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黑龙江某规模化牛场副结核分枝杆菌的分离与鉴定 被引量：8
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作者 蔡珠明 党光辉 +5 位作者 臧鑫鑫 邵明珠 唐阳阳 崔子寅 宋宁宁 刘思国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1177-1180,共4页
为检测黑龙江某规模化牛场副结核病的感染情况,本研究采集了35头副结核分枝杆菌(MAP)抗体阳性牛(有腹泻表现)的直肠刮取物,采用IS900-PCR鉴定样品中的MAP,将该PCR扩增为阳性的样品通过细菌分离培养、菌落形态学观察、多重PCR鉴定MAP的亚... 为检测黑龙江某规模化牛场副结核病的感染情况,本研究采集了35头副结核分枝杆菌(MAP)抗体阳性牛(有腹泻表现)的直肠刮取物,采用IS900-PCR鉴定样品中的MAP,将该PCR扩增为阳性的样品通过细菌分离培养、菌落形态学观察、多重PCR鉴定MAP的亚型,通过IS1311基因序列同源性比对并对分离菌进行遗传进化分析,同时对其进行多态性分型鉴定,进一步确定分离株的亚型。结果显示,35份直肠刮取物样本中,31份经IS900-PCR扩增阳性,分离培养得到的3株分离菌菌落形态与分枝杆菌相似,多重PCR的鉴定谱型均与MAP K-10参考株一致,其在遗传进化上与多株MAP具有高度的亲缘性,经IS1311多态性分型鉴定3株分离菌均为牛型MAP,分别命名为MAP-HLJB160、MAP-HLJB175、MAP-HLJB177。本研究为黑龙江地区副结核病的预防和流行病学调查提供数据支撑。 展开更多
关键词 牛 副结核分枝杆菌 IS1311 亚型鉴定
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结核分枝杆菌复合群、副结核分枝杆菌和禽分枝杆菌禽亚种多重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用 被引量：2
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作者 蔡珠明 党光辉 +6 位作者 臧鑫鑫 邵明珠 唐阳阳 鹿萍 崔莹莹 崔子寅 刘思国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期51-59,共9页
结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等;非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌,包含4个亚种,分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(M... 结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等;非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌,包含4个亚种,分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(MAH)、禽分枝杆菌副结核亚种/副结核分枝杆菌(MAP)和禽分枝杆菌森林土壤亚种(MAS)。为建立MTBC、MAP和MAA的多重荧光定量PCR检测方法,本研究基于MTBC、MAP和MAA的特异性基因devR、F57和IS901分别设计引物及探针,通过优化各反应条件,建立了一种可同时检测3种分枝杆菌的多重Taq Man荧光定量PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对MTB、MB、MAP、MAA和MAS检测为阳性,对其他畜禽病原菌,包括MAH、13种NTM和7种非分枝杆菌检测结果均为阴性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对MB、MAP和MAA重组质粒标准品的检测限均为1.0拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示,批内与批间重复性试验变异系数均小于2.5%,重复性较好。利用该方法检测体外模拟污染(MB、MAP和MAA菌液浓度分别为1.0×10^(3)cfu/mL~1.0×10^(0)cfu/mL)的27份牛抗凝血和12份牛淋巴结组织样品,确定该方法对3种菌的检测限,结果显示该方法对3种菌的检测限均为1.0 cfu/mL~10.0 cfu/mL。将浓度为1.0×10^(6)cfu/mL的MB、MAP和MAA菌液分别单一、两两混合、三种菌混合感染BALB/c小鼠,5 d后,剖杀各组小鼠并取各组织及血液样品,同时采用该方法、常规单一PCR及细菌分离培养方法检测,比较三者的检测结果。结果显示,多重荧光定量PCR方法对不同感染组小鼠的各组织样品检出率为98.1%(212/216),常规单一PCR方法的检出率为81.5%(176/216),细菌分离培养的检出率为52.8%(114/216),多重荧光定量PCR与常规单一PCR的阳性符合率均为100.0%(176/176),与细菌分离培养鉴定结果的阳性符合率均为100.0%(114/114)。本研究首次建立了能够同� 展开更多
关键词 结核分枝杆菌复合群 副结核分枝杆菌 禽分枝杆菌禽亚种 多重Taq Man荧光定量PCR
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蛋种鸡源沙门菌分离与生物学特性
