目的鉴定我国内脏利什曼病人血清识别的主要抗原蛋白。方法培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化成无鞭毛体,提取总蛋白,经2-DE电泳,以内脏利什曼病人血清为一抗进行2-D Western blot,对强免疫识别点相应抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串...目的鉴定我国内脏利什曼病人血清识别的主要抗原蛋白。方法培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化成无鞭毛体,提取总蛋白,经2-DE电泳,以内脏利什曼病人血清为一抗进行2-D Western blot,对强免疫识别点相应抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定。结果等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现约700个蛋白点,内脏利什曼病人血清识别的主要无鞭毛体抗原蛋白为β-微管蛋白、磷酸多糖β-1,3半乳糖基转移酶、PA7为磷酸多糖β-1,3阿拉伯糖基转移酶及延伸因子1等,识别的主要前鞭毛体抗原蛋白为热休克蛋白70及延伸因子1等。结论人内脏利什曼病患者血清能识别多种杜氏利什曼原虫蛋白,有利于筛选抗内脏利什曼病疫苗抗原和新的血清学诊断抗原。展开更多
文摘目的鉴定我国内脏利什曼病人血清识别的主要抗原蛋白。方法培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化成无鞭毛体,提取总蛋白,经2-DE电泳,以内脏利什曼病人血清为一抗进行2-D Western blot,对强免疫识别点相应抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定。结果等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现约700个蛋白点,内脏利什曼病人血清识别的主要无鞭毛体抗原蛋白为β-微管蛋白、磷酸多糖β-1,3半乳糖基转移酶、PA7为磷酸多糖β-1,3阿拉伯糖基转移酶及延伸因子1等,识别的主要前鞭毛体抗原蛋白为热休克蛋白70及延伸因子1等。结论人内脏利什曼病患者血清能识别多种杜氏利什曼原虫蛋白,有利于筛选抗内脏利什曼病疫苗抗原和新的血清学诊断抗原。
