目的:研究低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的增殖、凋亡与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)关系。方法:用组织酶消化法获取肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),进行原代培养;采用普通光学显微镜和免疫荧光染色法,分别鉴定PASMCs;选择处于对数生长期的...目的:研究低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的增殖、凋亡与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)关系。方法:用组织酶消化法获取肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),进行原代培养;采用普通光学显微镜和免疫荧光染色法,分别鉴定PASMCs;选择处于对数生长期的4~6代PASMCs,随机分为7组进行造模:常氧对照组(N)、低氧组(H)、DMSO组(D)、U0126组(U)、SB203580组(S)、Anisomycin组(A)、Staurosporine Aglycone组(SA);N组加入10%培养基后置于常氧培养箱中,其它各组分别加入含相应药物的10%培养基后置于低氧培养箱(3%O2,5%CO2,37℃)中,造模时间均为48 h。CCK-8法检测各组PASMCs增殖情况;TUNEL法测定各组PASMCs凋亡情况。结果:与N组相比,H组PASMCs的OD值显著上调(0.990±0.041 vs 1.143±0.033,P<0.01),凋亡指数没有明显变化(4.913±0.451 vs 5.452±0.557,P>0.05);与H组相比,D组PASMCs的OD值和凋亡指数均无显著变化(1.143±0.033 vs 1.142±0.049,5.452±0.557 vs 5.402±0.651,均P>0.05);U组PASMCs的OD值下降,凋亡指数升高(1.143±0.033 vs 0.985±0.078,5.452±0.557 vs 10.145±2.545,均P<0.01);S组PASMCs OD值上调,凋亡指数明显下调(1.143±0.033 vs 1.295±0.039,5.452±0.557 vs 3.093±0.409,均P<0.01);A组PASMCs的OD值下降,凋亡指数升高(1.143±0.033 vs 0.347±0.067,5.452±0.557 vs 25.753±1.262,均P<0.01);SA组PASMCs OD值上调,凋亡指数下调(1.143±0.033 vs 1.685±0.100,5.452±0.557 vs 1.700±0.095,均P<0.01)。结论:低氧对PASMCs增殖和凋亡的调控与MAPK信号通路有关。展开更多
文摘目的:研究低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的增殖、凋亡与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)关系。方法:用组织酶消化法获取肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),进行原代培养;采用普通光学显微镜和免疫荧光染色法,分别鉴定PASMCs;选择处于对数生长期的4~6代PASMCs,随机分为7组进行造模:常氧对照组(N)、低氧组(H)、DMSO组(D)、U0126组(U)、SB203580组(S)、Anisomycin组(A)、Staurosporine Aglycone组(SA);N组加入10%培养基后置于常氧培养箱中,其它各组分别加入含相应药物的10%培养基后置于低氧培养箱(3%O2,5%CO2,37℃)中,造模时间均为48 h。CCK-8法检测各组PASMCs增殖情况;TUNEL法测定各组PASMCs凋亡情况。结果:与N组相比,H组PASMCs的OD值显著上调(0.990±0.041 vs 1.143±0.033,P<0.01),凋亡指数没有明显变化(4.913±0.451 vs 5.452±0.557,P>0.05);与H组相比,D组PASMCs的OD值和凋亡指数均无显著变化(1.143±0.033 vs 1.142±0.049,5.452±0.557 vs 5.402±0.651,均P>0.05);U组PASMCs的OD值下降,凋亡指数升高(1.143±0.033 vs 0.985±0.078,5.452±0.557 vs 10.145±2.545,均P<0.01);S组PASMCs OD值上调,凋亡指数明显下调(1.143±0.033 vs 1.295±0.039,5.452±0.557 vs 3.093±0.409,均P<0.01);A组PASMCs的OD值下降,凋亡指数升高(1.143±0.033 vs 0.347±0.067,5.452±0.557 vs 25.753±1.262,均P<0.01);SA组PASMCs OD值上调,凋亡指数下调(1.143±0.033 vs 1.685±0.100,5.452±0.557 vs 1.700±0.095,均P<0.01)。结论:低氧对PASMCs增殖和凋亡的调控与MAPK信号通路有关。
