氮磷钾配比施肥对紫花苜蓿草产量及品质的影响 被引量：42

1

作者 何飞 赵忠祥 +4 位作者 康俊梅 龙瑞才 吕会刚 杨青川 张铁军 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期24-32,共9页

为了探寻紫花苜蓿种植的最适养分施用量及最佳施肥方案,提高牧草的生产性能及其营养品质,为紫花苜蓿实际生产提供技术指导。于2015和2016年在河北沧州应用“3414”试验设计,以华北地区推广的中苜3号紫花苜蓿为材料,研究了氮、磷、钾肥... 为了探寻紫花苜蓿种植的最适养分施用量及最佳施肥方案,提高牧草的生产性能及其营养品质,为紫花苜蓿实际生产提供技术指导。于2015和2016年在河北沧州应用“3414”试验设计,以华北地区推广的中苜3号紫花苜蓿为材料,研究了氮、磷、钾肥不同施肥配比对紫花苜蓿产量以及营养品质的影响,并探讨了该区域的推荐施肥量。结果表明,不同的施肥量对产量的影响很大,少施肥或者过量施肥都可以影响产量;与未施肥的对照相比,施以不同数量的氮、磷、钾对苜蓿的产量和品质均有显著影响;影响中苜3号紫花苜蓿干草产量高低顺序依次为磷肥>氮肥>钾肥。其中,处理12(N1P1K2)组合两年的产量均为最高,分别为9848.0kg/hm^2和14545.4kg/hm^2,较对照分别增产28.89%和20.37%。本研究得出最佳施肥组合为:施N5.0kg/hm^2、P30.0kg/hm^2、K180.0kg/hm^2,为黄淮海地区类似气候土壤条件下紫花苜蓿草田的合理施肥提供了科学依据和实际生产指导。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 施肥 产量 营养品质

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河北地区22个紫花苜蓿品种的生产性能比较研究 被引量：23

2

作者 吕会刚 康俊梅 +3 位作者 龙瑞才 杨青川 孙彦 张铁军 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期948-958,共11页

2013-2016年通过田间试验,在中国农业大学涿州教学实验场对22个紫花苜蓿品种的产量性能进行比较分析,以期筛选出适宜河北地区种植的苜蓿品种。结果表明,不同年份的苜蓿年干草产量具有极显著差异(P<0.01);建植当年各苜蓿品种平均年产... 2013-2016年通过田间试验,在中国农业大学涿州教学实验场对22个紫花苜蓿品种的产量性能进行比较分析,以期筛选出适宜河北地区种植的苜蓿品种。结果表明,不同年份的苜蓿年干草产量具有极显著差异(P<0.01);建植当年各苜蓿品种平均年产量最低,随着生长年限的延长,产量总体呈增加趋势;‘中苜5号’的4年总干草产量最高,‘SR4030’等6个品种的总产量低于对照品种‘中苜1号’,但与对照差异不显著;第1茬产量最高,随着茬次的增加产量呈下降趋势,第1茬与年产量之间的关联度最高;秋眠性3~6级的品种丰产性和产量稳定性综合评价较高。综合4年试验结果,‘中苜5号’、‘中苜1号’、‘SR4030’、‘巨能551’、‘BR4010’、‘MF4020’、‘SK3010’和‘WL363HQ’产草量高,具有潜在的推广价值,适宜在河北地区大面积推广应用。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 品种 产量 河北地区

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黄淮海地区紫花苜蓿氮磷钾肥料效应与推荐施肥量研究 被引量：22

3

作者 张铁军 赵忠祥 +3 位作者 龙瑞才 吕会刚 杨青川 康俊梅 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期243-249,共7页

为高产优质苜蓿草地施肥提供科学依据,2016-2017年选择黄淮海地区苜蓿生产的典型区域沧州为试验点,以该地区当家苜蓿品种中苜3号(Medicago sativa L.‘zhongmu No.3’)为试验材料,采用"3414"二次回归最优设计试验方案,研究N,... 为高产优质苜蓿草地施肥提供科学依据,2016-2017年选择黄淮海地区苜蓿生产的典型区域沧州为试验点,以该地区当家苜蓿品种中苜3号(Medicago sativa L.‘zhongmu No.3’)为试验材料,采用"3414"二次回归最优设计试验方案,研究N,P,K肥配施对紫花苜蓿当年干草产量和营养成分的影响。结果表明,影响中苜3号苜蓿干草产量高低顺序为磷肥>钾肥>氮肥。处理3(N_1P_2K_2)即施N 5.00kg·hm^(-2),施P_2O_5 60.00kg·hm^(-2),施K_2O 180.00kg·hm^(-2)时获得最高产量23 657.9kg·hm^(-2)。14个处理组合中,处理7(N_2P_3K_2)粗蛋白含量最高,为22.45%,处理6(N_2P_2K_2)粗蛋白含量最低,为16.87%。酸性洗涤纤维含量最低的处理3(N_1P_2K_2),为34.14%,中性洗涤纤维的含量最低的处理7(N_2P_3K_2),为51.27%。处理7(N_2P_3K_2)相对饲用价值最高,为111.36。综合分析,处理7(N_2P_3K_2)的初花期营养价值较高。根据产量模型分析,中苜3号苜蓿施N 4.10kg·hm^(-2),施P_2O_5 48.47kg·hm^(-2),施K_2O 270.00kg·hm^(-2)时可获得最高产量23 918.2kg·hm^(-2)。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 施肥 产量 品质 黄淮海地区

