目的:探讨温下方对巨噬细胞极化调控机制及M2型巨噬细胞(M2-TAMs)对A549细胞侵袭转移的影响。方法:动物实验:BALB/c裸鼠随机分为模型组和温下方组,灌胃干预。活体成像分析光子强度;观察肺部病理变化;识别CD68/CD163双标M2-TAMs。细胞实...目的:探讨温下方对巨噬细胞极化调控机制及M2型巨噬细胞(M2-TAMs)对A549细胞侵袭转移的影响。方法:动物实验:BALB/c裸鼠随机分为模型组和温下方组,灌胃干预。活体成像分析光子强度;观察肺部病理变化;识别CD68/CD163双标M2-TAMs。细胞实验:佛波酯(PMA)及白介素-4(IL-4)诱导M2-TAMs;流式细胞术检测M2-TAMs标志蛋白CD163表达;PCR检测温下方对M2-TAMs相关基因mRNA表达的影响;划痕和Transwell检测温下方对M2-TAMs促A549细胞侵袭转移的影响;Western blot和PCR检测非受体型酪氨酸蛋白激酶3(J AK3)、信号转导及转录激活因子6(ST AT6)和过氧化物酶增殖物激活受体γ(PP A Rγ)蛋白及mRNA表达。结果:动物实验显示,与模型组比较,温下方在第28天~35天有效降低转移灶光子强度(P<0.05,P<0.01);温下方有效减轻肺部病理损伤;温下方降低转移瘤中M2-TAMs特异性表型CD68和CD163双阳表达。细胞实验显示,成功诱导的M2-TAMs高表达CD163;与M2组比较,温下方显著抑制M2-TAMs标志物Arg-1、Fizz-1、C D206 m R NA表达(P<0.01);与M2组比较,M2+WC F组显著降低M2-T A M s促A549细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);与M2组相比较,温下方有效降低p-JAK3、p-STAT6和PPARγ蛋白及JAK3、STAT6、PPARγmRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论:温下方可能通过调控JAK3/STAT6/PPARγ信号通路,抑制巨噬细胞M2极化,降低A549细胞侵袭转移。展开更多
文摘目的:探讨温下方对巨噬细胞极化调控机制及M2型巨噬细胞(M2-TAMs)对A549细胞侵袭转移的影响。方法:动物实验:BALB/c裸鼠随机分为模型组和温下方组,灌胃干预。活体成像分析光子强度;观察肺部病理变化;识别CD68/CD163双标M2-TAMs。细胞实验:佛波酯(PMA)及白介素-4(IL-4)诱导M2-TAMs;流式细胞术检测M2-TAMs标志蛋白CD163表达;PCR检测温下方对M2-TAMs相关基因mRNA表达的影响;划痕和Transwell检测温下方对M2-TAMs促A549细胞侵袭转移的影响;Western blot和PCR检测非受体型酪氨酸蛋白激酶3(J AK3)、信号转导及转录激活因子6(ST AT6)和过氧化物酶增殖物激活受体γ(PP A Rγ)蛋白及mRNA表达。结果:动物实验显示,与模型组比较,温下方在第28天~35天有效降低转移灶光子强度(P<0.05,P<0.01);温下方有效减轻肺部病理损伤;温下方降低转移瘤中M2-TAMs特异性表型CD68和CD163双阳表达。细胞实验显示,成功诱导的M2-TAMs高表达CD163;与M2组比较,温下方显著抑制M2-TAMs标志物Arg-1、Fizz-1、C D206 m R NA表达(P<0.01);与M2组比较,M2+WC F组显著降低M2-T A M s促A549细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);与M2组相比较,温下方有效降低p-JAK3、p-STAT6和PPARγ蛋白及JAK3、STAT6、PPARγmRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论:温下方可能通过调控JAK3/STAT6/PPARγ信号通路,抑制巨噬细胞M2极化,降低A549细胞侵袭转移。
