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犬瘟热病毒CDV-3株感染性克隆的构建与鉴定
1
作者 卜研 闫喜军 +3 位作者 赵建军 李海涛 赵传芳 薛向红 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期178-186,共9页
以国内商品化水貂犬瘟热病毒疫苗所用毒株CDV-3为模板,构建犬瘟热病毒感染性c DNA克隆,为犬瘟热病毒新型疫苗研制、致病机理研究提供理论基础。设计13对引物对其全基因组序列测定,分析单一酶切位点,将CDV-3的全长分5个片段进行RT-PCR扩... 以国内商品化水貂犬瘟热病毒疫苗所用毒株CDV-3为模板,构建犬瘟热病毒感染性c DNA克隆,为犬瘟热病毒新型疫苗研制、致病机理研究提供理论基础。设计13对引物对其全基因组序列测定,分析单一酶切位点,将CDV-3的全长分5个片段进行RT-PCR扩增。经酶切拼接,将5个片段顺次插入到酶切位点改造后的真核载体pc DNA3.2的多克隆酶切位点处,同时在F1首端和F5末端分别加入锤头状核酶和丁型肝炎核酶序列,获得CDV-3株的全长c DNA质粒(pcDNA3.2-CDV-3)。构建表达CDV-3 N、P、L蛋白的3个辅助质粒。利用转染试剂LipofectamineTM 2000将全长质粒和3个辅助质粒共转染293T细胞,3 d后,将上清接种到Vero细胞。观察犬瘟热病毒典型合胞体病变,对重组病毒进行免疫荧光鉴定和标签鉴定。最后,比较wtCDV-3和rCDV-3的生长特性。全长质粒和辅助质粒的酶切鉴定和序列测序均正确。拯救的重组病毒能在Vero细胞上形成典型的合胞体病变,经RT-PCR、间接免疫荧光和电镜观察鉴定,证明成功拯救出重组病毒rCDV-3株。rCDV-3的病毒滴度最高达到107.667 TCID50/mL,比wtCDV-3的滴度106.667 TCID50/mL高出约10倍。rCDV-3感染Vero细胞后,迅速大量增殖,于感染后36 h达到最高病毒滴度。而wt CDV-3增殖平缓,感染后72 h时病毒含量达到最大。文中建立的高效CDV-3株反向遗传操作平台,为犬瘟热病毒新型疫苗研制和致病机理研究奠定基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 CDV-3株 感染性克隆 反向遗传系统
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高分子改性黄原胶/羟基磷灰石复合水凝胶的制备及其吸附金属离子性能 被引量：12
2
作者 殷晓春 吴建军 +5 位作者 赵翊 林雪 裴凌云 李金娟 刘晓霞 靳丽梅 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期633-641,共9页
以黄原胶为接枝骨架,丙烯酸为单体,羟基磷灰石为无机组分,通过氧化还原聚合反应,制备了高分子改性黄原胶/羟基磷灰石复合水凝胶(XG-g-PAA/HAP).红外光谱和扫描电镜表征发现,在低温条件下(50℃)成功制备了XG-g-PAA/HAP.将XG-g-PAA/HAP用... 以黄原胶为接枝骨架,丙烯酸为单体,羟基磷灰石为无机组分,通过氧化还原聚合反应,制备了高分子改性黄原胶/羟基磷灰石复合水凝胶(XG-g-PAA/HAP).红外光谱和扫描电镜表征发现,在低温条件下(50℃)成功制备了XG-g-PAA/HAP.将XG-g-PAA/HAP用作水体重金属离子吸附剂,结果表明:当pH<1时,XG-g-PAA/HAP吸附容量较小,随着pH增大,吸附容量快速增大,当pH>4时,吸附容量达到平衡;90%以上的金属离子在30 min内可被清除.当[Cu^(2+)]=300 mg·L^(-1)和[Pb^(2+)]=600 mg·L^(-1)时,XG-g-PAA/HAP吸附容量达到最大值.重复吸附-脱吸附5次后,吸附容量仍可保持初始的80%,所制备的XG-g-PAA/HAP有望成为一种有效的水体重金属离子吸附剂. 展开更多
关键词 黄原胶 丙烯酸 羟基磷灰石 重金属吸附 水凝胶吸附剂
