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可调控表达人博卡病毒1型非结构蛋白NS1稳定细胞系的建立及其反式转录激活作用初探
1
作者 朱记平 刘媛 +2 位作者 骆茹梦 冯小婷 李毅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1126-1134,共9页
人博卡病毒1型(Human bocavirus 1,HBoV1)非结构蛋白NS1是多功能蛋白,对病毒复制有重要作用,同时可诱导宿主细胞凋亡。在研究NS1蛋白功能时,降低NS1蛋白对宿主细胞的毒性作用是急需解决的问题。基于此,文中建立了可调控表达HBoV1非结构... 人博卡病毒1型(Human bocavirus 1,HBoV1)非结构蛋白NS1是多功能蛋白,对病毒复制有重要作用,同时可诱导宿主细胞凋亡。在研究NS1蛋白功能时,降低NS1蛋白对宿主细胞的毒性作用是急需解决的问题。基于此,文中建立了可调控表达HBoV1非结构蛋白NS1的稳定细胞系。构建NS1重组慢病毒质粒(含可调控启动子),应用转染试剂将NS1重组慢病毒质粒转染至HEK293T细胞。通过嘌呤霉素筛选抗性细胞、多西环素诱导NS1表达,建立可稳定表达NS1-100、NS1-70蛋白的HEK 293T细胞系,利用荧光标记蛋白和Western blotting检测,确定NS1蛋白的表达。并在稳定表达NS1细胞系中转染HBoV1启动子-荧光素酶基因的质粒,分析NS1的反式转录激活活性。结果表明NS1蛋白可在建立的细胞系中稳定表达,且稳定表达NS1蛋白对HBoV1启动子有较强的激活活性,为进一步研究非结构蛋白NS1的功能及人博卡病毒致病机理奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 人博卡病毒1型 NS1 稳定表达细胞系 反式转录激活
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气藏束缚水饱和度实验测试与机理 被引量：5
2
作者 桂婷婷 魏东 +3 位作者 王继平 朱秋影 方飞飞 谢坤 《大庆石油地质与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期81-84,共4页
气藏在开发过程中普遍产水,不同渗透率砂岩储层含水饱和度是气藏产能评价的重要依据。采用气水相对渗透率测试与铸体薄片、高压压汞等实验相结合的方法,测试渗透率为(0.013~14.22)×10-3μm2的砂岩岩心的相对渗透率,并获得其孔隙结... 气藏在开发过程中普遍产水,不同渗透率砂岩储层含水饱和度是气藏产能评价的重要依据。采用气水相对渗透率测试与铸体薄片、高压压汞等实验相结合的方法,测试渗透率为(0.013~14.22)×10-3μm2的砂岩岩心的相对渗透率,并获得其孔隙结构参数。结果表明:岩心渗透率越大,则束缚水饱和度越低,但不同渗透区间,束缚水饱和度的变化幅度不同;岩心的孔隙与喉道发育越好,束缚水饱和度越低。机理认识有助于制定含水气藏合理工作制度与开发方案。 展开更多
关键词 砂岩气藏 束缚水饱和度 渗透率 气水相对渗透率曲线 孔隙结构
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离子色谱-质谱联用法检测咖啡豆中的典型单糖和小分子寡糖 被引量：4
3
作者 张涛 蔡峰 +3 位作者 崔鹤 马继平 朱倩林 胡东青 《分析仪器》 CAS 2017年第5期20-25,共6页
建立了离子色谱-质谱联用技术测定咖啡豆中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、木糖、甘露糖、果糖、核糖的分析方法。将样品粉碎后加入去离子水超声提取,经Carbopac^(TM)PA20(3*150mm)色谱柱分离,以EGC(自动淋洗液发生器)在线产生KOH为... 建立了离子色谱-质谱联用技术测定咖啡豆中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、木糖、甘露糖、果糖、核糖的分析方法。将样品粉碎后加入去离子水超声提取,经Carbopac^(TM)PA20(3*150mm)色谱柱分离,以EGC(自动淋洗液发生器)在线产生KOH为淋洗液,梯度淋洗,流速0.38mL/min,抑制器采用外加水模式,采用柱后补液法(Na^+源),串联质谱进行检测。结果表明,在一定的质量浓度范围内,上述单糖和小分子寡糖的色谱峰面积与质量浓度呈线性相关,线性相关系数(r)均大于0.999,样品的加标回收率均落在88.0~97.7%范围内,相对标准偏差均在2.36~3.70%之间(n=6)。该方法充分解决了含碳量不同的糖之间的假阳性问题,方法简便、快速、准确,可推广应用于咖啡豆中典型单糖和小分子寡糖的同时测定。 展开更多
关键词 离子色谱-质谱( IC-MS) 咖啡豆 单糖 寡糖
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