薰衣草醇酰基转移酶基因(AAT)的克隆和表达分析

1

作者 廖燕 尹松松 +4 位作者 龚林涛 闫博文 孙明辉 苏秀娟 王爱凡 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期599-606,共8页

醇酰基转移酶(AAT)可以催化乙酰辅酶A与萜烯醇类物质的结合,生成各类乙酸酯类化合物。为探明薰衣草AAT基因在酯类化合物合成中的调控作用,本研究以薰衣草品系杂花叶片为供试材料,利用反转录PCR技术克隆薰衣草AAT基因的cDNA序列,该cDNA... 醇酰基转移酶(AAT)可以催化乙酰辅酶A与萜烯醇类物质的结合,生成各类乙酸酯类化合物。为探明薰衣草AAT基因在酯类化合物合成中的调控作用,本研究以薰衣草品系杂花叶片为供试材料,利用反转录PCR技术克隆薰衣草AAT基因的cDNA序列,该cDNA序列长度为1344 bp,其编码蛋白质由447个氨基酸组成,是非跨膜亲水性蛋白质,属于PLN02481超级家族;薰衣草AAT与黄色猴面花EgAAT亲缘关系最近,相似度为60.87%。AAT基因在苞叶中的表达量最低,在花瓣中的表达量最高;在花冠不同发育时期,该基因在盛开期表达量到达峰值。构建原核表达载体pET-28a-AAT,筛选了重组蛋白在大肠杆菌Transetta(DE3)中的最适诱导表达条件,诱导后获得的重组蛋白质相对分子质量为5.026×10^(4),重组蛋白以包涵体形式存在,具有将芳樟醇催化合成乙酸芳樟酯的生物活性。本研究结果为进一步验证薰衣草AAT基因在酯类化合物合成过程中的功能提供了基础。 展开更多

关键词 薰衣草 醇酰基转移酶基因(AAT) 克隆 表达模式 酶活性鉴定

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薰衣草1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因LaDXR的克隆及表达分析 被引量：6

2

作者 尹松松 苏秀娟 +3 位作者 龚林涛 廖燕 阿迪莱·阿布都热依木 耿洪伟 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第7期2193-2199,共7页

为了解薰衣草LaDXR基因在薰衣草萜类化合物生物合成过程中的调控机理,本研究以薰衣草品种"杂花"为材料,采用RT-PCR技术克隆了薰衣草LaDXR基因,并对该基因进行了结构及表达分析。结果表明,LaDXR基因序列全长为1428 bp,编码475... 为了解薰衣草LaDXR基因在薰衣草萜类化合物生物合成过程中的调控机理,本研究以薰衣草品种"杂花"为材料,采用RT-PCR技术克隆了薰衣草LaDXR基因,并对该基因进行了结构及表达分析。结果表明,LaDXR基因序列全长为1428 bp,编码475个氨基酸,蛋白分子量为51.63 kD,是一种稳定的亲水蛋白;LaDXR基因具有DXR基因所必需的2个典型结合域及NADPH的两个结合位点,其编码的氨基酸与NCBI数据库BLAST得到其他同源性较高的植物氨基酸平均相似度在86%以上,该基因与冬凌草、毛喉鞘蕊花的DXR基因亲缘关系最近;LaDXR基因在"杂花"花器官中的表达量比在"法国蓝"中的表达量高,该基因在盛开期和花萼的表达量最高。本研究结果为进一步揭示薰衣草萜类化合物生物合成机制奠定了基础,为薰衣草的遗传育种提供了研究线索。 展开更多

关键词 薰衣草 基因克隆 表达分析 原核表达

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薰衣草芳樟醇合酶基因的克隆、表达及酶活性检测 被引量：5