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播种量和行距配置对盐碱地紫花苜蓿草产量及品质的影响 被引量：18

4

作者 吕会刚 康俊梅 +4 位作者 龙瑞才 徐化凌 陈小芳 杨青川 张铁军 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期164-174,共11页

在山东省东营市农业科学研究院试验基地,以黄淮海当家紫花苜蓿品种中苜3号为试验材料,采用随机区组设计,设播种量(7.5, 15.0, 22.5 kg·hm^(-2))和行距(15, 30, 40 cm)两个因素,研究了盐碱地条件下不同播种量和行距对紫花苜蓿干草... 在山东省东营市农业科学研究院试验基地,以黄淮海当家紫花苜蓿品种中苜3号为试验材料,采用随机区组设计,设播种量(7.5, 15.0, 22.5 kg·hm^(-2))和行距(15, 30, 40 cm)两个因素,研究了盐碱地条件下不同播种量和行距对紫花苜蓿干草产量和品质的影响,旨在为苜蓿生产确定最佳播种量和行距配置,为发展盐碱地苜蓿产业提供科学依据。结果表明,1)播种量对3年总产量无显著性影响(P>0.05),但对播种当年产量有极显著影响(P<0.01),播种量22.5 kg·hm^(-2)的3年总产量最高,产量随播种量增加呈不断提高的趋势;行距对3年总产量有极显著性影响(P<0.01),行距15 cm的3年总产量最高,随着行距的增加产量呈减小趋势;行距对播种当年的产量影响较大,随着生长时间的延长,行距对产量的影响逐渐减小;播种量为22.5 kg·hm^(-2)、行距为15 cm组合的3年总产量最高。2)播种量和行距对每m^2枝条数和枝条重有显著性影响(P<0.05),随着播种量的增加和行距的减小,每m^2枝条数呈增加的趋势,枝条重则呈减小趋势。产量与每m^2枝条数始终呈正相关关系,与枝条重呈负相关关系,均达到极显著水平(P<0.01)。3)随着播种量的增加和行距的减小,粗蛋白(crude protein,CP)含量和相对饲喂价值(relative feed value,RFV)有上升的趋势,中性洗涤纤维(neutral detergent fiber,NDF)和酸性洗涤纤维(acid detergent fiber,ADF)含量有下降趋势;播种量为22.5 kg·hm^(-2)、行距为15 cm时营养价值最高。4)从高产和品质综合考虑,在播种量22.5 kg·hm^(-2)和行距15 cm配置情况下,有利于提高苜蓿的产量和品质。综上,在山东以及黄淮海盐碱地区以种植耐盐碱苜蓿品种为宜,不同播种量和行距对产量的影响有随生长期的延长而减少的趋势,在适宜播种量和行距配置条件下,有利于提高苜蓿的产量和品质。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 播种量 行距 产量 品质

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植物CYP450家族研究进展 被引量：12

5

作者 崔会婷 蒋旭 +4 位作者 张铁军 王珍 龙瑞才 杨青川 康俊梅 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期173-180,共8页

植物细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP450s)是超基因家族编码的单加氧酶,参与植物体内的多种代谢反应,在植物生长发育及胁迫响应调节机制中具有重要作用。目前,关于植物CYP450s的研究主要集中在模式植物、农作物和药用植物,对牧草中CYP... 植物细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP450s)是超基因家族编码的单加氧酶,参与植物体内的多种代谢反应,在植物生长发育及胁迫响应调节机制中具有重要作用。目前,关于植物CYP450s的研究主要集中在模式植物、农作物和药用植物,对牧草中CYP450s的研究鲜有报道。综述了CYP 450 s家族基因的分类、结构特点和功能等,为深入研究CYP450 s家族基因的分子机制提供参考,并为牧草CYP450s相关研究提供借鉴。 展开更多

