目的:获得尘螨变应原第6组分Der f 6原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE结合率。方法:酶切质粒p ET28a(+)-Der f 6获得目的基因Der f 6,将其与p ET32a(+)载体连接成质粒p ET32a(+)-Der f 6,转化BL21细菌后,用异丙基...目的:获得尘螨变应原第6组分Der f 6原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE结合率。方法:酶切质粒p ET28a(+)-Der f 6获得目的基因Der f 6,将其与p ET32a(+)载体连接成质粒p ET32a(+)-Der f 6,转化BL21细菌后,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni+离子亲和层析柱纯化表达产物,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹实验(Western blot)和蛋白质串联质谱(MALDI-TOF/TOF)鉴定纯化产物。以纯化获得的产物为包被抗原建立间接ELISA法检测尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体反应情况。结果:成功构建了原核表达质粒p ET32a(+)-Der f 6,将该质粒转化E.coli BL21诱导表达,亲和层析纯化后,SDS-PAGE显示获得目的蛋白,Western blot验证其能够与载体的组氨酸标签结合,质谱鉴定其Der f 6结构一致。以此产物为包被抗原建立间接ELISA检测尘螨过敏性哮喘患儿血清,阳性率为41.3%(19/46)。结论:成功构建了原核表达质粒p ET32a(+)-Der f 6,亲和纯化获得的目的蛋白具有良好的反应原性。展开更多
研究采用德国SMI制造的iView X Hi-Speed 1250眼动仪对26名高中生进行研究,研究材料为数学学习策略问卷和高考真题.研究结果发现:在数学学习中,学习策略水平不同的学生在不同题型得分上有显著差异;学习策略水平不同的高中生在总解题时...研究采用德国SMI制造的iView X Hi-Speed 1250眼动仪对26名高中生进行研究,研究材料为数学学习策略问卷和高考真题.研究结果发现:在数学学习中,学习策略水平不同的学生在不同题型得分上有显著差异;学习策略水平不同的高中生在总解题时间、平均注视时间、注视次数、眼跳次数和回视次数上有显著差异.结论:学习策略水平高的高中生的眼动指标显著优于得分低的;学习策略在高中生数学解题中有元认知监控作用.展开更多
文摘目的:获得尘螨变应原第6组分Der f 6原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE结合率。方法:酶切质粒p ET28a(+)-Der f 6获得目的基因Der f 6,将其与p ET32a(+)载体连接成质粒p ET32a(+)-Der f 6,转化BL21细菌后,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni+离子亲和层析柱纯化表达产物,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹实验(Western blot)和蛋白质串联质谱(MALDI-TOF/TOF)鉴定纯化产物。以纯化获得的产物为包被抗原建立间接ELISA法检测尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体反应情况。结果:成功构建了原核表达质粒p ET32a(+)-Der f 6,将该质粒转化E.coli BL21诱导表达,亲和层析纯化后,SDS-PAGE显示获得目的蛋白,Western blot验证其能够与载体的组氨酸标签结合,质谱鉴定其Der f 6结构一致。以此产物为包被抗原建立间接ELISA检测尘螨过敏性哮喘患儿血清,阳性率为41.3%(19/46)。结论:成功构建了原核表达质粒p ET32a(+)-Der f 6,亲和纯化获得的目的蛋白具有良好的反应原性。
文摘研究采用德国SMI制造的iView X Hi-Speed 1250眼动仪对26名高中生进行研究,研究材料为数学学习策略问卷和高考真题.研究结果发现:在数学学习中,学习策略水平不同的学生在不同题型得分上有显著差异;学习策略水平不同的高中生在总解题时间、平均注视时间、注视次数、眼跳次数和回视次数上有显著差异.结论:学习策略水平高的高中生的眼动指标显著优于得分低的;学习策略在高中生数学解题中有元认知监控作用.
