基于天然高分子的导电材料制备及其在柔性传感器件中的应用 被引量：8

1

作者 董点点 张静雯 +6 位作者 唐杰 王军 杨宽 马忠雷 张文博 陈咏梅 马建中 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第8期864-879,共16页

天然高分子材料具有来源广泛、化学成分多样、生物相容性和生物降解性良好等优势,是一类绿色可持续再生资源.近年来,基于天然高分子的绿色柔性传感器件研究受到了国内外学者的广泛关注,并取得了长足的进展.本文以天然高分子导电材料为主... 天然高分子材料具有来源广泛、化学成分多样、生物相容性和生物降解性良好等优势,是一类绿色可持续再生资源.近年来,基于天然高分子的绿色柔性传感器件研究受到了国内外学者的广泛关注,并取得了长足的进展.本文以天然高分子导电材料为主线,总结了基于天然高分子制备导电材料的模板法和掺杂法.模板法直接以天然高分子材料的天然骨架结构作为基质,而掺杂法以天然高分子材料处理后的产物或衍生物作为基质.归纳了基于天然高分子的柔性导电材料在湿度、温度、应变、气流/气体、光、生物传感器件中应用的研究进展,最后展望了基于天然高分子的柔性导电材料在设计和组装柔性传感器方面的前景,为高效发展绿色柔性电子和天然高分子材料的高值化利用提供新思路. 展开更多

关键词 天然高分子 导电材料 柔性传感器

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诱导胚胎干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的培养方法 被引量：1

2

作者 张格 朱涵 +3 位作者 张婧雯 徐雨迪 段铭煊 张戈 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期2079-2082,共4页

视网膜变性疾病导致视力下降,是视网膜色素上皮(RPE)细胞或感光细胞引起不可逆性损害或凋亡所造成的功能异常,从而导致的致盲性眼病,常引起视觉障碍甚至失明。人胚胎干细胞(hESCs)是一种能够多向分化的细胞。凭借适当的方法,hESCs可分... 视网膜变性疾病导致视力下降,是视网膜色素上皮(RPE)细胞或感光细胞引起不可逆性损害或凋亡所造成的功能异常,从而导致的致盲性眼病,常引起视觉障碍甚至失明。人胚胎干细胞(hESCs)是一种能够多向分化的细胞。凭借适当的方法,hESCs可分化为各种视网膜细胞。由于人体RPE细胞无法再生,研究表明运用干细胞源性RPE细胞移植治疗视网膜病变的临床治疗方法具有实用前景,且近年来已取得突破性进展。多因素的限制、方法的选择以及诱导条件的复杂等使诱导分化RPE的效率和移植后存活率存在较大差异且不稳定,所以现阶段研究重点在于如何综合不同培养方法,取其利去其弊,提高hESCs定向分化效率以及细胞数量与质量,降低培养污染以及免疫排斥反应等。本文将对目前存在多种培养方法进行举例归纳总结,针对不同角度作出综述。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 视网膜色素上皮细胞 视网膜变性疾病 诱导分化

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基于双重粒化准则的邻域多粒度粗集快速约简算法 被引量：10

3

作者 马福民 陈静雯 张腾飞 《控制与决策》 EI CSCD 北大核心 2017年第6期1121-1127,共7页

由于可以从多粒度、多层次的角度对名词型和数值型属性并存的混合数据进行有效处理,邻域多粒度粗糙集模型受到了广泛关注.为了有效降低属性约简计算过程中的迭代次数,实现邻域多粒度粗糙集模型的快速属性约简算法,基于双重粒化准则,深... 由于可以从多粒度、多层次的角度对名词型和数值型属性并存的混合数据进行有效处理,邻域多粒度粗糙集模型受到了广泛关注.为了有效降低属性约简计算过程中的迭代次数,实现邻域多粒度粗糙集模型的快速属性约简算法,基于双重粒化准则,深入分析不同属性子集序列和邻域半径对正域的影响,结合正域在属性子集和邻域半径共同作用下的单调性,提出一种基于双重粒化准则的邻域多粒度粗集快速约简算法,并通过理论分析与实例对比验证了算法的有效性和优越性. 展开更多

关键词 粗糙集 邻域关系 双重粒化准则 属性约简 快速算法

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生姜可溶性膳食纤维的酶法提取工艺中植物蛋白酶条件的确定 被引量：7

