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霍乱弧菌ToxS蛋白间的互作增强ToxR蛋白诱导毒力基因的表达 被引量:1
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作者 王相洪 张婷 +3 位作者 涂飞 史梦婷 王卉 杨梦华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期832-840,共9页
【目的】阐明霍乱弧菌ToxR蛋白功能调控的分子机制。【方法】利用巯基捕获(thiol-trapping)的方法分析DsbA蛋白对ToxR周质空间结构域半胱氨酸残基的氧化作用;采用定点突变的方法构建ToxR半胱氨酸突变株(ToxR_(C236/293S));利用荧光素酶... 【目的】阐明霍乱弧菌ToxR蛋白功能调控的分子机制。【方法】利用巯基捕获(thiol-trapping)的方法分析DsbA蛋白对ToxR周质空间结构域半胱氨酸残基的氧化作用;采用定点突变的方法构建ToxR半胱氨酸突变株(ToxR_(C236/293S));利用荧光素酶基因作为报告基因分析ToxR野生型(ToxR_(wt))和半胱氨酸突变体(ToxR_(C236/293S))诱导下游基因表达的活性;通过细菌双杂交系统分析ToxR_(wt)和ToxR_(C236/293S)蛋白之间、ToxR与ToxS之间以及ToxS之间的相互作用。【结果】ToxR周质空间结构域半胱氨酸残基确实可以被DsbA蛋白氧化,且当ToxR与ToxS共表达时,ToxR诱导ctxAB转录表达的活性显著增强,且在dsbA基因缺失突变株中ToxR诱导ctxAB转录表达的活性更高;成功构建株霍乱弧菌ToxR半胱氨酸突变株(ToxR_(C236/293S)),在没有ToxS存在的条件下,ToxR_(C236/293S)诱导毒力基因表达的活性与ToxRwt相当;细菌双杂交系统分析发现当ToxR与ToxS共转录表达时,ToxS极大增强ToxR蛋白之间的互作;在dsbA基因缺失突变株中,ToxS之间的相互作用显著增强。【结论】ToxR蛋白本身的氧还状态对其诱导毒力基因表达的活性没有影响;ToxS通过增强ToxR形成二聚体的能力从而增强其诱导毒力基因的表达,而DsbA对ToxS蛋白之间的相互作用具有抑制作用,DsbA通过影响ToxS的蛋白互作从而影响ToxR蛋白的功能。本文为进一步阐明霍乱弧菌毒力基因表达调控的分子机制提供重要的理论依据。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 表达调控 ToxRS 氧还状态 蛋白互作
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PCR-DGGE分析鲜切莲藕冷藏过程中的菌相变化 被引量:5
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作者 王发祥 刘永乐 +3 位作者 俞健 李向红 王建辉 刘小芳 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第8期255-260,共6页
为明确鲜切莲藕的微生物腐败机制,基于PCR-DGGE技术分析其冷藏过程中的菌相变化。鲜切莲藕样品于4℃冷藏,每间隔3 d取出,PCR扩增其16S r DNA的V3高变区,将产物进行变性梯度凝胶电泳(DGGE),并对优势条带进行回收和测序。结果表明,冷藏过... 为明确鲜切莲藕的微生物腐败机制,基于PCR-DGGE技术分析其冷藏过程中的菌相变化。鲜切莲藕样品于4℃冷藏,每间隔3 d取出,PCR扩增其16S r DNA的V3高变区,将产物进行变性梯度凝胶电泳(DGGE),并对优势条带进行回收和测序。结果表明,冷藏过程中鲜切莲藕的菌相结构发生明显变化,冷藏6~9 d为其腐败的关键时间点,其中假单胞菌属、伯氏致病杆菌、克雷伯氏肺炎杆菌为主要腐败菌,尤其是假单胞菌属在冷藏后期最易增殖,逐渐成为优势腐败菌,可作为鲜切莲藕产品腐败评价或快速检测的重要指示菌。 展开更多
关键词 鲜切莲藕 PCR-DGGE 微生物菌相 腐败菌 变化
