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基因编辑猪在生物医学研究中的应用 被引量：8
1
作者 黄耀强 李国玲 +1 位作者 杨化强 吴珍芳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期632-646,共15页
基因组编辑技术能够精确靶向修饰生物体基因组特定位点、人为改造生物遗传信息。自21世纪初,基因组编辑技术得到迅猛发展,锌指核酸酶(zinc finger nucleases,ZFN)、转录激活样受体因子(transcriptionactivating-like receptor factor,TA... 基因组编辑技术能够精确靶向修饰生物体基因组特定位点、人为改造生物遗传信息。自21世纪初,基因组编辑技术得到迅猛发展,锌指核酸酶(zinc finger nucleases,ZFN)、转录激活样受体因子(transcriptionactivating-like receptor factor,TALEN)和成簇的规律间隔短回文重复序列及其相关系统(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas endonucleases,CRISPR/Cas)3种新型基因组编辑系统先后诞生。基因组编辑技术能对生物体内源基因进行精确靶向修饰,被广泛应用于生物医学研究领域。猪与人类亲缘关系接近,在生理特征与病理病程等诸多方面与人类具有相似性,是人类疾病动物模型与异种器官移植研究的重要对象。本文主要介绍了ZFN、TALEN和CRISPR/Cas9 3种基因组编辑技术的发展概况与作用机理,综述了基因编辑猪在人类疾病模型、器官移植与人源化器官培育等生物医学领域里的最新研究进展,并对基因编辑猪的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 基因编辑技术 基因编辑猪 人类疾病模型 异种器官移植
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CRISPR/Cas13系统敲减HEK293T细胞ku70和lig4基因表达 被引量：1
2
作者 王豪强 李国玲 +7 位作者 黄广燕 李紫聪 郑恩琴 徐铮 杨化强 吴珍芳 张献伟 刘德武 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1414-1421,共8页
成簇的规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)系统是目前基因编辑、基因表达研究的热点,其中靶向RNA的CRISPR/Cas13系统的开发... 成簇的规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)系统是目前基因编辑、基因表达研究的热点,其中靶向RNA的CRISPR/Cas13系统的开发为RNA的干扰和编辑提供了新的方向。文中针对HEK293T细胞非同源末端连接(Nonhomologousendjoining,NHEJ)通路修复关键因子Ku70和Lig4的编码序列,设计并合成CRISPR/Cas13a、b系统相应的gRNA,检测其对ku70和lig4基因表达的影响。结果显示,Cas13a对ku70和lig4的RNA敲减效果可以达到50%以上,Cas13b对ku70和lig4的RNA敲减效果分别达到92%和76%;同时Cas13a、b系统能将Ku70和Lig4蛋白水平分别下调至68%和53%。CRISPR/Cas13系统可有效敲减HEK293T细胞RNA和蛋白质表达,为基因功能和调控研究提供一种新的策略。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas13 KU70 lig4 基因敲减
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前列地尔对急性冠状动脉综合征患者肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶-9的影响 被引量：6
3
作者 谢华强 杨勇 +3 位作者 陈平英 罗涛 马乐乐 曹政 《心肺血管病杂志》 2017年第8期621-623,共3页
目的:探讨前列地尔对急性冠状动脉综合征(ACS)患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法:选取2014年6月至2015年12月,我院诊断为ACS患者,共278例,其中不稳定型心绞痛(UAP)128例,ST段抬高型心肌梗死(STEMI)54例... 目的:探讨前列地尔对急性冠状动脉综合征(ACS)患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法:选取2014年6月至2015年12月,我院诊断为ACS患者,共278例,其中不稳定型心绞痛(UAP)128例,ST段抬高型心肌梗死(STEMI)54例,非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)96例,随机分为常规治疗组(A组)和前列地尔+常规治疗组(B组),分别检测TNF-α、MMP-9,比较治疗1周后,两组炎症因子TNF-α、MMP-9的变化。结果:(1)治疗1周,两组TNF-α、MMP-9水平较治疗前均有所下降,其中,A组MMP-9下降水平差异有统计学意义(P<0.05),B组两者平均下降水差异有统计学意义(P<0.05);(2)与常规治疗组比较,前列地尔+常规治疗组TNF-α、MMP-9下降幅度更大,两组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:前列地尔可以有效降低ACS患者体内炎症因子TNF-α、MMP-9的水平。 展开更多
关键词 前列地尔 肿瘤坏死因子-Α 基质金属蛋白酶-9 急性冠状动脉综合征
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大动物精原干细胞研究进展 被引量：4
4
作者 赵鑫 杨化强 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期686-702,共17页
精原干细胞是存在于雄性动物睾丸内曲细精管基底膜上的生殖系干细胞。精原干细胞一方面通过自我更新来维持其在整个生命周期中自身群体的数量稳定,另一方面可以在精子发生过程中不断地分化成为各个阶段的生殖细胞并最终形成精子,从而将... 精原干细胞是存在于雄性动物睾丸内曲细精管基底膜上的生殖系干细胞。精原干细胞一方面通过自我更新来维持其在整个生命周期中自身群体的数量稳定,另一方面可以在精子发生过程中不断地分化成为各个阶段的生殖细胞并最终形成精子,从而将亲代携带的遗传信息传递给子代。目前在体外条件下可以进行精原干细胞的长期培养,并将其诱导分化为各级生精细胞。虽然对啮齿类动物精原干细胞的研究较为成熟,但是对大动物精原干细胞的研究进展较为缓慢。大动物精原干细胞的研究对了解人类相关生理机制和疾病至关重要,并且猪、牛和羊等农业动物的精原干细胞的研究为优良种畜扩繁和制备具有重要经济价值的基因修饰家畜提供新的手段。本文在介绍精原干细胞的特征基础上,重点综述了大动物精原干细胞的研究进展,探讨了目前研究中面临的主要问题和其未来应用前景,以期为动物新型替代繁殖技术、转基因动物制备、治疗雄性不育以及服务于再生医学提供新思路、新方法。 展开更多
关键词 精原干细胞 大动物 细胞移植 精子发生
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