4

作者 宋荣珍 位思清 +3 位作者 孙靖雯 张晓珂 乔旭光 唐晓珍 《中国调味品》 北大核心 2017年第10期20-22,28,共4页

采用植物蛋白酶和糖化酶联合提取生姜中可溶性膳食纤维,固定糖化酶提取条件,探讨植物蛋白酶的工艺条件。在固定糖化酶加酶量1%,酶解温度60℃,酶解时间1h的条件下,确定了植物蛋白酶的优化条件为加酶量6%,酶解温度55℃,酶解时间5h,此条件... 采用植物蛋白酶和糖化酶联合提取生姜中可溶性膳食纤维,固定糖化酶提取条件,探讨植物蛋白酶的工艺条件。在固定糖化酶加酶量1%,酶解温度60℃,酶解时间1h的条件下,确定了植物蛋白酶的优化条件为加酶量6%,酶解温度55℃,酶解时间5h,此条件下生姜中可溶性膳食纤维提取率高达13.24%。 展开更多

关键词 生姜 可溶性膳食纤维 植物蛋白酶

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树鼩CD4蛋白多克隆抗体的制备及检测 被引量：1

5

作者 卢孔杰 徐婧雯 +7 位作者 张雪梅 吴忠香 任芳芳 马娜 巩蔚 严丽蔚 朱文兵 董少忠 《实验动物与比较医学》 CAS 2016年第4期243-249,共7页

目的 原核表达、纯化树鼩CD4蛋白并制备多克隆抗体,检测树鼩体内的CD4蛋白.方法 克隆树鼩CD4基因并连接到表达载体,构建重组质粒pET30a（＋）-CD4和pGEX-5X-1-CD4,表达并纯化重组蛋白His-CD4和GST-CD4,用不同佐剂[弗氏佐剂、MF59和A1（O... 目的 原核表达、纯化树鼩CD4蛋白并制备多克隆抗体,检测树鼩体内的CD4蛋白.方法 克隆树鼩CD4基因并连接到表达载体,构建重组质粒pET30a（＋）-CD4和pGEX-5X-1-CD4,表达并纯化重组蛋白His-CD4和GST-CD4,用不同佐剂[弗氏佐剂、MF59和A1（OH）3]制备多抗,用Western blot法检测血清抗体特异性.结果 蛋白表达产物His-CD4和GST-CD4的相对分子质量分别约为53.5×103和70.0×103,纯化后蛋白浓度分别为600 μg/mL和1 mg/mL;三组佐剂均能诱导产生抗体,抗体几何平均滴度（Geometric Mean Titer,GMT）的比较结果为：弗氏佐剂组（GMT：97 420）＞Al（OH）3佐剂组（GMT：67 202）＞MF59佐剂组（GMT：55 128）;其中弗氏佐剂组显著高于原蛋白组（P＜0.001）;Al（OH）3组显著高于原蛋白组（P＜0.01）;而MF59组显著高于原蛋白组（P＜0.05）.结论 制备了特异性良好的小鼠抗血清,能够特异性地结合树鼩的CD4蛋白.为下一步本实验室制备CD4单克隆抗体、CD4蛋白分子的功能研究以及树鼩的病毒感染模型等免疫相关实验的进行提供了基础. 展开更多

关键词 树鼩 CD4蛋白 表达 纯化 多克隆抗体

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叶酸对PCPA抑郁小鼠外侧缰核β-CaMKⅡ水平的影响

6

作者 高良才 刘鑫男 +3 位作者 李蔚然 边靖文 张燕 刘锦频 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1199-1203,共5页

