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24株鸡源丁酸梭菌的分离鉴定及耐药基因与毒力基因携带情况 被引量：2
1
作者 范伟祥 曹艳丽 +3 位作者 崔璐璐 逯晓寒 林海 孙淑红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期115-126,共12页
【目的】旨在对鸡源丁酸梭菌进行分离鉴定与安全性评估。【方法】利用厌氧培养方法对源自汶上芦花鸡与SPF鸡粪便样品进行丁酸梭菌的分离与纯化,挑选可疑菌落进行微生物质谱鉴定,进一步通过16S rRNA基因测序进行鉴定,16S rRNA测序结果与N... 【目的】旨在对鸡源丁酸梭菌进行分离鉴定与安全性评估。【方法】利用厌氧培养方法对源自汶上芦花鸡与SPF鸡粪便样品进行丁酸梭菌的分离与纯化,挑选可疑菌落进行微生物质谱鉴定,进一步通过16S rRNA基因测序进行鉴定,16S rRNA测序结果与NCBI核苷酸数据库中丁酸梭菌的16S rRNA序列进行同源性分析;同时,进行所有分离株对氧氟沙星、头孢吡肟等9种药物的药敏试验,利用PCR方法进行mefA等23种耐药基因扩增,基于益生菌安全要求对样品进行alpha等4种梭菌毒素基因以及typeA等4种肉毒毒素基因的测定。【结果】共分离鉴定了24株丁酸梭菌。24株均对氧氟沙星等7种抗生素表现为敏感,L-1、L-6、L-12仅对新霉素表现为中介,L-19仅对头孢吡肟表现为中介。全部菌株的mefA等16种耐药基因结果全部为阴性,sul2、flor、blaTEM 3种耐药基因全部呈阳性,tetC携带率为79.2%,cmlA携带率为45.8%,blaOXA携带率为37.5%,aadB携带率为12.5%,qnrA携带率为4.2%。PCR结果显示所有分离菌株的alpha、beta、epsilon、iota等4种梭菌毒素基因携带率0%。全部分离菌株均未携带typeA、typeB、typeE、typeF 4种肉毒毒素基因。【结论】结果表明,从未饲喂抗生素和丁酸梭菌的汶上芦花鸡与SPF鸡群中获得的24株丁酸梭菌分离株达到预期的安全性要求,可作为益生添加菌的筛选参考株。 展开更多
关键词 丁酸梭菌 药敏试验 耐药基因 梭菌毒素基因 肉毒毒素基因
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丁酸梭菌影响肠炎沙门氏菌对SPF小鼠致病性的作用 被引量：1
2
作者 崔璐璐 鞠孜敬 +4 位作者 杨溢 张富友 刘青霄 朱国强 孙淑红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期769-779,共11页
【目的】旨在探究丁酸梭菌影响肠炎沙门氏菌(CVCC3377)对SPF小鼠的致病性及对小鼠的保护作用。【方法】选用72只6周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠,按照完全随机区组设计分为阴性对照(CON)、饲喂丁酸梭菌组(CB)、沙门氏菌感染组(SE)和丁酸梭菌... 【目的】旨在探究丁酸梭菌影响肠炎沙门氏菌(CVCC3377)对SPF小鼠的致病性及对小鼠的保护作用。【方法】选用72只6周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠,按照完全随机区组设计分为阴性对照(CON)、饲喂丁酸梭菌组(CB)、沙门氏菌感染组(SE)和丁酸梭菌保护组(CB+SE)4组,每组18只。CON组和SE组饲喂基础日粮和饮水,CB组和CB+SE组饲喂基础日粮和每天更换添加丁酸梭菌(1×10^7 CFU/mL)的饮水,连续饲喂一周;第8天进行肠炎沙门氏菌感染实验,分别对SE组和CB+SE组灌服0.2 mL 1.1×10^4 CFU/只的肠炎沙门氏菌,同时对阴性对照组和丁酸梭菌组灌服0.2 mL生理盐水。在感染后第6天处死小鼠并采集肝脏、脾脏和盲肠及内容物样品。采用H.E染色检测肝脏和脾脏组织的病理学变化,免疫组化检测脾脏组织中TLR4、MyD88蛋白的表达水平,荧光定量PCR检测盲肠组织中TNF-α和IL-6的表达水平,并通过高通量测序方法分析其对肠道菌群的影响。【结果】结果显示,丁酸梭菌能够缓解肠炎沙门氏菌感染引起的小鼠体重下降;H.E染色结果显示,丁酸梭菌可以缓解肠炎沙门氏菌感染造成的组织损伤;免疫组化结果显示,丁酸梭菌可降低脾脏组织细胞中TLR4、MyD88蛋白的表达水平,荧光定量PCR结果显示肠炎沙门氏菌能够显著升高盲肠组织中TNF-α(P<0.05)和IL-6的表达水平,在此基础上饲喂丁酸梭菌能够降低TNF-α和IL-6的表达水平。高通量测序结果显示,丁酸梭菌组Chao1指数、ACE指数和Shannon指数均高于对照组和沙门氏菌感染组(P>0.05),丁酸梭菌可显著降低放线菌门(Actinobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia)在肠道微生物中的比例(P<0.05),另外,丁酸梭菌可以增加乳酸菌属在肠道微生物群落的相对丰度(P>0.05)。【结论】结果表明,丁酸梭菌可以提高小鼠免疫力,缓解由于沙门氏菌感染引起的炎症反应,增加肠道微生物多样性,调节肠道菌群结构。 展开更多
关键词 丁酸梭菌 肠炎沙门氏菌 SPF小鼠 高通量测序 肠道菌群
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季戊四醇产品中杂质检测与脱除研究
3
作者 李正星 姚路路 +1 位作者 陈远芝 崔鹏 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第3期409-413,共5页
针对工业季戊四醇产品颜色发黄的现象,文章通过核磁共振、拉曼光潽、液质联用等检测手段,确定产品中主要杂质为双季戊四醇、少量多季戊四醇、季戊四醇甲醇醚以及微量的缩醛和酯类化合物。对比12种树脂吸附处理工业季戊四醇样品,优选出... 针对工业季戊四醇产品颜色发黄的现象,文章通过核磁共振、拉曼光潽、液质联用等检测手段,确定产品中主要杂质为双季戊四醇、少量多季戊四醇、季戊四醇甲醇醚以及微量的缩醛和酯类化合物。对比12种树脂吸附处理工业季戊四醇样品,优选出强碱性阴离子大孔吸附树脂D201,优化了静态和动态吸附工艺条件。研究结果表明:D201树脂在温度25℃、用量0.67g/L、吸附时间为60min的静态吸附条件下,季戊四醇纯度和白度分别提高至94.34%、99%;在温度25℃、吸附剂床层高径比3∶1、停留时间4 min的动态吸附条件下,纯度和白度分别提升至95.06%、98.9%。 展开更多
关键词 季戊四醇 杂质 检测 脱除
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