DC的CD80、CD86、CCR6和MHC-Ⅱ的表达率明显升高(均P<0.01)。与Control、Ad5-GFP、Ad5-CCL20组和Heat组相比,联合治疗组荷瘤小鼠的肿瘤抑制最为明显(均P<0.01),生存时间明显延长(均P<0.05)。联合治疗后的荷瘤小鼠脾组织T淋巴细胞的CTL活性要明显高于另外四组(均P<0.05),其瘤组织中CD11c^+ DC的阳性率也明显增高(均P<0.05)。结论:重组腺病毒Ad5-CCL20联合热疗可召募并促进DC成熟和抗原提呈,明显抑制肿瘤生长,并延长荷瘤小鼠的生存期,提示其对结肠癌有潜在的治疗作用。 展开更多
关键词 趋化因子 CCL20 腺病毒 树突状细胞 热疗 结肠癌
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2,3-二芳基-1,3-苯并噁嗪的合成及对利什曼原虫CYP51活性的初步研究
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作者 唐子龙 韩新亚 +2 位作者 李新兴 许志峰 万义超 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第1期52-55,共4页
首次对2-(2-硝基苯基)-3-(4-甲基苯基)-1,3-苯并噁嗪(1)与利什曼原虫CYP51的相互作用进行了初步研究,发现化合物1对利什曼原虫CYP51表现出较强的抑制活性,且作用方式类似于底物与利什曼原虫CYP51的I型结合方式.该研究不仅发现了一种新... 首次对2-(2-硝基苯基)-3-(4-甲基苯基)-1,3-苯并噁嗪(1)与利什曼原虫CYP51的相互作用进行了初步研究,发现化合物1对利什曼原虫CYP51表现出较强的抑制活性,且作用方式类似于底物与利什曼原虫CYP51的I型结合方式.该研究不仅发现了一种新型非唑类针对利什曼原虫CYP51的抑制剂:1,3-苯并噁嗪,而且也为创制新型作用方式的CYP51抑制剂研究提供了依据. 展开更多
关键词 2 3-二芳基-1 3-苯并噁嗪 利什曼原虫 CYP51 活性
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