为探究叶酸对PCPA抑郁症模型小鼠的干预作用及其对外侧缰核β-Ca MK II水平的影响,将昆明种小鼠40只随机分为三组:对照组、模型组、叶酸组,通过腹腔注射PCPA(100 mg/kg)每日1次,连续4 d构建抑郁症模型,旷场与悬尾实验观察小鼠行为变化,H... 为探究叶酸对PCPA抑郁症模型小鼠的干预作用及其对外侧缰核β-Ca MK II水平的影响,将昆明种小鼠40只随机分为三组:对照组、模型组、叶酸组,通过腹腔注射PCPA(100 mg/kg)每日1次,连续4 d构建抑郁症模型,旷场与悬尾实验观察小鼠行为变化,HPLC检测小鼠下丘脑5-HT含量,免疫组化测定小鼠外侧缰核β-Ca MK II表达水平。结果显示,模型组与对照组相比自主活动能力下降,悬尾不动时间延长(P<0.05),而叶酸组与对照组相比上述实验结果无统计学差异(P>0.05)。模型组与对照组相比下丘脑5-HT含量降低,外侧缰核β-Ca MK II表达水平下降(P<0.05)。结果表明叶酸能显著提高下丘脑5-HT含量与外侧缰核β-Ca MK II水平,其抗抑郁作用机制可能与之有关。 展开更多

关键词 叶酸 抑郁症 PCPA β-钙调蛋白激酶

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二陈汤加味对COPD大鼠转化生长因子-β_1,组蛋白去乙酰化酶2基因表达的影响 被引量：20

7

作者 陈四清 季书 +7 位作者 尚立芝 谢文英 张良芝 刘坦 张静 胡文豪 张淼 王祎 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期147-154,共8页

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及其受体(TGF-βRII)基因表达,外周血单个核细胞(PBMCs)中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因表达及活性的影响。方法:采用烟熏加脂多糖方法制备COPD大... 目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及其受体(TGF-βRII)基因表达,外周血单个核细胞(PBMCs)中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因表达及活性的影响。方法:采用烟熏加脂多糖方法制备COPD大鼠模型。随机分为正常组、模型组、二陈汤加味高、中、低剂量组(20,10,5 g·kg^(-1))。正常组、模型组灌胃生理盐水(10 g·kg^(-1)),二陈汤加味高、中、低剂量组分别灌胃,连续14 d。荧光酶联免疫法测定PBMCs中HDAC2活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织匀浆中TGF-β_1及PBMCs中HDAC2含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织匀浆中TGF-β_1mRNA及PBMCs中HDAC2 mRNA表达;免疫组化检测TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白在肺组织的原位表达,光镜观察组织结构。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织匀浆中TGF-β_1含量升高(P<0.05);肺组织中TGF-β_1mRNA,TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著增强(P<0.01);模型组大鼠PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均明显减低(P<0.05,P<0.01),差异均有统计学意义。与模型组比较,二陈汤加味高、中剂量组肺组织匀浆中TGF-β_1mRNA表达(P<0.01)和TGF-β_1蛋白含量均显著降低(P<0.05,P<0.01),免疫组化检测肺组织中TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著弱于模型组(P<0.01),PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均升高(P<0.05,P<0.01),肺组织结构明显改善。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能与增强PBMCs中HDAC2基因表达,提高HDAC2活性,抑制TGF-β_1及其受体基因的表达有关。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 肺功能 二陈汤加味 转化生长因子-β1(TGF-β1) 组蛋白去乙酰化酶2

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小儿发育性髋关节脱位术后的康复训练探讨 被引量：6

8

作者 张晶 李春文 张超 《中国伤残医学》 2017年第20期99-100,共2页

通过对小儿发育性髋关节脱位术后康复训练的研究,阐述康复训练的临床需求;患儿家庭护理知识的认知和需求;发育性髋关节脱位术后患儿早期康复的重要性;对发育性髋关节脱位的患儿给予护理干预;并在患儿出院后对家属给予康复训练的科学指... 通过对小儿发育性髋关节脱位术后康复训练的研究,阐述康复训练的临床需求;患儿家庭护理知识的认知和需求;发育性髋关节脱位术后患儿早期康复的重要性;对发育性髋关节脱位的患儿给予护理干预;并在患儿出院后对家属给予康复训练的科学指导和干预提供理论依据. 展开更多

关键词 发育性髋关节脱位 髋关节僵硬 康复训练

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克氏光唇鱼线粒体基因组测定及光唇鱼属的系统发育分析 被引量：5

9

作者 杨杨 宋小晶 +1 位作者 唐文乔 张亚 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期207-219,共13页