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西南地区短期/长期综合干旱指数的构建与应用 被引量:3
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作者 卢金利 徐向红 +2 位作者 王国平 虞美秀 刘小龙 《防灾减灾工程学报》 CSCD 北大核心 2016年第4期681-688,共8页
西南地区雨水充沛、气候湿润,但近年来,该地区严重干旱频发,造成了难以估量的经济和社会损失。干旱评估作为干旱灾害监测与防御的一个重要方面,如何准确评价并预测研究区域的旱情是当前研究的热点和难点。以西南地区南盘江小龙潭以上流... 西南地区雨水充沛、气候湿润,但近年来,该地区严重干旱频发,造成了难以估量的经济和社会损失。干旱评估作为干旱灾害监测与防御的一个重要方面,如何准确评价并预测研究区域的旱情是当前研究的热点和难点。以西南地区南盘江小龙潭以上流域为研究区域,基于日降水、日蒸发、日均气温等水文气象资料,采用栅格化的新安江模型,对研究流域进行日尺度模拟,根据模型计算的栅格土壤含水量以及栅格产水量分别计算土壤相对湿度指数和标准化径流干旱指数,综合改进的帕默尔指数、帕默尔水文干旱指数、帕默尔水分距平指数、不同时间尺度的标准化降水蒸散发指数,利用主成分分析方法,分别研制基于新安江水文模型的短期/长期综合干旱指数并探讨了其在南盘江流域的适用性。结果表明:短期综合干旱指数和长期干旱指数均能很好识别并评价南盘江流域的历史干旱。该研究成果可为西南地区及其他地区建立和健全干旱监测与预警系统提供重要参考。 展开更多
关键词 短期/长期 综合干旱指数 标准化径流指数 西南地区
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基于Vizard环境的三维交互系统设计与实现 被引量:1
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作者 李倍倍 花向红 +1 位作者 张伟 王雪彤 《测绘地理信息》 2017年第5期81-83,112,共4页
借助六自由度的三维鼠标、数据手套和数据头盔多个交互设备,利用SketchUp三维建模软件并采用基于Python语言的Vizard 5.1技术平台,设计开发了一套基于多个感知设备并具有高效三维构建及渲染功能的三维交互系统。该系统实现了用户纵深多... 借助六自由度的三维鼠标、数据手套和数据头盔多个交互设备,利用SketchUp三维建模软件并采用基于Python语言的Vizard 5.1技术平台,设计开发了一套基于多个感知设备并具有高效三维构建及渲染功能的三维交互系统。该系统实现了用户纵深多方向、多视角、运动式的三维立体浏览和自由式、沉浸式的三维交互,增强了虚拟现实的沉浸感和真实感。 展开更多
关键词 Vizard环境 三维鼠标 数据手套 数据头盔 三维交互系统
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滨州市沾化冬枣核中活性多糖的提取
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作者 朱华 刘香红 +2 位作者 赵娜 王滕 方菁菁 《绿色科技》 2016年第20期117-119,共3页
利用沾化冬枣核为试验材料,进行了冬枣核多糖的提取分离研究。通过单因素试验确定冬枣核中多糖的含量,进一步通过正交试验确定了多糖的较优提取条件。结果表明:各因素对枣核多糖提取效果的影响程度从高到低依次为浸提温度>浸提时间&... 利用沾化冬枣核为试验材料,进行了冬枣核多糖的提取分离研究。通过单因素试验确定冬枣核中多糖的含量,进一步通过正交试验确定了多糖的较优提取条件。结果表明:各因素对枣核多糖提取效果的影响程度从高到低依次为浸提温度>浸提时间>料液比。综合考虑提取效果与生产成本,对提取条件进行优化,确定了适宜的提取条件:料液比1∶20、浸提温度90℃、浸提时间4h。以期为冬枣的综合加工利用、为从废弃植物材料中提取生物活性成分提供参考。 展开更多
关键词 冬枣核 活性物质 提取
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