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两种钻杆耐磨带摩擦磨损性能试验对比分析 被引量：2
3
作者 付太森 王建军 +3 位作者 胡俊 赵永安 徐欣 宋延鹏 《石油矿场机械》 2016年第12期37-39,共3页
钻井过程中防止套管磨损的主要措施是采用钻杆耐磨带。通过室内模拟试验评价方法,对ARM耐磨带、X型耐磨带以及钻杆接头本体材料与Q125套管组成摩擦副,在钻井液介质中进行了摩擦磨损性能评价。试验结果表明,试验评价方法可行;且ARM耐磨... 钻井过程中防止套管磨损的主要措施是采用钻杆耐磨带。通过室内模拟试验评价方法,对ARM耐磨带、X型耐磨带以及钻杆接头本体材料与Q125套管组成摩擦副,在钻井液介质中进行了摩擦磨损性能评价。试验结果表明,试验评价方法可行;且ARM耐磨带具有较好的耐磨性。 展开更多
关键词 钻杆 耐磨带 套管 磨损 试验
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小剂量乙酰半胱氨酸治疗慢性肝损伤作用及其机制 被引量：2
4
作者 蔡兆斌 庄让笑 +4 位作者 潘旭旺 席建军 史婷婷 赵艳梅 刘寿荣 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2016年第10期1251-1255,共5页
目的研究小剂量乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对CCl4所致慢性肝损伤的疗效及其作用机制。方法将大鼠分为正常对照组、模型组、小剂量NAC低、中、高剂量组和阳性对照组。小剂量NAC低、中、高剂量组分别给予45,90,180 mg·kg?1... 目的研究小剂量乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对CCl4所致慢性肝损伤的疗效及其作用机制。方法将大鼠分为正常对照组、模型组、小剂量NAC低、中、高剂量组和阳性对照组。小剂量NAC低、中、高剂量组分别给予45,90,180 mg·kg?1,阳性对照组给予阿拓莫兰54 mg·kg?1,正常对照组和模型组腹腔注射等容积灭菌生理盐水。采用CCl4复制大鼠慢性肝损伤模型,末次给药后24 h麻醉大鼠,腹主动脉取血,检测血清ALT、AST含量以及肝组织中SOD、MDA、GSH和Hyp含量,观察肝脏组织病理学变化,免疫组化检测肝组织Nrf2、HO-1的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、MDA和Hyp含量明显升高(P<0.01),SOD、GSH虽有下降趋势,但结果无统计学差异,Nrf2、HO-1蛋白表达均增加,但差异无统计学意义。与模型组比较,小剂量NAC低、中、高剂量组ALT、AST水平明显降低(P<0.01),低、中剂量组SOD、GSH、Hyp含量差异均有显著性(P<0.01或P<0.05),高剂量组GSH、Hyp含量差异均有显著性(P<0.01或P<0.05),各剂量组MDA均有下降趋势,但无统计学意义,低、中、高剂量组Nrf2、HO-1蛋白表达均增加,其中低剂量组差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论小剂量乙酰半胱氨酸对CCl4诱导大鼠慢性肝损伤具有较好的治疗作用,其作用机制可能通过Nrf2/HO-1通路发挥抗氧化应激作用。 展开更多
关键词 小剂量乙酰半胱氨酸 CCL4 慢性肝损伤 核因子NF-E2相关因子/血红素氧化酶通路 机制
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储气库井注采管柱流体运移规律研究 被引量：1
5
作者 杨尚谕 付太森 +3 位作者 王建军 池明 赵永安 宋延鹏 《石油管材与仪器》 2017年第2期62-66,72,共6页
