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分光光度法检测酶促反应中底物的量 被引量：1
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作者 周彦品 王金辉 +3 位作者 李瑞龙 陈瑞华 俞志敏 赵长新 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期433-436,共4页
基于酶与底物结合出现游离氨基酸增多的现象建立了检测酶促反应底物存在的新方法。以蔗糖酶与α-淀粉酶为研究对象,采用茚三酮比色法考察了反应温度、pH、酶浓度等因素对因反应造成游离氨基酸量的影响。结果表明,在50℃、pH=8、0.1%的... 基于酶与底物结合出现游离氨基酸增多的现象建立了检测酶促反应底物存在的新方法。以蔗糖酶与α-淀粉酶为研究对象,采用茚三酮比色法考察了反应温度、pH、酶浓度等因素对因反应造成游离氨基酸量的影响。结果表明,在50℃、pH=8、0.1%的蔗糖酶条件下,因反应变化的游离氨基酸的量与蔗糖质量分数在0.02%～0.08%呈线性关系,方法检出限为37.07μg/mL,相对标准偏差为1.75%～5.11%,方法加标回收率为96.32%～101.31%。α-淀粉酶有相似的结果,方法检出限、相对标准偏差、加标回收率分别为1.317mg/mL、2.79%～5.88%、92.82%～100.86%。 展开更多
关键词 游离氨基酸 底物检测 蔗糖酶 Α-淀粉酶
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甘草次酸减轻放射性炎症反应的作用机制研究 被引量：9
2
作者 苏丽 王锃 +6 位作者 黄菲 蓝瑞隆 石丹 陈纯 张鲁榕 张纬建 洪金省 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第10期1088-1094,共7页
目的:探讨甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)减轻放射性炎症的作用机制。方法:以4Gy X线照射小鼠巨噬细胞RAW264.7为辐射诱导炎症的细胞模型,采用ELISA法检测细胞上清液中的促炎症因子水平,RT-PCR法检测促炎症因子的mRNA表达水平,cell-b... 目的:探讨甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)减轻放射性炎症的作用机制。方法:以4Gy X线照射小鼠巨噬细胞RAW264.7为辐射诱导炎症的细胞模型,采用ELISA法检测细胞上清液中的促炎症因子水平,RT-PCR法检测促炎症因子的mRNA表达水平,cell-based ELISA法检测细胞内磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)蛋白表达,凝胶电泳迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测活化蛋白-1(AP-1)的DNA结合活性,荧光酶标仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生,细胞色素C还原法检测细胞内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶的活性。结果:甘草次酸通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内促炎症因子IL-6、IL-1β的mRNA表达而降低其分泌。甘草次酸抑制p38MAPK磷酸化及下游转录因子AP-1的DNA结合活性。并通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内NADPH氧化酶活性而减少ROS的产生。结论:甘草次酸可能通过抑制NADPH氧化酶/ROS/p38MAPK信号通路而抑制电离辐射诱导的炎症反应。 展开更多
关键词 甘草次酸 电离辐射 炎症 活性氧 NADPH氧化酶
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