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miR-578表达上调对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其与PREX2a的相关性分析 被引量:7
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作者 张祥 王垒垒 +6 位作者 姚俊朝 赵永辉 李贺扬 刘旭光 龙银 刘晨 王鹏 《重庆医学》 CAS 2019年第5期752-755,共4页
目的探讨上调miR-578对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其与PREX2a的相关性。方法采取Western blot和qPCR两种方法检测不同级别的人脑胶质细胞瘤组织及正常脑组织标本中miR-578相对表达量。选取人恶性胶质瘤U87、U251细胞系进行miR-578对... 目的探讨上调miR-578对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其与PREX2a的相关性。方法采取Western blot和qPCR两种方法检测不同级别的人脑胶质细胞瘤组织及正常脑组织标本中miR-578相对表达量。选取人恶性胶质瘤U87、U251细胞系进行miR-578对人脑恶性胶质瘤细胞增殖和凋亡影响的体外实验研究,分为miR-578类似物组及阴性序列组。qPCR及Western Blot分别检测转染后48h的胶质瘤细胞中miR-578和PREX2a的表达,平板克隆形成实验检测转染后胶质瘤细胞细胞克隆形成数目,流式细胞术检测胶质瘤细胞凋亡情况。噻唑蓝(MTT)法检测胶质瘤细胞24、48、72h时的相对生存活力。结果 qPCR结果显示胶质瘤组织标本中miR-578的相对表达量较正常脑组织标本明显降低(P<0.01)。与阴性序列组比较,miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞的miR-578表达明显升高(P<0.05),miR-578的直接作用底物(PREX2a)表达则明显下降(P<0.05)。MTT实验检测转染后48h的miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞在24、48、72h的生存能力较阴性序列组明显降低(P<0.05)。平板克隆形成实验显示miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞克隆数较阴性序列组明显减少(P<0.05)。流式细胞术检测miR-578类似物组U87、U251胶质瘤细胞的凋亡能力较阴性序列组明显增强(P<0.05)。结论 miR-578在胶质瘤细胞增殖和凋亡中发挥了明显的负性生物学作用,该过程可能与PREX2a相关。 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-578 PREX2a 增殖 凋亡
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敲减lncRNA BAIAP2-AS1对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制
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作者 李贺扬 龙银 +2 位作者 金治宾 刘容 倪晓光 《山东医药》 CAS 2024年第4期44-49,共6页
目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检... 目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检测各细胞中微小RNA-491-5p(miR-491-5p)、BAIAP2-AS1、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)mRNA表达,选择lncRNA BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA相对表达量变化较显著的胶质瘤细胞进行后续实验。取上述胶质瘤细胞,随机分为空白对照组、BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1 shRNA+NC inhibitor组,BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA、NC shRNA,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1shRNA+NC inhibitor组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA与miR-491-5p inhibitor、BAIAP2-AS1 shRNA与NC inhibitor,空白对照组不予转染。转染48 h,收集细胞,采用MTT法检测细胞活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用细胞划痕实验检测细胞迁移率,采用RT-qPCR法检测BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA表达。采用StarBase在线数据库预测miR-491-5p与BAIAP2-AS1、MGMT的互补位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证其靶向调控关系。结果与NHA细胞比较,A172、LN229、U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低(P均<0.05)。以U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低,故以U251细胞进行后续实验。与空白组、NC shRNA组比较,BAIAP2-AS1 shRNA组细胞活性、细胞迁移率、BAIAP2-AS1、MGMT表达显著降低(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著升高(P均<0.05);与BAIAP2-AS1 shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+inhibitor NC组比较,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组细胞活性、细胞迁移率、MGMT表达显著增加(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著降低(P均<0.05)。经StarBase在线数据库预测 展开更多
关键词 胶质瘤 长链非编码RNA BAIAP2反义RNA 1 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 微小RNA-491-5p O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶
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沉默lncRNA SLC16A1-AS1对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响
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作者 龙银 李贺扬 金治宾 《中国临床神经外科杂志》 2024年第1期35-41,45,共8页