关键词 细胞色素P450 基因家族 蛋白结构 防御反应 生物学功能

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紫花苜蓿种子产量与大小相关性状全基因组关联分析

6

作者 徐明 蒋学乾 +5 位作者 何飞 张帆 杨天辉 龙瑞才 杨青川 丛丽丽 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2419-2427,共9页

紫花苜蓿(Medicago sativa L.)作为一种营养价值高、适口性好的豆科牧草,在我国种植面积不断扩大,其优质种子的需求量也逐年增多。因此,提高单位面积的种子产量对我国紫花苜蓿产业的发展具有重要意义。为挖掘调控种子产量与外形的相关基... 紫花苜蓿(Medicago sativa L.)作为一种营养价值高、适口性好的豆科牧草,在我国种植面积不断扩大,其优质种子的需求量也逐年增多。因此,提高单位面积的种子产量对我国紫花苜蓿产业的发展具有重要意义。为挖掘调控种子产量与外形的相关基因,本研究中,利用从世界各地收集的220份紫花苜蓿种子材料,对其种子重量(Seed weight,SW)、种子面积(Seed area,SA)、种子周长(Seed perimeter,SP)进行全基因组关联分析(Genome-wide association study,GWAS)。表型分析表明3个性状存在不同程度的变异,变异系数分别为10.96%(SW),8.31%(SA),4.43%(SP)。通过GWAS,共在7条染色体上发现20个与3个性状相关的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点,单倍型分析证实了优异等位基因的数量与SW,SA和SP之间存在正相关性。对这20个显著SNP上下游各20 kb范围内的基因进行搜索注释,最终筛选到4个与种子产量和大小相关的候选基因。本研究的结果可为优化紫花苜蓿种子大小,提高种子产量的分子育种提供新的标记与候选基因。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 全基因组关联分析 种子大小 种子产量

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紫花苜蓿SAUR基因家族的鉴定及其在非生物胁迫中的表达模式研究

7

作者 刘昊 李显炀 +6 位作者 何飞 王雪 李明娜 龙瑞才 康俊梅 杨青川 陈林 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期135-153,共19页

SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于S... SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于SAUR基因家族的研究尚未开展。本研究利用生物信息学的方法在紫花苜蓿参考基因组共鉴定到433个MsSAUR成员,并对其基因组位置、基因结构、启动子顺式作用元件以及不同组织中的表达模式进行了分析。同时,利用紫花苜蓿在不同非生物胁迫下的转录组数据,发现有5、11、19以及12个MsSAUR成员分别响应干旱、盐、冷以及碱胁迫,MsSAUR14/94/254可以同时响应干旱和盐胁迫,MsSAUR297可以同时响应干旱、盐以及碱胁迫,MsSAUR306可以同时响应干旱、盐以及冷胁迫。本研究结果可为后期通过基因工程技术创制高产抗逆新种质提供重要的候选基因。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 SAUR基因 全基因组鉴定 非生物胁迫 表达模式

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全基因组水平紫花苜蓿WRKY转录因子家族鉴定与表达模式分析

8

作者 李显炀 刘昊 +6 位作者 何飞 王雪 李明娜 龙瑞才 康俊梅 杨青川 陈林 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期154-170,共17页

WRKY转录因子是植物中最大的基因家族之一,在植物生长发育以及非生物胁迫过程中发挥重要的作用。目前,WRKY基因家族成员已经在多个植物物种中进行了广泛的研究和分析。然而,WRKY转录因子尚未在四倍体紫花苜蓿全基因组水平上进行鉴定与... WRKY转录因子是植物中最大的基因家族之一,在植物生长发育以及非生物胁迫过程中发挥重要的作用。目前,WRKY基因家族成员已经在多个植物物种中进行了广泛的研究和分析。然而,WRKY转录因子尚未在四倍体紫花苜蓿全基因组水平上进行鉴定与分析。本研究系统鉴定了紫花苜蓿WRKY基因家族成员,并对其在不同胁迫处理下的表达模式进行了分析。结果显示,共有198个WRKY转录因子不均匀分布在紫花苜蓿的32条染色体上,其中7号染色体的数量最多。系统进化树结果显示,WRKY基因家族成员可以分为3个组。在这些WRKY转录因子中,有42个响应盐胁迫,7个响应碱胁迫,19个响应冷胁迫和37个响应干旱胁迫,同时发现MsWRKY154和MsWRKY166可以同时响应盐、干旱、冷以及碱胁迫。本研究的结果可为紫花苜蓿WRKY转录因子的生物学功能深入研究奠定基础,同时可为紫花苜蓿分子育种提供有价值的信息。 展开更多

