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分子伴侣对白喉毒素无毒突变体CRM197重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的促进作用
1
作者 杨梦婷 李晓晓 +4 位作者 林晨 刘明靓 陈叶梓 赵云 刘朝奇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1368-1375,共8页
为了获得有活性的白喉毒素突变体蛋白(Cross-reactingmaterial197,CRM197),本研究利用分子伴侣pG-KJE8与重组质粒pET28a-CRM197在大肠杆菌原核表达系统中进行共表达,来促进目的蛋白的正确折叠,进而提高CRM197蛋白的可溶性表达。将质粒... 为了获得有活性的白喉毒素突变体蛋白(Cross-reactingmaterial197,CRM197),本研究利用分子伴侣pG-KJE8与重组质粒pET28a-CRM197在大肠杆菌原核表达系统中进行共表达,来促进目的蛋白的正确折叠,进而提高CRM197蛋白的可溶性表达。将质粒转化至大肠杆菌后并诱导其表达目的蛋白,再通过SDS-PAGE胶染色、Western blotting等技术对所得蛋白进行检测分析。结果发现:利用体外重组技术成功得到了pET28a-CRM197重组蛋白原核表达质粒,且CRM197重组蛋白在原核表达系统中主要以包涵体形式表达;通过探索和优化,确定了诱导蛋白的最佳浓度和温度,当加入终浓度为1.0 mmol/L IPTG、0.5 mg/mL L-阿拉伯糖、5.0 ng/mL四环素,在20℃条件下诱导16h时,目的蛋白的可溶性表达得到显著提高;可溶性表达的CRM197重组蛋白可以与CRM197一抗发生特异性结合,免疫反应性良好。因此,研究发现分子伴侣pG-KJE8可以促进CRM197重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达,且能很好地与CRM197一抗发生特异性结合,证实CRM197重组蛋白具有良好的免疫反应性,为CRM197蛋白的工业化生产及应用奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 白喉毒素突变体蛋白 原核表达 分子伴侣 可溶性蛋白
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2016年四川省农村学龄儿童青少年营养状况分析 被引量：13
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作者 马梦婷 杨依锦 +3 位作者 刘蒙蒙 刘敏 刘祖阳 颜玲 《职业卫生与病伤》 2017年第2期65-69,共5页
目的分析四川省2016年农村学龄儿童青少年营养状况,为进一步制定科学的营养干预措施提供参考。方法从四川省80个监测县的农村学校随机抽取小学和初中学生进行身高、体重测量和营养状况评估。结果监测的农村学龄儿童青少年营养不良检出率... 目的分析四川省2016年农村学龄儿童青少年营养状况,为进一步制定科学的营养干预措施提供参考。方法从四川省80个监测县的农村学校随机抽取小学和初中学生进行身高、体重测量和营养状况评估。结果监测的农村学龄儿童青少年营养不良检出率17.67%,其中生长迟缓、消瘦检出率分别为6.43%和11.24%,高于全国农村平均水平(χ~2值分别为81.80、24.66,P<0.05);超重、肥胖检出率分别为7.31%、4.15%,低于全国农村平均水平(χ~2值分别为27.22、42.39,P<0.05);随着年龄增加,营养不良检出率有上升趋势(趋势χ~2值为351.90,P<0.05),超重、肥胖检出率呈下降趋势(趋势χ~2值分别为345.70、1 137.86,P<0.05);男生营养不良、超重和肥胖检出率高于女生(趋势χ~2值分别为590.21、187.00、56.23,P<0.05)。结论四川省农村学龄儿童青少年营养健康面临营养不良和营养过剩双重挑战,且营养不良状况更为突出,应加大农村地区营养改善投入力度,抓住学生食育重点,探索包括营养健康教育、身体活动、供餐管理及创建营养校园环境等措施在内的综合干预机制,干预过程应对男生营养状况变化予以特别关注。 展开更多
关键词 营养状况 儿童青少年 农村 营养不良 超重肥胖
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甘氨双唑钠对食管癌同步放化疗增敏疗效与安全性的Meta分析 被引量：6
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作者 李辉 刘婧 +6 位作者 吴栋文 廖梦婷 吴文悦 杨梦玲 叶琳 施舒鹏 申良方 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2016年第12期904-910,共7页
目的：系统评价甘氨双唑钠（CMNa）对食管癌同步放化疗增敏作用的临床疗效和安全性。方法检索中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库（CNKI）、万方医药期刊全文数据库、维普中文科技期刊数据库、PubMed、Cochrane Library、EMBas... 目的：系统评价甘氨双唑钠（CMNa）对食管癌同步放化疗增敏作用的临床疗效和安全性。方法检索中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库（CNKI）、万方医药期刊全文数据库、维普中文科技期刊数据库、PubMed、Cochrane Library、EMBase，收集同步放化疗联合 CMNa 与不联合CMNa治疗食管癌的临床随机对照试验（RCT）。根据纳入排除标准筛选文献，对符合条件的 RCT 由两位研究者独立进行资料提取和质量评价后，采用 RevMan 5．3进行 Meta 分析。结果共有4篇 RCT、262例患者纳入研究。Meta 分析结果显示同步放化疗联合 CMNa 增敏组的完全缓解率（OR ＝2．09，95％CI 为1．24～3．54，Z ＝2．76，P ＝0．006）和总有效率（OR ＝2．75，95％CI 为1．39～5．44，Z ＝2．90，P ＝0．004）均优于非增敏组，差异有统计学意义；两组1年生存率差异无统计学意义（OR ＝1．85，95％CI 为0．94～3．64，Z ＝1．77，P ＝0．08）；两组消化道不良反应（OR ＝0．92，95％CI 为0．49～1．70，Z ＝0．28，P ＝0．78）、骨髓抑制（OR ＝0．69，95％CI 为0．39～1．19，Z ＝1．33，P ＝0．18）、肝功能损伤（OR ＝0．93，95％CI 为0．48～1．79，Z ＝0．23，P ＝0．82）、放射性食管炎（OR ＝1．07，95％CI 为0．58～2．00，Z ＝0．22，P ＝0．82）、放射性肺炎（OR ＝0．76，95％CI 为0．29～1．98，Z ＝0．56，P ＝0．57）、放射性皮肤损伤（OR ＝1．11，95％CI为0．51～2．43，Z ＝0．26，P ＝0．80）的发生率差异均无统计学意义。结论同步放化疗联合 CMNa 增敏治疗食管癌近期疗效好，且不增加不良反应的发生。 展开更多
关键词 食管肿瘤 辐射增敏药 META分析 同步放化疗
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