根据侧条光唇鱼(Acrossocheilus parallens)线粒体基因(mt DNA)序列设计引物,采用引物步移和PCR扩增产物测序,获得了克氏光唇鱼(A.kreyenbergii)的mt DNA全序列。结构分析表明,克氏光唇鱼mt DNA为首尾闭合的环状基因,全长16 596 bp,编... 根据侧条光唇鱼(Acrossocheilus parallens)线粒体基因(mt DNA)序列设计引物,采用引物步移和PCR扩增产物测序,获得了克氏光唇鱼(A.kreyenbergii)的mt DNA全序列。结构分析表明,克氏光唇鱼mt DNA为首尾闭合的环状基因,全长16 596 bp,编码37个基因,包括13个蛋白编码基因、22个t RNA基因、2个r RNA基因和两段非编码区(D-loop和轻链复制起点OL),碱基组成具有明显的A+T偏好和反G偏倚现象。13个蛋白编码基因中,除COⅠ的起始密码子是GTG,其余基因的起始密码子均为ATG;终止密码子包括完全的终止密码子TAA(38.46%)和TAG(7.69%),不完全的终止密码子TA(15.38%)和T(38.46%)。在D-loop区的811~837 bp区间发现了一段"TA"短串联重复序列。从蛋白编码基因所包含的信息量、变异位点和变异率看,ND5、ND4、COⅠ和ND2最适合作为光唇鱼属种间系统发育分析的分子标记。采用贝叶斯法利用13个蛋白编码基因所构建的系统发育树显示,光唇鱼属和白甲鱼属(Onychostoma)的24种鱼类各自没有聚为单系群,相互间不能明确区分。 展开更多

关键词 克氏光唇鱼 线粒体基因组 系统发育 光唇鱼属

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急性ST段抬高心肌梗死合并亚临床甲状腺功能减退症患者的临床特点与转归分析 被引量：3

10

作者 刘映川 陶靖隆 +1 位作者 舒雯 张梅 《武警后勤学院学报（医学版）》 CAS 2017年第6期479-484,共6页

【目的】本研究通过观察急性ST段抬高心肌梗死合并亚临床甲状腺功能减退症患者的临床特点及转归,探究亚临床甲状腺功能减退症与急性心肌梗死间的关系。【方法】419例行急诊经皮冠状动脉介入治疗的患者依据诊断及排除标准筛分为亚临床甲... 【目的】本研究通过观察急性ST段抬高心肌梗死合并亚临床甲状腺功能减退症患者的临床特点及转归,探究亚临床甲状腺功能减退症与急性心肌梗死间的关系。【方法】419例行急诊经皮冠状动脉介入治疗的患者依据诊断及排除标准筛分为亚临床甲状腺功能减退症组和甲状腺功能正常组。对研究对象的一般情况、生化检查、冠状动脉病变评价、心脏超声及住院期间临床转归资料进行统计学分析。【结果】亚临床甲状腺功能减退症组患者与甲状腺功能正常组患者相比较,白细胞计数(P=0.018)、中性粒细胞计数(P=0.030)及百分比(P=0.003)、血小板分布宽度(P=0.003)、低密度脂蛋白胆固醇(P=0.020)、尿酸(P=0.008)、血肌酐(P=0.038)水平升高;血红蛋白(P=0.023)和游离甲状腺素(P<0.001)水平降低;左室射血分数水平明显降低(P=0.026);发生严重心律失常,尤其是心房颤动(P<0.001)和心力衰竭(P<0.001)的比例明显增高;多因素Logistic回归分析,年龄(OR=1.036,95%CI:1.009~1.065,P=0.010)、高血压(OR=2.251,95%CI:1.295~3.914,P=0.004)和促甲状腺素(OR=1.066,95%CI:1.012~1.123,P=0.016)是院内发生心肌梗死并发症的独立危险因素,而高密度脂蛋白胆固醇(OR=0.273,95%CI:0.101~0.736,P=0.010)是其保护性因素。【结论】亚临床甲减可能通过影响脂质代谢、炎症反应、左室射血分数和临床转归,与急性ST段抬高心肌梗死的发生发展具有相关性。 展开更多

关键词 急性ST段抬高心肌梗死 亚临床甲状腺功能减退症 冠状动脉病变 GENSINI评分

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UPLC-MS/MS法用于瑞格列奈磷脂复合物-固体分散体大鼠体内药动学的研究 被引量：3

11

作者 王雁凌 刘晓杰 +3 位作者 吴蕾 孙静 宋诗文 张鹏 《沈阳药科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第7期575-580,622,共7页

