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猪δ冠状病毒、猪流行性腹泻病毒和猪萨佩罗病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步临床应用 被引量：13
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作者 丁庆文 闫晓光 +6 位作者 张红垒 李倩倩 张云飞 舒祥力 单法 李林姣 胡慧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期615-620,632,共7页
猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)可引起新生仔猪腹泻、呕吐,猪萨佩罗病毒(PSV)可引起猪脑脊髓灰质炎、腹泻等多系统综合征,临床上这3种病毒混合感染很普遍,疾病症状相似,依靠临床症状和剖检变化很难对这3种病毒做鉴别检测... 猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)可引起新生仔猪腹泻、呕吐,猪萨佩罗病毒(PSV)可引起猪脑脊髓灰质炎、腹泻等多系统综合征,临床上这3种病毒混合感染很普遍,疾病症状相似,依靠临床症状和剖检变化很难对这3种病毒做鉴别检测,需借助实验室诊断方法。为了建立快速鉴别检测这种病毒的方法,本研究参照GenBank中登录的PEDV M基因、PDCoV N基因和PSV 2C基因的保守序列,利用Prime6.0软件设计3对引物,经各反应条件的优化建立了能同时检测PDCoV、PEDV和PSV的多重RT-PCR方法,并进行特异性、敏感度和重复性试验。结果显示,该方法除了对PDCoV、PEDV和PSV有特异性扩增外,对猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒、猪博卡病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等猪常见病毒的扩增结果均为阴性,特异性较强;建立的多重RT-PCR方法对3种重组质粒标准品的最低检测限分别为1.40×10^(2)拷贝/μL(PDCoV)、1.53×10^(2)拷贝/μL(PEDV)、1.57×10^(3)拷贝/μL(PSV);而以3种质粒标准品为模板的各单一PCR对PDCoV、PEDV和PSV的检测限分别为1.40×10^(2)拷贝/μL、1.53×10^(2)拷贝/μL、1.57×10^(2)拷贝/μL,该方法虽然对PSV质粒标准品检测的敏感性较低,但总体而言敏感性较高。以PDCoV、PSV病毒核酸及PEDV阳性病料的cDNA为模板,不同时间重复检测3次,检测结果均一致,表明该方法重复性较好。利用该方法和各单一PCR分别对河南部分地市的92份临床腹泻猪的粪便样品和肠道样品进行检测。多重RT-PCR的检测结果显示,PDCoV、PEDV和PSV阳性检出率分别为39.13%(36/92)、57.61%(53/92)和22.83%(21/92);PDCoV、PEDV和PSV 3种病毒混合感染样品3份,阳性检出率为3.26%;与单一RT-PCR方法的检测结果均一致,且两种方法的符合率均为100%。本研究建立的多重RT-PCR检测方法为PDCoV、PEDV和PSV的快速检测和流行病学调查提供了技术手段。 展开更多
关键词 猪δ冠状病毒 猪流行性腹泻病毒 猪萨佩罗病毒 多重RT-PCR
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苯接触对汽车维修人员外周血淋巴细胞染色体畸变率和DNA损伤的影响 被引量：2
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作者 郑宇飞 刘和法 +3 位作者 刘瑞祥 樊树利 云翔 李晓维 《工业卫生与职业病》 CAS 2017年第2期133-135,共3页
目的探讨苯接触对汽车维修人员外周血淋巴细胞染色体畸变率及DNA损伤的影响。方法选取包头市汽修行业接触苯作业人员74名作为接苯组,50名本公司行政管理人员作为对照组;采用溶剂解析法测定空气中苯的浓度;通过单细胞凝胶电泳及染色体畸... 目的探讨苯接触对汽车维修人员外周血淋巴细胞染色体畸变率及DNA损伤的影响。方法选取包头市汽修行业接触苯作业人员74名作为接苯组,50名本公司行政管理人员作为对照组;采用溶剂解析法测定空气中苯的浓度;通过单细胞凝胶电泳及染色体畸变试验,计算染色体畸变细胞率及彗星细胞率作为遗传损伤效应的评价指标。结果染色体畸变率及彗星细胞率接触组高于对照组;高浓度接触组高于低浓度接触组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论苯可以导致暴露人员外周血细胞染色体畸变及DNA损伤增加,且呈剂量-效应关系。 展开更多
关键词 苯 彗星细胞率 染色体畸变率
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