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利用CRISPR/Cas9系统建立斑马鱼Morn3基因敲除模型
被引量：
1
1
作者
曾婧
刘晗
+4 位作者
李为
hept
megan
Lister
James
A
张玲
张志兵
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1449-1452,共4页
目的:采用高效基因编辑系统CRISPR/Cas9对斑马鱼的Morn3基因进行编辑,以期建立Morn3基因敲除斑马鱼模型。方法:针对斑马鱼Morn3基因用生物信息学选取靶位点,构建gRNA表达载体并体外转录,将gRNA和Cas9mRNA混合物显微注射到斑马鱼单细胞...
目的:采用高效基因编辑系统CRISPR/Cas9对斑马鱼的Morn3基因进行编辑,以期建立Morn3基因敲除斑马鱼模型。方法:针对斑马鱼Morn3基因用生物信息学选取靶位点,构建gRNA表达载体并体外转录,将gRNA和Cas9mRNA混合物显微注射到斑马鱼单细胞期的受精卵中,24~48 h提取基因组DNA,PCR扩增出目的片段,限制性酶切法初步检测基因打靶情况,最后进行测序分析确定编辑效果。结果:取3个靶位点(M1、M2、M3)进行试验,选择gRNA浓度较高的M2和M3进行注射。限制性酶切及测序的结果显示M3已产生基因编辑效应。结论:本研究通过CRISPR/Cas9系统成功获得Morn3基因编辑的突变体,为进一步探讨Morn3基因的作用提供研究基础。
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关键词
CRISPR/Cas9
Morn3
斑马鱼
基因编辑
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职称材料
题名
利用CRISPR/Cas9系统建立斑马鱼Morn3基因敲除模型
被引量：
1
1
作者
曾婧
刘晗
李为
hept
megan
Lister
James
A
张玲
张志兵
机构
武汉科技大学医学院公共卫生学院"职业危害识别与控制"湖北省重点实验室
Department of Obstetrics & Gynecology
Departments of Human & Molecular Genetics
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1449-1452,共4页
基金
国家自然科学基金面上资助项目(编号:81671514
81571428
+1 种基金
81300536)
湖北省卫计委资助项目(编号:WJ2015Q026)
文摘
目的:采用高效基因编辑系统CRISPR/Cas9对斑马鱼的Morn3基因进行编辑,以期建立Morn3基因敲除斑马鱼模型。方法:针对斑马鱼Morn3基因用生物信息学选取靶位点,构建gRNA表达载体并体外转录,将gRNA和Cas9mRNA混合物显微注射到斑马鱼单细胞期的受精卵中,24~48 h提取基因组DNA,PCR扩增出目的片段,限制性酶切法初步检测基因打靶情况,最后进行测序分析确定编辑效果。结果:取3个靶位点(M1、M2、M3)进行试验,选择gRNA浓度较高的M2和M3进行注射。限制性酶切及测序的结果显示M3已产生基因编辑效应。结论:本研究通过CRISPR/Cas9系统成功获得Morn3基因编辑的突变体,为进一步探讨Morn3基因的作用提供研究基础。
关键词
CRISPR/Cas9
Morn3
斑马鱼
基因编辑
Keywords
CRISPR/Cas9
Morn3
zebrafish
gene editing
分类号
R698.2 [医药卫生—泌尿科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用CRISPR/Cas9系统建立斑马鱼Morn3基因敲除模型
曾婧
刘晗
李为
hept
megan
Lister
James
A
张玲
张志兵
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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