目的探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)SLC16A1-AS1对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法PCR检测2021年5月至2023年1月手术切除的62例脑胶质瘤组织lncRNA SLC16A1-AS1、微小RNA(miR)-584-5p以细胞外蛋白调节激酶1(MAPK1)m RNA,免疫印... 目的探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)SLC16A1-AS1对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法PCR检测2021年5月至2023年1月手术切除的62例脑胶质瘤组织lncRNA SLC16A1-AS1、微小RNA(miR)-584-5p以细胞外蛋白调节激酶1(MAPK1)m RNA,免疫印迹法检测MAPK1蛋白表达;以瘤旁组织(距离肿瘤边缘>2 cm)作为正常脑组织。从胶质瘤组织中分离、培养胶质瘤细胞,进行CD133、Neatin免疫荧光染色鉴定;转染不同质粒沉默lncRNA SLC16A1-AS1、上调或下调miR-584-5p表达;应用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验和流式细胞术检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;免疫印迹法检测细胞MAPK1、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SLC16A1-AS1、miR-584-5p和MAPK1的靶向关系。结果胶质瘤组织lncRNA SLC16A1-AS1、MAPK1呈高表达(P<0.05),miR-584-5p呈低表达(P<0.05)。免疫荧光染色显示,分离培养的细胞CD133、Nestin均呈阳性表达。沉默lncRNA SLC16A1-AS1表达,明显抑制体外培养的胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),明显下调细胞CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05),明显上调miR-584-5p、caspase-3表达。抑制miR-584-5p明显逆转沉默lncRNA SLC16A1-AS1对体外培养的价胶质瘤细胞的作用。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA SLC16A1-AS1与miR-584-5p/MAPK1存在靶向调节关系。结论胶质瘤组织lncRNA SLC16A1-AS1呈高表达,沉默lncRNA SLC16A1-AS1可以上调miR-584-5p表达,抑制MAPK1表达,进而抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 长链非编码RNA SLC16A1-AS1 微小RNA-584-5p 细胞外蛋白调节激酶1 细胞增殖 细胞凋亡
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lncRNA SLC16A1-AS1调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响
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作者 金治宾 李贺扬 龙银 《中国临床神经科学》 2024年第1期1-12,共12页
目的探讨长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA 1(lncRNA SLC16A1-AS1)调节微小RNA-532-3p(miR-532-3p)/肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测胶质瘤细胞中lnc... 目的探讨长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA 1(lncRNA SLC16A1-AS1)调节微小RNA-532-3p(miR-532-3p)/肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测胶质瘤细胞中lncRNA SLC16A1-AS1表达水平,筛选最佳干预细胞系;通过荧光原位杂交实验、下拉实验、双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SLC16A1-AS1、TAGLN2与miR-532-3p的靶向调控关系。①将U251细胞分为小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、si-SLC16A1-AS1组、si-SLC16A1-AS1+NC inhibitor组、si-SLC16A1-AS1+miR-532-3p inhibitor组、miR-NC组、miR-532-3p mimics组、miR-532-3p mimics+pcDNA组、miR-532-3p mimics+TAGLN2组:检测U251细胞的增殖、迁移和侵袭变化;Western blot检测TAGLN2、E-钙黏附蛋白、波形蛋白表达水平。②小鼠体内肿瘤形成实验:验证lncRNA SLC16A1-AS1对胶质瘤生长的影响。结果lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平升高(P<0.05);U251细胞FISH实验、下拉实验、双荧光素酶基因实验证实lncRNA SLC16A1-AS1,TAGLN2与miR-532-3p存在靶向调控关系;抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p可显著抑制U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(P<0.05);抑制miR-532-3p表达或过表达TAGLN2可逆转抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p对U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化的抑制作用(P<0.05)。小鼠体内实验显示,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可显著抑制移植瘤的生长(P<0.05)。结论lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平上调,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可通过调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路,进而抑制胶质瘤的恶性进展。 展开更多
关键词 长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA 1 微小RNA-532-3p 肌动蛋白结合蛋白2 E-钙黏附蛋白 胶质瘤细胞 增殖 迁移与侵袭
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村村配备“计生药具箱”
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作者 罗理力 龙银 《乡镇论坛》 2012年第26期15-15,共1页
8月10日,湖南省隆回县岩口镇为71个村(居)计生队员配备了计划生育药具箱,药具箱配备常用药具、药品。
关键词 配备 生药 计划生育药具 隆回县 湖南省 常用药 药品
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