3

作者 龚林涛 苏秀娟 +3 位作者 廖燕 克热木汗·吾斯曼 周迪 尹松松 《作物杂志》 北大核心 2021年第6期78-87,共10页

从高油薰衣草品种"杂花"中克隆得到芳樟醇合酶基因LIS1和LIS2,并对其进行了生物信息学和表达模式分析、原核表达和酶活性检测,以低油品种"法国蓝"为对照。结果表明,LIS1基因编码602个氨基酸,LIS2基因编码564个氨基... 从高油薰衣草品种"杂花"中克隆得到芳樟醇合酶基因LIS1和LIS2,并对其进行了生物信息学和表达模式分析、原核表达和酶活性检测,以低油品种"法国蓝"为对照。结果表明,LIS1基因编码602个氨基酸,LIS2基因编码564个氨基酸。LIS1蛋白与阔叶薰衣草、一串红的芳樟醇合酶亲缘关系相近,LIS2蛋白与狭叶薰衣草、杂薰衣草的芳樟醇合酶亲缘关系相近。LIS1基因在"杂花"花器官半开期、盛开期和衰败期的表达量均高于"法国蓝";LIS1基因在"杂花"花萼中的表达量最高,且仅在"法国蓝"雄蕊中少量表达。LIS2基因在"杂花"花器官不同组织和不同发育时期表达量均低于其在"法国蓝"中表达量,该基因在"杂花"花器官衰败期和"法国蓝"花器官半开期表达量最高,在2个品种花萼中高表达。LIS2基因在2个品种不同发育时期及组织中的表达量均明显高于LIS1基因。LIS1和LIS2重组蛋白具有单萜合酶活性,且均参与合成芳樟醇。 展开更多

关键词 薰衣草 芳樟醇合酶 克隆 基因表达 原核表达

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盐胁迫对海岛棉种子活力的影响 被引量：5

4

作者 苏秀娟 徐海江 +1 位作者 邓晓娟 龚林涛 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1604-1614,共11页

【目的】研究不同基因型海岛棉萌发期的耐盐特性,分析盐胁迫下海岛棉种子活力指标的变化规律,为培育耐盐海岛棉品种提供支持。【方法】以35份海岛棉种子作为材料,以NaCl溶液(150 mmol/L)模拟盐胁迫条件,统计分析发芽势、发芽率、根长、... 【目的】研究不同基因型海岛棉萌发期的耐盐特性,分析盐胁迫下海岛棉种子活力指标的变化规律,为培育耐盐海岛棉品种提供支持。【方法】以35份海岛棉种子作为材料,以NaCl溶液(150 mmol/L)模拟盐胁迫条件,统计分析发芽势、发芽率、根长、下胚轴长、苗鲜重、苗干重6项指标。【结果】(1)盐胁迫条件下,海岛棉种子各指标受影响程度不同,其中下胚轴受影响程度最大,苗干重受影响最小;(2)与对照样本比较,其中发芽势、发芽率、根长、下胚轴长、苗鲜重5项指标最大值、最小值、平均数均低于对照,苗干重的最大值、最小值、平均值则高于对照。【结论】35份海岛棉种子分为3类:第Ⅰ类属于高耐盐品种,第Ⅱ类属于中等耐盐品种,第Ⅲ类属于低耐盐品种。 展开更多

关键词 海岛棉 NACL 盐胁迫 种子活力 耐盐性

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‘杂花’薰衣草再生体系的建立 被引量：1

5

作者 克热木汗·吾斯曼 苏秀娟 +2 位作者 张明浩 赵嘉宁 龚林涛 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第24期8187-8194,共8页

为了获得高效稳定的薰衣草再生体系,本研究以‘杂花’薰衣草叶片为试材,研究了不同激素及浓度对愈伤组织诱导、不定芽分化及不定根形成的影响。结果表明:6-BA与NAA及6-BA与2,4-D组合均能诱导愈伤组织形成,最佳培养基配方分别为MS+6-BA 1... 为了获得高效稳定的薰衣草再生体系,本研究以‘杂花’薰衣草叶片为试材,研究了不同激素及浓度对愈伤组织诱导、不定芽分化及不定根形成的影响。结果表明:6-BA与NAA及6-BA与2,4-D组合均能诱导愈伤组织形成,最佳培养基配方分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L和MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,出愈率分别为95.2%、92%;6-BA与NAA组合诱导不定芽的效果显著优于6-BA与2,4-D的组合,适合诱导再生芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,分化率为68.1%;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,生根率为91.1%。本研究建立了‘杂花’薰衣草的再生体系,为利用转基因技术培育高产优质的薰衣草新品种提供技术支持。 展开更多

关键词 ‘杂花’薰衣草 愈伤组织 再生体系

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薰衣草DXS基因的克隆、表达分析及原核表达 被引量：4

6

作者 龚林涛 苏秀娟 +4 位作者 尹松松 孙明辉 闫博文 阿迪莱·阿布都热依木 陈全家 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1233-1242,共10页

