目的探讨脑缺血再灌注后神经元突触后膜NMDA受体发生迁移重塑的机制。方法实验使用脑缺血再灌注Wistar大鼠模型,分为无缺血再灌注对照组(Ctrl),缺血再灌注0.5h组(I/R-0.5h),缺血再灌注4h组(I/R-4h),缺血再灌注24h组(I/R-24h)。再灌注时...目的探讨脑缺血再灌注后神经元突触后膜NMDA受体发生迁移重塑的机制。方法实验使用脑缺血再灌注Wistar大鼠模型,分为无缺血再灌注对照组(Ctrl),缺血再灌注0.5h组(I/R-0.5h),缺血再灌注4h组(I/R-4h),缺血再灌注24h组(I/R-24h)。再灌注时间达到后将脑组织取出,并制成脑组织匀浆液(HOM),利用差速离心法分离突触后膜组分(SYN)和突触外膜组分(EXTRA),通过Western Blot分析Src蛋白激酶的表达分布及NMDA受体NR2A和NR2B的表达分布。结果 Western Blot分析发现,脑缺血再灌注0.5h后,突触后膜组分Src蛋白激酶出现超激活状态(P<0.01),NR2A和NR2B在突触外膜组分中的表达显著降低(P<0.01),而NR2A和NR2B在突触后膜组分中的表达升高(P<0.05);在再灌注4h后,Src蛋白激酶激活程度更加明显(P<0.01),NR2A和NR2B在突触外膜组分中的表达仍显著下降(P<0.05),但NR2A和NR2B在突触后膜组分中却出现不同程度的下降。结论脑缺血再灌注后神经元突触后膜出现Src蛋白激酶超激活状态,并介导NMDA受体NR2A和NR2B的表达分布出现重塑性,NMDA受体从突触周膜向突触后膜转移聚集。展开更多
文摘目的探讨脑缺血再灌注后神经元突触后膜NMDA受体发生迁移重塑的机制。方法实验使用脑缺血再灌注Wistar大鼠模型,分为无缺血再灌注对照组(Ctrl),缺血再灌注0.5h组(I/R-0.5h),缺血再灌注4h组(I/R-4h),缺血再灌注24h组(I/R-24h)。再灌注时间达到后将脑组织取出,并制成脑组织匀浆液(HOM),利用差速离心法分离突触后膜组分(SYN)和突触外膜组分(EXTRA),通过Western Blot分析Src蛋白激酶的表达分布及NMDA受体NR2A和NR2B的表达分布。结果 Western Blot分析发现,脑缺血再灌注0.5h后,突触后膜组分Src蛋白激酶出现超激活状态(P<0.01),NR2A和NR2B在突触外膜组分中的表达显著降低(P<0.01),而NR2A和NR2B在突触后膜组分中的表达升高(P<0.05);在再灌注4h后,Src蛋白激酶激活程度更加明显(P<0.01),NR2A和NR2B在突触外膜组分中的表达仍显著下降(P<0.05),但NR2A和NR2B在突触后膜组分中却出现不同程度的下降。结论脑缺血再灌注后神经元突触后膜出现Src蛋白激酶超激活状态,并介导NMDA受体NR2A和NR2B的表达分布出现重塑性,NMDA受体从突触周膜向突触后膜转移聚集。
