目的探讨穿心莲内酯通过诱导Ha Ca T细胞中Nrf2/ARE信号通路介导的HO-1、NQO1、AKR1C1的表达,减少细胞因氧化应激而受到的损伤。方法通过CCK-8方法检测穿心莲内酯对Ha Ca T细胞的活力影响以及过氧化氢诱导的细胞存活率的影响。用穿心莲...目的探讨穿心莲内酯通过诱导Ha Ca T细胞中Nrf2/ARE信号通路介导的HO-1、NQO1、AKR1C1的表达,减少细胞因氧化应激而受到的损伤。方法通过CCK-8方法检测穿心莲内酯对Ha Ca T细胞的活力影响以及过氧化氢诱导的细胞存活率的影响。用穿心莲内酯不同浓度预处理Ha Ca T细胞24 h,分别通过Western blot以及实时荧光定量PCR分析检测Ha Ca T细胞中Nrf2、HO-1、AKR1C1、NQO1的表达水平;通过胞质胞核分离以及免疫荧光的方法分析Nrf2蛋白核内表达情况。结果穿心莲内酯不影响细胞存活率,并剂量依赖性的降低H2O2诱导的细胞死亡,差异具有统计学意义。穿心莲内酯能显著增强抗氧化酶Nrf2、HO-1、AKR1C1、NQO1的蛋白和mRNA表达,增加Nrf2的细胞核内的分布,并上调ARE的表达活性。穿心莲内酯能够上调上游蛋白激酶AMPKα的磷酸化(p-AMPKα)水平。结论穿心莲内酯降低H2O2诱导的细胞死亡,其作用机制可能是通过激活Nrf2/ARE信号通路,从而调控HO-1、AKR1C1、NQO1的表达水平。展开更多
文摘目的探讨穿心莲内酯通过诱导Ha Ca T细胞中Nrf2/ARE信号通路介导的HO-1、NQO1、AKR1C1的表达,减少细胞因氧化应激而受到的损伤。方法通过CCK-8方法检测穿心莲内酯对Ha Ca T细胞的活力影响以及过氧化氢诱导的细胞存活率的影响。用穿心莲内酯不同浓度预处理Ha Ca T细胞24 h,分别通过Western blot以及实时荧光定量PCR分析检测Ha Ca T细胞中Nrf2、HO-1、AKR1C1、NQO1的表达水平;通过胞质胞核分离以及免疫荧光的方法分析Nrf2蛋白核内表达情况。结果穿心莲内酯不影响细胞存活率,并剂量依赖性的降低H2O2诱导的细胞死亡,差异具有统计学意义。穿心莲内酯能显著增强抗氧化酶Nrf2、HO-1、AKR1C1、NQO1的蛋白和mRNA表达,增加Nrf2的细胞核内的分布,并上调ARE的表达活性。穿心莲内酯能够上调上游蛋白激酶AMPKα的磷酸化(p-AMPKα)水平。结论穿心莲内酯降低H2O2诱导的细胞死亡,其作用机制可能是通过激活Nrf2/ARE信号通路,从而调控HO-1、AKR1C1、NQO1的表达水平。
