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表面展示新城疫病毒部分F蛋白的重组干酪乳杆菌的构建及其免疫原性 被引量：4
1
作者 刘欢欢 李树东 +8 位作者 杨雨晴 孙晓莹 李岩 刘昕旸 陈小燕 张连妹 白永飞 侯喜林 余丽芸 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1453-1462,共10页
本研究旨在构建重组干酪乳杆菌pLA-Newcastle disease virus (NDV)-F/Lactobacillus casei,获得表达产物,并探讨其免疫效果。利用PCR扩增携带部分主要抗原表位的NDV F基因,与穿梭质粒pLA连接转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中,筛选阳性重组质... 本研究旨在构建重组干酪乳杆菌pLA-Newcastle disease virus (NDV)-F/Lactobacillus casei,获得表达产物,并探讨其免疫效果。利用PCR扩增携带部分主要抗原表位的NDV F基因,与穿梭质粒pLA连接转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中,筛选阳性重组质粒,将其电转化至干酪乳杆菌中,构建重组干酪乳杆菌pLA-NDV-F/L. casei,应用PCR鉴定阳性菌株,Western blotting鉴定重组菌反应原性,间接免疫荧光、流式细胞术和激光共聚焦检测蛋白表达情况。试验选用14日龄雏鸡,各组免疫方式为口服+滴鼻。设立pLA-NDV-F/L. casei两次免疫组和三次免疫组、弱毒疫苗组、pLA/L.casei、未攻毒PBS组和攻毒PBS组。间接ELISA方法检测雏鸡血清IgG、肠道、鼻腔、肺脏中sIgA抗体效价,评价试验组雏鸡攻毒保护率。结果表明,有94.10%的重组菌表达了F蛋白,且高效表达在干酪乳杆菌细胞表面,蛋白大小为62 kDa,并能与抗NDV阳性血清特异性结合。各免疫组anti-F IgG和sIgA抗体水平显著高于对照组,pLA-NDV-F/L. casei三次免疫组抗体持续时间比两次免疫组延长28 d,抗体峰值没有显著差异。免疫pLA-NDV-F/L. casei三次、两次、弱毒疫苗、pLA/L. casei和PBS的攻击保护率分别为80%、80%、90%、0%和0%。因此,利用干酪乳杆菌表达体系成功表达了携带部分抗原表位的NDV F基因,具备良好的反应原性和免疫原性,可诱导机体产生保护性免疫应答。 展开更多
关键词 新城疫病毒 免疫原性 干酪乳杆菌 黏膜免疫 保护率
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刚果(布)Boko Songho-Mindouli成矿带硫、铅同位素特征及其地质意义 被引量：5
2
作者 卢树东 李冰 +2 位作者 肖红 肖淳 闫常魁 《黄金》 CAS 2017年第5期15-21,共7页
Boko Songho-Mindouli成矿带是刚果(布)南部重要的铜多金属矿成矿远景区。以成矿带中Grande、Luangu、Mpassa和Moubiri 4个典型铜多金属矿床的矿石矿物黄铁矿、辉铜矿为研究对象,测定其硫、铅同位素组成,揭示该矿带成矿物质来源并探讨... Boko Songho-Mindouli成矿带是刚果(布)南部重要的铜多金属矿成矿远景区。以成矿带中Grande、Luangu、Mpassa和Moubiri 4个典型铜多金属矿床的矿石矿物黄铁矿、辉铜矿为研究对象,测定其硫、铅同位素组成,揭示该矿带成矿物质来源并探讨其成矿机制。结果表明:矿石矿物δ^(34)S值变化于-1.4‰~23.0‰,平均7.29‰,反映其兼有幔源岩浆成因和生物成因的特点;矿石矿物的^(206)Pb/^(204)Pb值的变化范围为17.810~18.046,^(207)Pb/^(204)Pb值的变化范围为15.592~15.651,^(208)Pb/^(204)Pb值的变化范围为37.719~38.066,其特征显示铅来源具有多源性,而以壳源为主,同时混有深源地幔铅。硫、铅的来源相同,具有相似的地质演化史,矿床属于沉积—热液改造型矿床,受地层和构造控制。 展开更多
关键词 铜多金属矿床 硫、铅同位素组成 物质来源 刚果(布) Boko Songho-Mindouli成矿带
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参仙灵颗粒的成分鉴别及冬凌草甲素和人参皂苷Rg1的含量测定 被引量：3
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作者 蓝晓红 陈太平 +4 位作者 周永刚 陈曙东 李祥 许锐 吴婷 《药学服务与研究》 CAS 2017年第1期34-38,共5页
目的:修订提高解放军第八一医院院内制剂参仙灵颗粒的质量标准,保障在消化道肿瘤病人辅助治疗中的疗效和安全性。方法:在对参仙灵颗粒原有检测方法验证的基础上,完善了仙鹤草、乌梅、甘草、绞股蓝、人参、灵芝的薄层色谱(TLC)鉴别方法;... 目的:修订提高解放军第八一医院院内制剂参仙灵颗粒的质量标准,保障在消化道肿瘤病人辅助治疗中的疗效和安全性。方法:在对参仙灵颗粒原有检测方法验证的基础上,完善了仙鹤草、乌梅、甘草、绞股蓝、人参、灵芝的薄层色谱(TLC)鉴别方法;采用HPLC法测定参仙灵颗粒中冬凌草甲素和人参皂苷Rg1的含量。结果:TLC斑点清晰,阴性对照无干扰,专属性强。参仙灵颗粒中冬凌草甲素在0.015 6~2.00μg范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为96.0%~99.5%(RSD=1.08%,n=6)。人参皂苷Rg1在0.000 9~0.24μg范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为99.1%~104.7%(RSD=2.62%,n=6)。结论:本方法简便,专属性强,重现性好,结果准确,可作为参仙灵颗粒的质量控制标准。 展开更多
关键词 参仙灵颗粒 冬凌草甲素 人参皂苷RG1 色谱 薄层 色谱法 高效液相
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