【目的】研究拟克隆薰衣草DXS基因,并分析其表达,为揭示该基因在调控薰衣草萜类物质合成中的分子机理提供研究基础。【方法】以薰衣草杂花为试材,同源克隆薰衣草DXS基因,进行基因序列分析、表达量比较和原核表达。【结果】(1)薰衣草DXS... 【目的】研究拟克隆薰衣草DXS基因,并分析其表达,为揭示该基因在调控薰衣草萜类物质合成中的分子机理提供研究基础。【方法】以薰衣草杂花为试材,同源克隆薰衣草DXS基因,进行基因序列分析、表达量比较和原核表达。【结果】(1)薰衣草DXS基因开放阅读框长为2181 bp,编码由726个氨基酸组成的蛋白质序列;薰衣草DXS蛋白等电点为6.57,分子量约为78.39 KDa,具有高度的保守性,与狭叶薰衣草、冬凌草、毛喉鞘蕊花的DXS蛋白亲缘关系相近;(2)DXS基因在杂花花器官的衰败期表达量最高,在法国蓝花器官的盛开期表达量最高,DXS基因在杂花花器官五个不同发育时期的表达量均高于法国蓝;DXS基因在杂花花萼中表达量最高,在法国蓝雄蕊中表达量最高,DXS基因在杂花花器官5个不同组织表达量均高于法国蓝(雌蕊、雄蕊除外);(3)在37℃、IPTG 0.8 mM条件下诱导4 h后,DXS蛋白表达量最大。【结论】DXS基因表达量与薰衣草精油产量存在正相关关系。 展开更多

关键词 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶 克隆 基因表达 原核表达

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薰衣草SRAP-PCR反应体系的建立及优化 被引量：2

7

作者 阿迪莱·阿布都热依木 苏秀娟 +4 位作者 吕雪梅 周界光 尹松松 龚林涛 曲延英 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第19期6418-6423,共6页

为建立可靠并且稳定的SRAP-PCR反应体系,进一步开展新疆薰衣草种质资源的遗传多样性研究提供帮助。本研究采用L16(45)正交试验设计方法,对薰衣草SRAP-PCR反应体系主要影响因素DNA模板、Mg^2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶的用量进... 为建立可靠并且稳定的SRAP-PCR反应体系,进一步开展新疆薰衣草种质资源的遗传多样性研究提供帮助。本研究采用L16(45)正交试验设计方法,对薰衣草SRAP-PCR反应体系主要影响因素DNA模板、Mg^2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶的用量进行了筛选,比较了5个因素对扩增效果的影响。试验结果表明,各因素水平变化对反应体系的影响从大到小依次为:Mg^2+>引物>Tap聚合酶>dNTPs>DNA;建立的最佳反应体系为:总体积25.0μL,2.5μL 10×Buffer、Mg^2+浓度3.0 mmol/L、d NTPs浓度0.32 mmol/L、引物浓度0.24μmol/L、DNA模板量60 ng、Taq DNA聚合酶用量0.4 U,该体系经验证可以扩增出清晰、稳定且多态性较好的条带,可为开展后续的研究提供技术基础。 展开更多

关键词 薰衣草(Lavandula angustifolia Mill.) SRAP-PCR 正交试验设计 体系建立及优化

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新疆薰衣草种质资源遗传多样性SRAP分析 被引量：2

8

作者 苏秀娟 阿迪莱·阿布都热依木 +2 位作者 龚林涛 周界光 吕雪梅 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期5150-5156,共7页

为给薰衣草育种研究提供科学依据,本研究采用SRAP分子标记技术对65份薰衣草种质资源遗传多样性及亲缘关系进行评价,结果表明11对多态性引物共扩增出192个条带,其中多态性条带182个,多态性比率为94.79%。65份薰衣草的遗传相似系数范围为0... 为给薰衣草育种研究提供科学依据,本研究采用SRAP分子标记技术对65份薰衣草种质资源遗传多样性及亲缘关系进行评价,结果表明11对多态性引物共扩增出192个条带,其中多态性条带182个,多态性比率为94.79%。65份薰衣草的遗传相似系数范围为0.510 4~0.885 4,平均值为0.650 2;遗传距离范围为0.121 7~0.693 1,平均值为0.337 3;等位基因数(Na)为1.963 5,有效等位基因数(Ne)为1.555 6,Nei’s基因多样性指数(He)为0.320 3,Shannon信息指数(I)为0.479 3。聚类分析把供试材料分为4个类群:第Ⅰ类群包括35份、第Ⅱ类群包括1份、第Ⅲ类群包括1份和第Ⅳ类群包括28份种质。本研究表明新疆薰衣草种质资源的遗传背景相对狭窄,为了创制优异的薰衣草新品种,需要引入更多亲缘关系较远的薰衣草种质资源。 展开更多