关键词 WRKY转录因子 紫花苜蓿 表达模式 非生物胁迫

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蒺藜苜蓿叶绿素酸酯a加氧酶(MtCAO)基因的克隆与功能分析 被引量：5

9

作者 刘文文 崔会婷 +4 位作者 尉春雪 龙瑞才 康俊梅 杨青川 王珍 《草业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期171-181,共11页

叶绿素含量直接影响植物光合效率,从而决定其生物量。叶绿素酸酯a加氧酶(CAO)催化叶绿素酸酯a转化成叶绿素酸酯b,是叶绿素合成的限速酶之一。本研究克隆了蒺藜苜蓿MtCAO,该基因编码531个氨基酸。进化分析表明,MtCAO与双子叶植物的CAO亲... 叶绿素含量直接影响植物光合效率,从而决定其生物量。叶绿素酸酯a加氧酶(CAO)催化叶绿素酸酯a转化成叶绿素酸酯b,是叶绿素合成的限速酶之一。本研究克隆了蒺藜苜蓿MtCAO,该基因编码531个氨基酸。进化分析表明,MtCAO与双子叶植物的CAO亲缘关系较近。高等植物CAO基因的结构保守,均含有9个外显子。MtCAO主要在绿色组织尤其是叶片中高丰度表达。瞬时表达拟南芥原生质体试验显示,MtCAO-GFP融合蛋白定位于叶绿体。表达模式分析表明,茉莉酸甲酯(MeJA,100μmol·L^-1)及黑暗处理抑制MtCAO的表达,而24 h内NaCl(100 mmol·L^-1)及聚乙二醇(PEG,5%)处理先诱导后抑制其表达,且该基因受昼夜节律调控。这与对MtCAO启动子区顺式作用元件的预测结果一致。类似于超表达AtCAO的拟南芥,超表达MtCAO的拟南芥株系叶色正常,叶绿素含量及鲜重与野生型差异不显著,推测是由于MtCAO高度保守的A结构域中的降解子导致的。 展开更多

关键词 蒺藜苜蓿 叶绿素酸酯a加氧酶 叶绿体定位 昼夜节律 转基因拟南芥

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蒺藜苜蓿MtCYP450基因的克隆及功能分析 被引量：5

10

作者 崔会婷 王珍 +4 位作者 张铁军 蒋旭 龙瑞才 杨青川 康俊梅 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1-10,共10页

分析了豆科模式植物蒺藜苜蓿中MtCYP450的表达特性和对胁迫处理的反应。该基因编码508个氨基酸,蛋白分子量为58.31kDa,等电点为6.85。序列比对发现MtCYP450与狭叶羽扇豆和大豆中的2个CYP450家族94亚家族蛋白同源性较高,因此,MtCYP450属... 分析了豆科模式植物蒺藜苜蓿中MtCYP450的表达特性和对胁迫处理的反应。该基因编码508个氨基酸,蛋白分子量为58.31kDa,等电点为6.85。序列比对发现MtCYP450与狭叶羽扇豆和大豆中的2个CYP450家族94亚家族蛋白同源性较高,因此,MtCYP450属于细胞色素P450的CYP94亚家族。荧光定量PCR结果显示MtCYP450在叶中表达最高,茎中次之,根中最少。在胁迫处理(200mM NaCl、5%PEG、100μM ABA和100μM MeJA)8~12h后,叶片中MtCYP450基因表达量显著上升,表明该基因受逆境和生长调节剂诱导表达。T2代超表达MtCYP450基因拟南芥在PEG和MeJA处理后MtCYP450表达量均上升;对异源超表达拟南芥的生长情况分析显示转基因拟南芥在NaCl(125mM)处理后根长是野生型的1.63倍,表明MtCYP450基因增强了拟南芥根系的抗盐性。因此,MtCYP450基因可能对植物抵抗非生物胁迫具有重要作用。 展开更多

关键词 蒺藜苜蓿 细胞色素P450 非生物胁迫 实时定量PCR 遗传转化

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紫花苜蓿开花性状的遗传特性分析与QTL定位 被引量：3

11

作者 何飞 张帆 +4 位作者 张铁军 康俊梅 龙瑞才 杨青川 马春晖 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期112-120,共9页