目的研究自制制剂瑞格列奈磷脂复合物-固体分散体大鼠体内药动学及其生物利用度。方法建立UPLC-MS/MS方法用于大鼠血浆中瑞格列奈质量浓度的测定,并采用正己烷-乙醚(体积比为1∶4)的液-液萃取法,以格列齐特为内标物质,提取大鼠血浆中目... 目的研究自制制剂瑞格列奈磷脂复合物-固体分散体大鼠体内药动学及其生物利用度。方法建立UPLC-MS/MS方法用于大鼠血浆中瑞格列奈质量浓度的测定,并采用正己烷-乙醚(体积比为1∶4)的液-液萃取法,以格列齐特为内标物质,提取大鼠血浆中目标成分。测定12只大鼠口服灌胃0.32 mg·kg^(-1)参比制剂与受试制剂后不同时间点血浆中瑞格列奈的质量浓度,采用DAS2.1.1药动学软件计算药动学参数。色谱条件:色谱柱Phenomenex C_(18)(50 mm×2.1 mm,2.6μm),以乙腈-体积分数为0.05%的甲酸溶液-体积分数为0.1%的乙酸溶液为流动相,流速:0.2 mL·min^(-1),柱温:35℃,梯度洗脱。结果血浆中瑞格列奈质量浓度在0.25~200μg·L^(-1)内线性关系良好,定量下限为0.25μg·L^(-1);低、中、高3个质量浓度质控样品的日内和日间精密度均小于15%,准确度分别为93.33%、95.39%和91.38%;提取回收率分别为81.6%、90.6%和72.2%;基质效应的变异系数分别为3.13%、2.16%和2.24%,均小于15%。受试制剂瑞格列奈磷脂复合物-固体分散体的主要药动学参数:t_(1/2)为(2.58±1.64)h、t^(max)为(0.71±0.10)h、ρ^(max)为(90.03±44.59)μg·L^(-1)、AUC_(0-t)为(264.92±105.04)μg·h·L^(-1)、AUC_(0-∞)为(270.82±106.84)μg·h·L^(-1),受试制剂的相对生物利用度是参比制剂(瑞格列奈市售片)的2.3倍。结论本法适用于自制制剂大鼠血浆中瑞格列奈的浓度测定。与市售片相比,口服自制瑞格列奈磷脂复合物-固体分散体的生物利用度显著提高。 展开更多

关键词 瑞格列奈 磷脂复合物 固体分散体 药动学 生物利用度 超高效液相色谱-串联质谱

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2011年-2015年大庆地区解脲脲原体和人型支原体耐药性分析 被引量：2

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作者 付宝庆 刘青华 +3 位作者 杜静 王金文 张颖 周晓明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第22期3332-3334,共3页

目的了解2011年-2015年大庆地区泌尿生殖道感染患者解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染状况及耐药性变迁。方法采用支原体鉴定试剂盒,对6 851例疑似泌尿生殖道感染标本进行耐药性检测。结果在6 851例标本中,支原体培养阳性3 559例,检... 目的了解2011年-2015年大庆地区泌尿生殖道感染患者解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染状况及耐药性变迁。方法采用支原体鉴定试剂盒,对6 851例疑似泌尿生殖道感染标本进行耐药性检测。结果在6 851例标本中,支原体培养阳性3 559例,检出率为51.9%(3 559/6 851)。Uu、Mh及Uu合并Mh感染的阳性率分别为36.9%(2 531/6 851)、2.0%(137/6 851)和13.0%(891/6 851)。Uu合并Mh感染的检出率从2011年的28.8%降低到2015年的4.2%;Uu单独感染的检出率从2011年的33.1%升高到2015年的37.3%;Mh单独感染的检出率一直较低。结论在本地区支原体导致的泌尿生殖道感染主要由Uu引起。临床治疗推荐使用美满霉素、强力霉素、交沙霉素。 展开更多

关键词 解脲脲原体 人型支原体 抗菌药物 耐药性

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从分散系状态观察硫化物水样固定效果的分析

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作者 王璟 许文来 +2 位作者 张凡 唐敏 简悦 《科学技术与工程》 北大核心 2017年第2期297-300,共4页