关键词 薰衣草 种质资源 遗传多样性 SRAP

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南昌市提档升级农业特色产业

9

作者 龚林涛 王胜 杨闲冬 《江西农业》 2022年第19期28-30,共3页

今年以来,南昌市委市政府启动了以“农村路域环境整治、农村人居环境整治、农业特色产业提升”为主抓手的农业农村“两整治一提升”三年行动计划,根据南昌市委市政府关于农业特色产业提升总体部署,全市各级农业农村部门紧扣乡村产业振... 今年以来,南昌市委市政府启动了以“农村路域环境整治、农村人居环境整治、农业特色产业提升”为主抓手的农业农村“两整治一提升”三年行动计划,根据南昌市委市政府关于农业特色产业提升总体部署,全市各级农业农村部门紧扣乡村产业振兴目标,围绕都市现代农业高质量发展定位,依托各地资源优势和产业特点,聚焦重点区域、重点产业和重点企业,明确了13条农业特色产业支持政策。 展开更多

关键词 农业特色产业 都市现代农业 产业振兴 南昌市委 三年行动计划 农村人居环境 资源优势 总体部署

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南昌市休闲农业发展现状及对策研究

10

作者 龚林涛 《人民周刊》 2021年第9期73-74,共2页

休闲农业具有拓展农业休闲观光、文化传承、科技普及、业态培育等多种功能,是带动农村一二三产业融合发展的乡村产业新型业态。近年来,在市委市政府的坚强领导下,南昌市各级农业农村部门坚持以都市现代农业十大行动为统领,以产村互动、... 休闲农业具有拓展农业休闲观光、文化传承、科技普及、业态培育等多种功能,是带动农村一二三产业融合发展的乡村产业新型业态。近年来,在市委市政府的坚强领导下,南昌市各级农业农村部门坚持以都市现代农业十大行动为统领,以产村互动、农旅融合为主线,大力发展休闲农业,在优化产业布局、完善扶持政策、规范行业管理、开展推介活动、培育精品品牌等方面做了大量的工作,休闲农业和乡村旅游产业发展呈现出“布局优化、发展加快、质量提升、领域拓展、品牌创响”的新格局。 展开更多

关键词 都市现代农业 新型业态 休闲农业 农旅融合 休闲观光 质量提升 科技普及 布局优化

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职责不清导致主体责任弱化怎么办——从“表态”到常态需抓实抓细抓日常 被引量：1

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作者 龚林涛 《中国纪检监察》 2020年第14期24-24,共1页

让"红红脸、出出汗"成为常态,说易行难。目前,运用第一种形态还存在两个责任不平衡、主体责任弱化的现象。比如,一些地方和部门党委(党组)被动安排任务多,主动发现问题少,工作迟缓、消极应付;有的以不掌握或者发现不了问题为... 让"红红脸、出出汗"成为常态,说易行难。目前,运用第一种形态还存在两个责任不平衡、主体责任弱化的现象。比如,一些地方和部门党委(党组)被动安排任务多,主动发现问题少,工作迟缓、消极应付;有的以不掌握或者发现不了问题为由,故意推托;有的离开了纪检监察机关的前期准备,就不会开展工作等。 展开更多

关键词 消极应付 第一种形态 纪检监察机关 前期准备 责任弱化 常态 主体

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灵动的课堂 成长的舞台 被引量：1

12

作者 龚林涛 《数学学习与研究》 2009年第6期26-26,共1页

新一轮课程改革已把课堂的主席台还给了学生,就是要让课堂成为师生共同发展个性、开发潜能、实现生命价值的舞台.因此,数学课堂应该是精彩洋溢的、智慧飞扬的和富有创造的,数学课堂同样可以激荡着师生的灵气,弥漫着诗意的芳香.

关键词 灵动 创造潜能 个性发展

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激发学生的学习兴趣 提高学习效率

13

作者 龚林涛 《中小学电教（下）》 2009年第9期116-116,共1页

一节成功的课,不在于教师口若悬河地讲解,而在于学生能够主动地理解、探索、记忆。因此,教学过程中,教师善于激发学生的学习兴趣,充分发挥学习的主动性和积极性,这样才能促进其积极思维,主动获取知识,形成技能。激发学习兴趣不仅提高了... 一节成功的课,不在于教师口若悬河地讲解,而在于学生能够主动地理解、探索、记忆。因此,教学过程中,教师善于激发学生的学习兴趣,充分发挥学习的主动性和积极性,这样才能促进其积极思维,主动获取知识,形成技能。激发学习兴趣不仅提高了学习效率,而且锻炼了学习能力,有利于迸发创新思维的火花。如何激发学生的学习兴趣呢?我就教学中的几点积累一谈。 展开更多

关键词 学习效率 学习过程 学习能力 教学过程 联结点 群体学习 求知若渴 从学 口头表达 已知条件

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