通过构建紫花苜蓿杂交F1代遗传分离群体,研究紫花苜蓿早熟性状的遗传特性,确定始花期性状的最适遗传模型,同时定位始花期相关的QTL位点。以低产早熟紫花苜蓿(父本)和高产晚熟紫花苜蓿(母本)为亲本构建杂交群体,以亲本和二者杂交产生的15... 通过构建紫花苜蓿杂交F1代遗传分离群体,研究紫花苜蓿早熟性状的遗传特性,确定始花期性状的最适遗传模型,同时定位始花期相关的QTL位点。以低产早熟紫花苜蓿(父本)和高产晚熟紫花苜蓿(母本)为亲本构建杂交群体,以亲本和二者杂交产生的152个F1代单株为研究对象。于2015和2016年调查始花期性状,运用主多基因遗传模型分析始花期性状的最适遗传模型。通过GBS测序技术对154个单株进行基因分型,利用测序产生的SNP标记构建连锁图谱,同时结合表型数据进行QTL定位。结果表明:2MG-A为始花期性状的最适遗传模型,2015年的主基因遗传率为99%,2016年的主基因遗传率为98.5%。父本连锁图覆盖图距为1386cM,平均标记密度3.2cM;母本连锁图覆盖图距为798.73cM,平均标记密度8.07cM。对两年的数据进行QTL定位分析得到2个主效QTL位点,表型贡献率分别为12.1334%和11.0157%。表明始花期主要受两对主效基因控制,同时具有加性作用。始花期性状主要由2个QTL位点控制。 展开更多

关键词 开花性状 始花期 遗传分析 连锁图谱 QTL定位

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过量表达紫花苜蓿MsHB7基因对拟南芥耐旱性的影响 被引量：2

12

作者 候怡谣 李霄 +3 位作者 龙瑞才 杨青川 康俊梅 郭长虹 《草业学报》 CSCD 北大核心 2021年第4期170-179,共10页

同源异型域-亮氨酸拉链蛋白(HD-Zip)第I类亚家族在植物非生物胁迫调控过程中起着重要作用,已在多个物种中进行了克隆鉴定,但关于紫花苜蓿该家族基因的研究还鲜有报道。本研究旨在研究紫花苜蓿HD-Zip第I类亚家族基因MsHB7对拟南芥抗旱性... 同源异型域-亮氨酸拉链蛋白(HD-Zip)第I类亚家族在植物非生物胁迫调控过程中起着重要作用,已在多个物种中进行了克隆鉴定,但关于紫花苜蓿该家族基因的研究还鲜有报道。本研究旨在研究紫花苜蓿HD-Zip第I类亚家族基因MsHB7对拟南芥抗旱性的调控功能。通过克隆得到大小为738 bp、编码245个氨基酸的MsHB7基因的开放阅读框。多重序列比对和系统进化树分析结果显示,MsHB7蛋白属于HD-Zip I亚家族,且与拟南芥中ATHB7和ATHB12亲缘关系较近。实时荧光定量分析表明,MsHB7基因受干旱诱导。将MsHB7基因转化拟南芥并获得了阳性植株。干旱处理后,转基因拟南芥比野生型拟南芥萎蔫程度更明显,转基因植株相对含水量显著低于野生型拟南芥,并积累了更多的脯氨酸和丙二醛。qRT-PCR检测发现处理之后逆境胁迫指示基因ATCAT1、ATDREB2A和ATRD29A在转基因拟南芥中的表达量显著升高,而ATLEA3的表达量显著下降。上述结果表明MsHB7基因的过表达可降低转基因拟南芥的耐旱性,为进一步开发利用该基因提供理论依据。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 同源异型域-亮氨酸拉链蛋白 干旱胁迫 转基因拟南芥

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紫花苜蓿MsFtsH8基因的克隆及功能分析

13

作者 余倩文 李明娜 +3 位作者 龙瑞才 杨青川 康俊梅 郭长虹 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1442-1451,共10页

盐胁迫是影响植物生长发育的主要非生物胁迫之一。金属蛋白酶FtsH(Filamentation Temperature-Sensitive H)是一种ATP和Zn2+依赖型蛋白酶,广泛存在于真核生物和原核生物中,属于AAA蛋白酶家族(ATPase associated with various cellular a... 盐胁迫是影响植物生长发育的主要非生物胁迫之一。金属蛋白酶FtsH(Filamentation Temperature-Sensitive H)是一种ATP和Zn2+依赖型蛋白酶,广泛存在于真核生物和原核生物中,属于AAA蛋白酶家族(ATPase associated with various cellular activities),在植物叶绿体发育、光合系统蛋白合成和修复、非生物胁迫的应答和抵抗、植物叶片杂色的调控等重要植物生长发育过程中起到了重要的作用。FtsH在拟南芥、油菜、大豆等植物中多有研究,但在紫花苜蓿中的功能还尚未有详细报导。本研究克隆且分析了紫花苜蓿MsFtsH8基因的表达模式,并对该基因进行生物信息学分析,通过在拟南芥中过表达发现,过表达的拟南芥植株在盐胁迫条件下,种子发芽率、根长和鲜重显著提高。研究结果表明,MsFtsH8具有调控耐盐的功能。本研究为苜蓿耐盐分子育种提供了重要候选基因和理论参考。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 金属蛋白酶FtsH 盐胁迫 蛋白水解酶