硫化物是水体污染的一项重要指标,也是环境监测和工厂验收的一个重要参数。因为硫化物本身性质,特别是硫化氢的易挥发性,常常造成检测分析结果数据因处理方法的差异有各种程度的偏离实际值,或大或小,影响正常判断以及措施的实施。所以,... 硫化物是水体污染的一项重要指标,也是环境监测和工厂验收的一个重要参数。因为硫化物本身性质,特别是硫化氢的易挥发性,常常造成检测分析结果数据因处理方法的差异有各种程度的偏离实际值,或大或小,影响正常判断以及措施的实施。所以,水样中硫化物的固定至关重要。通过几种固定方法的对比实验,采用亚甲蓝分光光度法对待测水样进行测定,从处理后水样呈现的分散系状态以及离子反应沉淀状态发现,加入固定剂的药品和顺序不同,沉淀呈现出的物理性态随天数放置各不相同,影响测量结果,对比之后可优选出较好的水样固定保存方法。 展开更多

关键词 硫化物 固定 损耗率 沉淀

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环境噪声的建筑门窗隔声研究 被引量：1

14

作者 杜静盛 何雯艳 +2 位作者 张文娟 杜靖宇 林龙 《能源环境保护》 2017年第3期20-22,8,共4页

针对建筑门窗环境噪声的隔音问题,根据声波在门窗材料中的传播机理,利用传递矩阵法和边界条件建立了声波在层状材料的声透射系数数学模型,研究了环境噪声垂直入射在层状门窗材料中的声传播特性。以单层门窗材料为研究对象,研究了到当单... 针对建筑门窗环境噪声的隔音问题,根据声波在门窗材料中的传播机理,利用传递矩阵法和边界条件建立了声波在层状材料的声透射系数数学模型,研究了环境噪声垂直入射在层状门窗材料中的声传播特性。以单层门窗材料为研究对象,研究了到当单层门窗厚度为半波长的整数倍时,此时环境噪声门窗隔声效果最差;当声波频厚积为门窗材料声速与厚度乘积一半的整数倍时,此时环境噪声门窗隔声效果最差。 展开更多

关键词 环境噪声 波动方程 透射系数 频厚积

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抗巨细胞病毒早晚期抗原单克隆抗体制备及在病毒培养物鉴定中的初步应用

15

作者 崔京涛 闫文娟 +4 位作者 张伟红 王巧凤 许少侠 谢宏杰 倪安平 《国际病毒学杂志》 2017年第1期13-17,共5页

目的制备抗CMV早晚期抗原单克隆抗体并在病毒培养物鉴定中初步应用。方法CMV感染MRC-5细胞24h、48h和72h后甲醛灭活的可溶性抗原免疫BALB／e小鼠，小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1进行融合。酶免法筛查阳性杂交瘤并有限性稀释法进行克隆。... 目的制备抗CMV早晚期抗原单克隆抗体并在病毒培养物鉴定中初步应用。方法CMV感染MRC-5细胞24h、48h和72h后甲醛灭活的可溶性抗原免疫BALB／e小鼠，小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1进行融合。酶免法筛查阳性杂交瘤并有限性稀释法进行克隆。免疫荧光及印迹对筛选后的克隆进行鉴定，最终获得的杂交瘤制备腹水并使用ProteinG进行纯化。纯化后单抗应用于CAP室间质评标本以及临床标本CMV培养物的鉴定。结果3只小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合后初步筛查出约110株阳性克隆。剔除与其它抗原有交叉反应、抗体效价低、非全覆盖早晚期抗原的克隆最终获得抗CMV单抗杂交瘤1株，即2385-1。免疫荧光显示2385-1株单抗与CklV感染后3h-120h的MRC-5细胞均反应，即覆盖即刻、早期和晚期抗原。免疫印迹试验显示2385-1株单抗与CMV抗原25KD-50KD之间的5个蛋白条带结合。2385-1株单抗免疫球蛋白亚型为IgGl。ProteinG纯化腹水后的单抗效价≥1：12800。纯化单抗染色鉴定6份室间质评及10份临床标本CMV培养物全部符合。结论初步应用显示制备的抗CMV早晚期抗原单克隆抗体性能良好。 展开更多

关键词 巨细胞病毒 单克隆抗体 即刻抗原 早期抗原 晚期抗原

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