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丝瓜过氧化氢酶基因CAT1的克隆及表达分析 被引量:17
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作者 温庆放 刘建汀 +3 位作者 朱海生 陈敏氡 王彬 张前荣 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2039-2048,共10页
采用RT-PCR和RACE技术从普通丝瓜果肉中分离到1条长达1 755 bp的cDNA序列,并对其进行序列分析。结果表明,该序列包含1个1 479 bp的开放读码框(ORF);预测编码492个氨基酸,理论分子量为56.98 kD,等电点为7.126;编码的蛋白与黄瓜(Cucumi... 采用RT-PCR和RACE技术从普通丝瓜果肉中分离到1条长达1 755 bp的cDNA序列,并对其进行序列分析。结果表明,该序列包含1个1 479 bp的开放读码框(ORF);预测编码492个氨基酸,理论分子量为56.98 kD,等电点为7.126;编码的蛋白与黄瓜(Cucumis sativus)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)和萝卜(Raphanus sativus)同源蛋白的相似性均在92%以上,显示其高度的保守性,将基因命名为Lc CAT1,Gen Bank登录号为:KP222260。Wolf Psort预测其亚细胞定位于过氧化物酶体(Peroxisomal)内;Motif Scan分析显示,蛋白氨基酸序列344~352位和54~70位分别为过氧化氢酶近端血红素—配体及血红素活性位点特征序列,推测其属于典型过氧化氢酶类(typical catalase,t CAT)。荧光定量PCR分析显示,Lc CAT1具有组织表达特异性,在普通丝瓜品种‘福丝3号’叶片中表达量最高,将近为花、果实、根和茎中表达量的5倍。Lc CAT1在所选的6个丝瓜品种的果肉中呈差异表达,普通丝瓜中的表达量均高于有棱丝瓜;在普通丝瓜品种‘福丝3号’鲜切及采后储藏褐变过程中随时间增加而呈现上调表达趋势,且与其酶活性的变化趋势基本一致。Lc CAT1可能在丝瓜果肉褐变产生过程中发挥着一定的调控作用。 展开更多
关键词 丝瓜 褐变 CAT1 基因克隆 实时荧光定量PCR
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水通道蛋白-1在藏族宫颈鳞癌患者中的表达及病理学意义 被引量:1
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作者 简生燕 伍东月 +2 位作者 王海燕 咸文娟 刘寿 《中国妇幼保健》 CAS 2017年第14期3328-3330,共3页
目的探讨水通道蛋白-1(AQP1)在青海省藏族宫颈鳞癌患者中的表达及病理学意义。方法收集2014年11月-2015年6月在青海大学附属医院和青海省人民医院住院行手术治疗的藏族宫颈鳞癌(Ιa1期~Ⅱa期)患者50例,采用RT-q PCR方法检测宫颈鳞癌组... 目的探讨水通道蛋白-1(AQP1)在青海省藏族宫颈鳞癌患者中的表达及病理学意义。方法收集2014年11月-2015年6月在青海大学附属医院和青海省人民医院住院行手术治疗的藏族宫颈鳞癌(Ιa1期~Ⅱa期)患者50例,采用RT-q PCR方法检测宫颈鳞癌组织和癌旁组织中AQP1的基因表达水平,采用免疫组化法检测分析其形态学表达定位和意义。结果RT-q PCR方法检测结果显示,藏族宫颈鳞癌患者患癌组织AQP1 mRNA的表达量高于癌旁组织,分别为5.72±1.05和4.05±0.83,差异有统计学意义(t=7.89,P<0.01)。免疫组化法检测结果与RT-q PCR法检测结果一致,AQP1在宫颈鳞癌组织中的表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=2.02,P<0.05)。免疫组化结果显示,在宫颈鳞癌肿瘤细胞的细胞膜及细胞质中有AQP1的表达,表现为明显棕黄色,同时肿瘤间质血管内皮细胞中也有显著表达。结论 RT-q PCR和免疫组化法均证实AQP1在藏族宫颈鳞癌患者中的表达上调,在肿瘤细胞的细胞膜及细胞质中高表达,在肿瘤间质血管内皮细胞中亦显著表达。 展开更多
关键词 藏族妇女 宫颈鳞癌 水通道蛋白-1
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