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蒺藜苜蓿MtNSN1的克隆与功能分析

14

作者 张智琦 王珍 +3 位作者 张铁军 龙瑞才 杨青川 康俊梅 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期200-208,共9页

核干因子(NS)是一类广泛存在于动物细胞核中的GTP结合蛋白,主要参与胚的形成和细胞增殖,对维持细胞周期具有重要作用。本研究旨在初探蒺藜苜蓿MtNSN1的表达模式及其对生长发育的调控功能。克隆获得蒺藜苜蓿MtNSN1基因cDNA全长2193bp,其... 核干因子(NS)是一类广泛存在于动物细胞核中的GTP结合蛋白,主要参与胚的形成和细胞增殖,对维持细胞周期具有重要作用。本研究旨在初探蒺藜苜蓿MtNSN1的表达模式及其对生长发育的调控功能。克隆获得蒺藜苜蓿MtNSN1基因cDNA全长2193bp,其中开放阅读框为1800bp,编码599个氨基酸,蛋白分子量133.7kDa。进化树分析显示MtNSN1与大豆NSN1的氨基酸同源性为66.67%。组织器官表达分析表明,MtNSN1在蒺藜苜蓿花中表达量最高,根次之,叶中表达量最低。RNA原位杂交的结果显示该基因主要在蒺藜苜蓿生长发育活跃的茎尖分生组织及其周围的幼嫩叶中表达。MtNSN1转化野生型拟南芥得到超表达植株,通过统计分析表明超表达植株的主根长度和叶片数量都明显优于野生型。在超表达植株中5个细胞周期标记基因的表达水平均比野生型拟南芥显著上调;利用DNA化学诱变剂博来霉素对植株进行处理,发现超表达植株的根系受抑制程度小于野生型。以上结果表明,MtNSN1与蒺藜苜蓿茎尖分生组织的维持及地上、地下器官的发育有关,同时异源表达MtNSN1在转录水平上影响拟南芥细胞周期的表达。 展开更多

关键词 蒺藜苜蓿 MtNSN1 分生组织 细胞周期

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河北地区紫花苜蓿品种的生产性能比较研究 被引量：18

15

作者 张铁军 龙瑞才 +4 位作者 赵忠祥 吕会刚 闫旭东 杨青川 康俊梅 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期35-42,共8页

2013~2016年通过田间试验,对国内外15个紫花苜蓿品种的产量性能进行比较分析,以期筛选出适宜河北地区种植的苜蓿品种。结果表明,不同年份的苜蓿年产量具有极显著差异(P<0.01);15个苜蓿品种中4年平均年产量(干重)居前三位的是中苜3号... 2013~2016年通过田间试验,对国内外15个紫花苜蓿品种的产量性能进行比较分析,以期筛选出适宜河北地区种植的苜蓿品种。结果表明,不同年份的苜蓿年产量具有极显著差异(P<0.01);15个苜蓿品种中4年平均年产量(干重)居前三位的是中苜3号、中苜2号和WL712HQ,分别为14423.1kg/hm2、13706.3kg/hm2、13144.3kg/hm2。4个茬次的干草产量存在显著差异(P<0.05),第1茬的产量最高,约占年总产量的38%,第4茬产量最低,年产量最高的两个品种的第一茬产量也最高。第一茬与年产量之间的关联度最高。综合4年的结果,筛选出适宜河北地区种植的苜蓿品种为中苜3号和中苜2号,国外品种中WL712HQ、WL903HQ和MagnumVI表现良好。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 品种 产量 河北地区

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蒺藜苜蓿lncRNA167及其剪切产物miR167c的鉴定和功能分析 被引量：4

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作者 张家驹 于洁 +3 位作者 李明娜 康俊梅 杨青川 龙瑞才 《草业学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期164-180,共17页