针对储气库井油管弯曲段气蚀严重的问题,利用k-ε湍流模型,通过理想气体状态方程确定了油管内天然气流动的初始条件和边界条件,基于有限元方法,研究了不同注气速度、弯曲角度等对油管任意截面位置处静压、波动压力、速度场分布的影响规... 针对储气库井油管弯曲段气蚀严重的问题,利用k-ε湍流模型,通过理想气体状态方程确定了油管内天然气流动的初始条件和边界条件,基于有限元方法,研究了不同注气速度、弯曲角度等对油管任意截面位置处静压、波动压力、速度场分布的影响规律。结果表明:储气库油管内压力波动大小与注采气密度、速度等相关,且与注采气速度平方成正比;在油管弯曲段由于能量的急剧转化导致油管内压力出现波动,而垂直段和水平段内压力变化较为平缓,弯曲段油管B点压力波动程度较A点明显降低,而该截面静压分布则刚好相反,且油管内压与注气速率之间呈现非线性关系。 展开更多
关键词 储气库 流动压力 注气速度 k-ε湍流模型
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四川省宜宾市民营企业“品牌创建”现状调查研究
6
作者 黄建军 《中国商论》 2021年第20期56-58,共3页
当前中小民营企业存在着严重的“流星现象”,民营企业品牌问题是很重要的原因。民营企业要想长盛不衰,就一定要重视企业的“品牌建设”和正确的实施“品牌创建”战略。本文以推动区域民营经济发展为目的,对四川省宜宾市叙州区域范围内70... 当前中小民营企业存在着严重的“流星现象”,民营企业品牌问题是很重要的原因。民营企业要想长盛不衰,就一定要重视企业的“品牌建设”和正确的实施“品牌创建”战略。本文以推动区域民营经济发展为目的,对四川省宜宾市叙州区域范围内70%的民营企业进行实地调研,并采用定性和定量相结合的分析方法,分析探讨叙州区民营企业的“品牌创建”问题。 展开更多
关键词 叙州区 民营企业 品牌创建 调研 定性 定量
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Apelin和血管紧张素受体AT1相关受体蛋白在胃癌中表达及其临床意义
7
作者 张慧 李建军 +3 位作者 李雷 赵丽华 王爱亮 冯其贞 《中华诊断学电子杂志》 2017年第3期196-199,共4页
目的探讨胃癌组织中apelin和血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(APJ)的表达及其临床意义。方法标本来源于2015年1月至12月济宁医学院附属医院胃肠外科收治的123例胃癌患者,自医院病理科调取上述患者的癌组织及正常黏膜组织的蜡块,采用SP免... 目的探讨胃癌组织中apelin和血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(APJ)的表达及其临床意义。方法标本来源于2015年1月至12月济宁医学院附属医院胃肠外科收治的123例胃癌患者,自医院病理科调取上述患者的癌组织及正常黏膜组织的蜡块,采用SP免疫组织化学染色法对标本中apelin、APJ的表达水平并进行了半定量分析,通过计算CD34标记的微血管评价"热点"血管密度(hMVD)。结果 Apelin和APJ在正常胃黏膜的腺细胞均呈阳性表达、但是在上皮层未见有表达;apelin主要表达于胃癌细胞的细胞质和细胞核,但未见APJ在胃癌细胞中的表达;CD34在肿瘤组织中微血管计数明显高于正常胃粘膜;Apelin的表达水平在不同的胃癌患者年龄、性别和TNM分期之间的差异无统计学意义,肿瘤的分化程度(3.16±2.10,3.55±2.01,4.36±2.18;F=20.56,P<0.05)和微"热点"血管密度(3.35±2.14,4.23±2.05;z=12.37,P<0.05)差异有统计学意义。结论Apelin蛋白参与了胃癌的发生发展,其表达水平与肿瘤分化程度、hMVD有关,在低分化、高hMVD的肿瘤组织中呈现较高表达水平。 展开更多
关键词 APELIN 血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白 抗原 CD34 胃肿瘤
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