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绿色荧光蛋白基因与hERG基因G604S突变共表达功能研究
1
作者
霍建华
马爱群
+3 位作者
郭雪艳
强华
刘平
白玲
《山西医科大学学报》
CAS
2016年第9期785-790,共6页
目的观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因与h ERG(human ether-a-go-go-related gene)基因融合后是否影响h ERG通道的电生理特性。方法 HEK293细胞分别被转入pc DNA3-WT-h ERG和/或pc DNA3-G604S-h ER...
目的观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因与h ERG(human ether-a-go-go-related gene)基因融合后是否影响h ERG通道的电生理特性。方法 HEK293细胞分别被转入pc DNA3-WT-h ERG和/或pc DNA3-G604S-h ERG,p EGFP-WT-h ERG和/或p EGFP-G604S-h ERG。激光共聚焦观察h ERG通道蛋白在细胞内的表达定位;膜片钳实验记录h ERG电流。结果在转染pc DNA3-WT-h ERG或p EGFP-WT-h ERG的细胞中,h ERG蛋白表达于胞质与胞膜;在转染pc DNA3-G604S-h ERG或p EGFP-G604S-h ERG的细胞中,h ERG蛋白仅在胞质表达。HEK293细胞转染pc DNA3-WT-h ERG后,h ERG电流的最大尾电流密度为(75.4±2.2)p A/p F,明显高于转染p EGFP-WT-h ERG的最大尾电流密度[(15.1±0.7)p A/p F,P<0.05]。共转染pc DNA3-WT-h ERG与pc DNA3-G604S-h ERG的最大h ERG尾电流密度明显高于p EGFP-WT-h ERG/p EGFP-G604S-h ERG的最大h ERG尾电流密度[(23.1±0.8)p A/p F vs(12.6±0.9)p A/p F,P<0.05]。此外,EGFP基因与野生型或突变h ERG基因融合后,明显改变了h ERG通道的电压依赖性激活及去失活特性。结论 EGFP基因与野生型或突变h ERG基因融合不影响h ERG通道蛋白在细胞内的表达定位,但明显改变了h ERG电流的大小、激活及去失活特性,因此检测突变h ERG通道的电生理功能时应避免使用绿色荧光蛋白基因质粒作为表达载体。
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关键词
增强型绿色荧光蛋白
h
ERG
G604S突变
HEK293
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职称材料
题名
绿色荧光蛋白基因与hERG基因G604S突变共表达功能研究
1
作者
霍建华
马爱群
郭雪艳
强华
刘平
白玲
机构
西安交通大学医学院第一附属医院心内科
陕西省人民医院消化科
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2016年第9期785-790,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30801133)
陕西省自然科学基础研究计划基金资助项目(2014JM2-8154)
文摘
目的观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因与h ERG(human ether-a-go-go-related gene)基因融合后是否影响h ERG通道的电生理特性。方法 HEK293细胞分别被转入pc DNA3-WT-h ERG和/或pc DNA3-G604S-h ERG,p EGFP-WT-h ERG和/或p EGFP-G604S-h ERG。激光共聚焦观察h ERG通道蛋白在细胞内的表达定位;膜片钳实验记录h ERG电流。结果在转染pc DNA3-WT-h ERG或p EGFP-WT-h ERG的细胞中,h ERG蛋白表达于胞质与胞膜;在转染pc DNA3-G604S-h ERG或p EGFP-G604S-h ERG的细胞中,h ERG蛋白仅在胞质表达。HEK293细胞转染pc DNA3-WT-h ERG后,h ERG电流的最大尾电流密度为(75.4±2.2)p A/p F,明显高于转染p EGFP-WT-h ERG的最大尾电流密度[(15.1±0.7)p A/p F,P<0.05]。共转染pc DNA3-WT-h ERG与pc DNA3-G604S-h ERG的最大h ERG尾电流密度明显高于p EGFP-WT-h ERG/p EGFP-G604S-h ERG的最大h ERG尾电流密度[(23.1±0.8)p A/p F vs(12.6±0.9)p A/p F,P<0.05]。此外,EGFP基因与野生型或突变h ERG基因融合后,明显改变了h ERG通道的电压依赖性激活及去失活特性。结论 EGFP基因与野生型或突变h ERG基因融合不影响h ERG通道蛋白在细胞内的表达定位,但明显改变了h ERG电流的大小、激活及去失活特性,因此检测突变h ERG通道的电生理功能时应避免使用绿色荧光蛋白基因质粒作为表达载体。
关键词
增强型绿色荧光蛋白
h
ERG
G604S突变
HEK293
Keywords
enhanced green fluorescent protein(EGFP)
h ERG
G604S mutation
HEK293
分类号
R541.1 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
绿色荧光蛋白基因与hERG基因G604S突变共表达功能研究
霍建华
马爱群
郭雪艳
强华
刘平
白玲
《山西医科大学学报》
CAS
2016
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