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的功能性RNA分子,lncRNA在植物生长发育以及生物和非生物胁迫响应过程中发挥着重要作用。lncRNA常与microRNA(miRNA)关联发挥作用。本研究从蒺藜苜蓿中克隆一个预... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的功能性RNA分子,lncRNA在植物生长发育以及生物和非生物胁迫响应过程中发挥着重要作用。lncRNA常与microRNA(miRNA)关联发挥作用。本研究从蒺藜苜蓿中克隆一个预测的新lncRNA,该lncRNA与蒺藜苜蓿miR167c在染色体上位置重合,命名为Mt-lncRNA167,并推测Mt-lncRNA167作为Mt-miR167c的剪切前体发挥作用。靶基因预测分析结果表明,生长素响应因子6/8(auxin response factor 6/8)是miR167c的两个靶基因。表达模式分析表明,Mt-lncRNA167主要在叶中表达,Mt-lncRNA167和Mt-miR167c对100 mmol·L-1NaCl、5%PEG 6000和4℃低温胁迫处理均有响应,与Mt-lncRNA167启动子顺式作用元件功能预测结果一致。在盐、干旱、低温胁迫条件下,Mt-lncRNA167与MtmiR167c表达模式基本相同,与靶基因ARF6/8表达模式相反。Mt-lncRNA167与Mt-miR167c超表达转化拟南芥植株表现出生育缺陷的表型,即果荚和花丝显著缩短,花药不能正常释放花粉,花粉活力降低。盐和干旱胁迫下发芽率结果表明Mt-lncRNA167和Mt-miR167c超表达植株抗性优于野生型。此外,Mt-lncRNA167和Mt-miR167c超表达植株下胚轴显著长于野生型。综合以上,推测Mt-lncRNA167作为Mt-miR167c的前体发挥作用,MtmiR167c抑制ARF6/8基因的表达,Mt-lncRNA167-Mt-miR167c-ARF6/8作用网络在蒺藜苜蓿抗逆和发育调控方面发挥重要作用。 展开更多

关键词 苜蓿 长链非编码RNA MICRORNA 非生物胁迫 生长发育

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紫花苜蓿镰刀菌根腐病抗病种质资源筛选 被引量：4

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作者 支旭欣 张帆 +3 位作者 杨青川 王珍 康俊梅 龙瑞才 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2022年第4期104-112,共9页

紫花苜蓿根腐病是我国苜蓿产区普遍发生的病害之一,其主要致病病原为尖孢镰刀菌。采用水培接菌法接种尖孢镰刀菌,测定58份供试苜蓿材料的病情指数、株高、根长、地下生物量并进行相关分析和聚类分析,评价紫花苜蓿种质材料苗期根腐病抗... 紫花苜蓿根腐病是我国苜蓿产区普遍发生的病害之一,其主要致病病原为尖孢镰刀菌。采用水培接菌法接种尖孢镰刀菌,测定58份供试苜蓿材料的病情指数、株高、根长、地下生物量并进行相关分析和聚类分析,评价紫花苜蓿种质材料苗期根腐病抗性。结果表明,株高、根长、地下生物量与病情指数均呈负相关。病情指数变化范围为12.50~70.83,根据病情指数共划分出4个不同抗性等级,分别是抗病材料、耐病材料、感病材料和高感材料。其中,抗病材料共1份,耐病材料共22份,感病材料共25份,高感材料共10份。根据聚类分析结果显示,58份紫花苜蓿材料大致分为可分为三类,分别为15份耐病材料、24份感病材料和19份高感材料。虽然部分材料与病情指数划分结果不是完全一致,但抗病材料和感病材料在聚类分析结果中能够被明显区分。其中,不同分析方法都表明,PAMPA为抗病材料,阳高、甘农3号、新牧2号、龙牧1号、CF030056、狼山、北疆、敖汉、偏关、G 13608都为高感材料,没有对根腐病完全免疫的种质材料。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 尖孢镰刀菌 根腐病 抗病性鉴定

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蒺藜苜蓿miR167c调控生长和花器官发育的功能验证

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作者 张立霞 李霄 +6 位作者 许蕾 旦真措 刘亚娇 苏德毕力格 丛丽丽 杨青川 龙瑞才 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期2925-2937,共13页

MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,参与调控植物的生长发育、代谢和逆境响应等过程。本研究通过构建蒺藜苜蓿miR167c的海绵载体,探究miR167c及其靶基因对拟南芥生长发育的影响。靶基因预测结果显示,生长素响应因子6/8(Auxi... MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,参与调控植物的生长发育、代谢和逆境响应等过程。本研究通过构建蒺藜苜蓿miR167c的海绵载体,探究miR167c及其靶基因对拟南芥生长发育的影响。靶基因预测结果显示,生长素响应因子6/8(Auxin response factor 6/8,ARF6/8)、类受体蛋白激酶家族蛋白(Receptor-like protein kinase-related family protein,RPK)和IAA-氨基酸水解酶(IAA-Alanine resistant 3,IAR3)基因为拟南芥miR167c的靶基因。实时荧光定量分析表明,转基因拟南芥植株中At-miR167c表达量较野生型显著降低,而上述4个靶基因的表达量显著上调。转基因拟南芥的花期提前,花序紧凑,花苞数量增多;莲座叶数量和鲜重显著增加;株高、分枝数和果荚数明显增加。研究结果为进一步解析miR167调控植物生长和花器官发育的分子机制提供了参考依据。 展开更多