3
作者 郭家媚 赵允清 +6 位作者 邵明珠 吴同垒 张志强 李蕴玉 张艳英 李佩国 张召兴 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期78-80,85,共4页
为鉴定蛋种鸡源沙门菌生物学特性,本试验采集患病蛋种鸡的肝脏、卵黄、心血等病料组织,通过细菌分离培养、肠杆菌科和其他革兰阴性杆菌的标准鉴定系统(API20E)、PCR等方法进行沙门菌分离鉴定;采用人工感染试验、玻板凝集试验、脉冲场凝... 为鉴定蛋种鸡源沙门菌生物学特性,本试验采集患病蛋种鸡的肝脏、卵黄、心血等病料组织,通过细菌分离培养、肠杆菌科和其他革兰阴性杆菌的标准鉴定系统(API20E)、PCR等方法进行沙门菌分离鉴定;采用人工感染试验、玻板凝集试验、脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分别对分离的沙门菌致病性、血清分型、分子分型进行检测。结果显示,分离的12株沙门菌对雏鸡具有致病性;除菌株36未测出血清型外,其余11株沙门菌分离株属于4种血清型,其中菌株C1为O4(B)群无动力沙门菌,菌株C13、C4为鸡沙门菌,菌株C5、C6、C7、C8、C9为病牛沙门菌,菌株C10、C11、C12为肠炎沙门菌;菌株36的PFGE带型不明显,其余11株沙门菌可分为4个不同的PFGE带型,各带型间亲缘关系较远,不同血清型菌株之间的相似度在56%~100%,相同的血清型可能具有聚为1簇的趋势,不同血清型菌株之间具有较高的相似度。本试验结果为进一步分析蛋种鸡源沙门菌及开展分子流行病学溯源提供了科学依据。 展开更多
关键词 蛋种鸡 沙门菌 生物学特性 脉冲场凝胶电泳技术
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改性聚磷酸铵对大兴安岭5树种的可燃物阻燃性能研究
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作者 邵明珠 李丽萍 《浙江林业科技》 北大核心 2016年第2期26-30,共5页
采用改性聚磷酸铵(KH-550/APP)阻燃剂对大兴安岭常见针叶树(油松Pinus tabuliformis var.mukdensis、落叶松Larix gmelinii)和阔叶树(蒙古栎Quercus mongolica、胡桃楸Juglans mandshurica、紫椴Tilia amurensis)的可燃物进行阻燃处理,... 采用改性聚磷酸铵(KH-550/APP)阻燃剂对大兴安岭常见针叶树(油松Pinus tabuliformis var.mukdensis、落叶松Larix gmelinii)和阔叶树(蒙古栎Quercus mongolica、胡桃楸Juglans mandshurica、紫椴Tilia amurensis)的可燃物进行阻燃处理,测定了各树种未处理枯枝、落叶的含水率、热值、灰分及抽提物含量,用锥形量热仪测定处理及未处理的可燃物的燃烧性能。结果表明:KH-550/APP处理后可燃物的最大热释放速率、总热释放量、总烟释放量均明显降低,成炭率提高,表现出显著的阻燃及抑烟作用;对针叶树种的阻燃效果优于阔叶树种,对树枝的阻燃效果优于树叶;针叶树叶阻燃效果顺序为油松>落叶松,阔叶树各树叶阻燃效果顺序为:檬古栎>胡桃楸>紫椴;针叶树枝阻燃效果顺序为:油松>落叶松;阔叶树各树枝阻燃效果顺序为:胡桃楸>檬古栎>紫椴。 展开更多
关键词 改性聚磷酸铵 森林可燃物 阻燃性能 枯枝 落叶
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致羔羊腹泻奇异变形杆菌的分离鉴定及迁徙行为分析 被引量：8
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作者 周建波 胡丽萍 +5 位作者 马宁宁 董雯雯 邵明旭 朱丽君 魏凯 朱瑞良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1274-1282,共9页
2015年春,山东滕州某规模化羊场新生羔羊出现严重的腹泻,并且部分羔羊死亡。对该羊场病死羔羊进行剖检后,共分离到4株细菌(分别命名为PM1、PM2、PM3、PM4)。对所分离的细菌进行形态特征、生化试验以及16S rDNA遗传分析,判定该4株菌均为... 2015年春,山东滕州某规模化羊场新生羔羊出现严重的腹泻,并且部分羔羊死亡。对该羊场病死羔羊进行剖检后,共分离到4株细菌(分别命名为PM1、PM2、PM3、PM4)。对所分离的细菌进行形态特征、生化试验以及16S rDNA遗传分析,判定该4株菌均为奇异变形杆菌。16SrDNA系统发育及同源性分析显示:4株分离菌与其他11株奇异变形杆菌的同源性为99%以上,其中与中国Hu株、马来西亚PPB3株以及印度BAB-199株位于同一个分支上,且与中国的Hu株的进化关系最近;4株分离菌之间的同源性为100%,判断为同1株菌。细菌生长曲线、药敏试验、毒力试验、毒素测定试验以及游散行为分析结果表明,该分离菌于14h左右达到生长稳定期,且对环丙沙星、左氟沙星最为敏感;对小鼠有强致病性,分离菌培养液的无菌滤液对小鼠无毒性作用;在含0.5%琼脂的LB平板上迁徙速度最快,且在含琼脂1.5%和2.0%的LB平板上呈圆环样周期运动。该研究结果为羊奇异变形杆菌病的防控提供了基础。 展开更多
关键词 羔羊 奇异变形杆菌 分离鉴定 16SrDNA 系统发育分析 迁徙行为
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