关键词 蒺藜苜蓿 微小核糖核酸 生长素响应因子 拟南芥 生长发育

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紫花苜蓿甘氨酸脱羧酶H-蛋白基因MsGDC-H1功能分析

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作者 尉春雪 何飞 +7 位作者 许蕾 李霄 张立霞 李明娜 陈林 康俊梅 杨青川 龙瑞才 《草业学报》 CSCD 北大核心 2022年第12期95-105,共11页

光呼吸通过清除2-磷酸乙醇酸(2-PG)使氧合光合作用成为可能,该过程对C3植物至关重要。H-蛋白是光呼吸过程中将甘氨酸转化为丝氨酸的甘氨酸脱羧酶(GDC)的关键组成蛋白之一。本研究克隆了紫花苜蓿MsGDCH1,该基因编码166个氨基酸,具有1个... 光呼吸通过清除2-磷酸乙醇酸(2-PG)使氧合光合作用成为可能,该过程对C3植物至关重要。H-蛋白是光呼吸过程中将甘氨酸转化为丝氨酸的甘氨酸脱羧酶(GDC)的关键组成蛋白之一。本研究克隆了紫花苜蓿MsGDCH1,该基因编码166个氨基酸,具有1个硫辛酰基附着位点保守结构域和1个N6-硫辛酰赖氨酸保守位点。进化分析表明,MsGDC-H1蛋白与双子叶植物的甘氨酸脱羧酶H-蛋白(GDC-H)亲缘关系近。表达模式分析表明,MsGDC-H1在苜蓿叶中表达丰度高,且受光诱导。为了探究MsGDC-H1基因对拟南芥生长的影响,分别使用光诱导的茎叶特异性启动子ST-LS1和组成型启动子CaMV 35S驱动MsGDC-H1(ST-LS1::MsGDC-H1;CaMV35S::MsGDC-H1)在拟南芥中异源表达。检测过表达植株生物量、淀粉、可溶性糖含量以及光合速率。数据分析显示,CaMV 35S::MsGDC-H1过表达拟南芥(G系列植株)生长受阻,淀粉含量比ST-LS1::MsGDC-H1特异性表达拟南芥(GS系列植株)增加了34%~67%,比野生型(WT)增加了7。3%~33。7%;可溶性糖含量比GS系列降低了36%~38%,比WT增加了44。3%~49。7%;与WT相比,GS系列植株生长更快,淀粉含量无显著差异(P>0。05),可溶性糖含量显著增加(P<0。05)。试验结果表明,MsGDC-H1基因在调控拟南芥光合速率、碳水化合物合成以及生长等方面发挥重要作用,未来可作为提高苜蓿产量的基因工程育种候选基因。 展开更多

关键词 甘氨酸脱羧酶H-蛋白 产量 光合速率 糖含量 拟南芥

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紫花苜蓿总皂甙测定及不同组织含量分布的研究 被引量：1

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作者 张俏燕 张铁军 +3 位作者 杨青川 孙彦 龙瑞才 康俊梅 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期7-12,共6页

以紫花苜蓿中苜1号为研究对象,采用固相萃取(SPE)纯化后紫外分光光度(UV)法对紫花苜蓿不同组织中的总皂甙含量进行比较研究。通过对总皂甙提取纯化工艺进行优化,以香草醛-高氯酸为显色剂使皂甙显色后,用分光光度法(λ=545nm)对紫花苜蓿... 以紫花苜蓿中苜1号为研究对象,采用固相萃取(SPE)纯化后紫外分光光度(UV)法对紫花苜蓿不同组织中的总皂甙含量进行比较研究。通过对总皂甙提取纯化工艺进行优化,以香草醛-高氯酸为显色剂使皂甙显色后,用分光光度法(λ=545nm)对紫花苜蓿根、茎、叶、种子及全株总皂甙含量进行测定。结果表明,最佳提取纯化工艺为:70%乙醇溶液进行超声辅助提取、提取液注入Sep-Pak C18后用水和30%甲醇淋洗纯化,最终4ml甲醇洗脱总皂甙。紫花苜蓿不同部位总皂甙含量分布不均匀:根1.98%~2.27%、茎0.87%~0.97%、叶1.15%~1.30%、种子0.88%~0.99%、全株1.08%~1.23%。 展开更多

关键词 苜蓿总皂甙 含量测定 组织分布 固相萃取 紫外分光光度法

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