白术内酯Ⅰ抑制卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞增殖作用机制的研究 被引量：24

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作者 龙方懿 贾萍 +3 位作者 王华飞 卿轶 何梦婕 王晓丽 《局解手术学杂志》 2017年第2期89-93,共5页

目的探讨白术内酯Ⅰ抑制卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞增殖的作用及其分子机制。方法 MTT实验检测不同浓度白术内酯Ⅰ作用人卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞24 h、48 h、72 h后,白术内酯Ⅰ对卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞技术与PI染色检测白... 目的探讨白术内酯Ⅰ抑制卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞增殖的作用及其分子机制。方法 MTT实验检测不同浓度白术内酯Ⅰ作用人卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞24 h、48 h、72 h后,白术内酯Ⅰ对卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞技术与PI染色检测白术内酯Ⅰ对卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞周期的影响,ELISA实验检测白术内酯Ⅰ对卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞cyclin D1与CDK1表达的影响;Western blot测定白术内酯Ⅰ对卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞PI3K/AKT信号通路的影响。结果白术内酯Ⅰ可显著抑制SK-OV-3与OVCAR-3细胞增殖,且白术内酯Ⅰ对SK-OV-3与OVCAR-3细胞的增殖抑制作用具有浓度和时间依赖性;此外,白术内酯Ⅰ还可显著降低SK-OV-3与OVCAR-3细胞的S期细胞比例,增加G2/M期细胞比例,且白术内酯Ⅰ对SK-OV-3与OVCAR-3细胞周期的调控与其抑制CDK1的表达有关;Western blot实验进一步探讨了白术内酯Ⅰ抑制细胞增殖和调控细胞周期与PI3K/AKT信号通路有关。结论白术内酯Ⅰ可通过PI3K/AKT途径下调卵巢癌SK-OV-3与OVCAR-3细胞CDK1的表达,从而使细胞阻滞于G2/M期,进而发挥肿瘤细胞增殖抑制作用。 展开更多

关键词 白术内酯I 细胞增殖 细胞周期 P13K/AKT 卵巢癌

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HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin在人乳腺癌中的表达及其意义 被引量：14

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作者 龙方懿 印国兵 +5 位作者 刘智敏 杨俊艳 贾朝莉 刘小花 董超然 王旎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期502-506,共5页

目的:探讨HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin在人乳腺癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法,检测术前未使用放疗、化疗及激素治疗的69例乳腺癌组织中HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin的表达情况。采用RT-PCR方法检测乳腺癌细胞系MCF-7... 目的:探讨HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin在人乳腺癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法,检测术前未使用放疗、化疗及激素治疗的69例乳腺癌组织中HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin的表达情况。采用RT-PCR方法检测乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin mRNA的表达情况。结果:免疫组化结果表明:在69例乳腺癌组织中,HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin的阳性率分别为71.01%、42.03%、43.48%和50.72%。HIF-1α、Slug和E-cad-herin的表达对于TNM分期和腋淋巴结转移有显著性差异(P<0.05);MT的表达对于TNM分期有显著性差异(P<0.05)。在69例乳腺癌组织标本中HIF-1α与MT表达呈显著正相关(r=0.285,P<0.05),MT与Slug呈显著正相关(r=0.379,P<0.01),Slug与E-cadherin呈显著负相关(r=-0.422,P<0.01)。RT-PCR半定量结果显示:HIF-1α、MT、Slug和E-cadherinmRNA在人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中均有表达,但在恶性程度更高的MDA-MB-231细胞中HIF-1α、MT、Slug表达较高,而E-cadherin表达较低,差异具有显著性(P<0.05)。结论:HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin在乳腺癌中的表达情况可作为监测乳腺癌发展的指标。 展开更多

关键词 乳腺癌 HIF-1Α MT SLUG E-CADHERIN

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G蛋白偶联受体在雌激素诱导人甲状腺未分化癌FRO细胞增殖中的作用及其机制 被引量：9

3

作者 吴婷婷 龙方懿 +1 位作者 贾朝莉 刘智敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期164-168,共5页

目的探讨G蛋白偶联受体(G-protein coupled receptor,GPER)在雌激素促进人甲状腺未分化癌FRO细胞增殖中的作用及其机制。方法不同浓度(0、10-10、10-9、10-8mol/L)的17β-雌二醇(17β-Estradiol,E2)处理FRO细胞不同时间(0、12、24h),MT... 目的探讨G蛋白偶联受体(G-protein coupled receptor,GPER)在雌激素促进人甲状腺未分化癌FRO细胞增殖中的作用及其机制。方法不同浓度(0、10-10、10-9、10-8mol/L)的17β-雌二醇(17β-Estradiol,E2)处理FRO细胞不同时间(0、12、24h),MTT法检测细胞增殖率;10-8mol/L的E2处理FRO细胞不同时间(0～24h),流式细胞术检测E2对FRO细胞周期的影响;设计合成针对GPER的小干扰RNA(GPER-siRNA)并转染FRO细胞;Western blot检测FRO细胞中Akt与ERK1/2磷酸化水平与GPER蛋白的表达。结果不同浓度(0、10-10、10-9、10-8mol/L)的E2处理FRO细胞不同时间(0、12、24h),细胞增殖率随浓度和时间的增加而增加,且10-8mol/L的E2处理24h后,细胞增殖率为(16.5±2.1)%;10-8mol/L的E2处理FRO细胞不同时间(0、12、24h),细胞周期S/G2/M期细胞的比例随时间的增加而增加;E2(10-8mol/L)处理FRO细胞不同时间(0、5、10、15、30min),ERK1/2与Akt的磷酸化水平分别在15min与10min达到最大;将GPER-siRNA转染FRO细胞48h,GPER的蛋白表达显著减少;E2作用于分别加入PD98059(30μmol/L)、LY294002(50μmol/L)以及转染GPER-siRNA的FRO细胞15min和10min,与E2处理组相比,ERK1/2和Akt的磷酸化水平降低;E2作用于分别加入PD98059、LY294002及转染GPER-siRNA的FRO细胞24h,与E2处理组相比,增殖率由(16.5±2.1)%降至(11.2±1.3)%、(9.6±1.5)%、(7.2±1.3)%(P<0.05)。结论 E2通过GPER激活ERK1/2、PI3K-Akt途径,促进FRO细胞的增殖。 展开更多

关键词 雌激素 甲状腺癌 GPER ERK1/2 PI3K-AKT

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三种不同方法检测盆腔炎患者宫颈沙眼衣原体和(或)解脲支原体感染的研究 被引量：8

4

作者 石艳艳 罗红权 +6 位作者 龙方懿 梁开如 陈本祯 谢成彬 李宁 成春岚 朱巧英 《标记免疫分析与临床》 CAS 2021年第9期1574-1578,共5页

目的探究连接酶链反应法(ligase chain reaction,LCR)、实时恒温扩增RNA技术(RNA real-time fluorescent constant temperature amplification detection,SAT)和环介导恒温扩增技术(loop mediated isothermal amplification technology,... 目的探究连接酶链反应法(ligase chain reaction,LCR)、实时恒温扩增RNA技术(RNA real-time fluorescent constant temperature amplification detection,SAT)和环介导恒温扩增技术(loop mediated isothermal amplification technology,LAMP)对盆腔炎(pelvic inflammatory disease,PID)患者宫颈沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)和(或)解脲支原体(ureaplasma urealyticum,UU)检测结果。方法选取2020年5月至2021年5月本院收治的PID患者186例,采集患者宫颈分泌物标本,分别采用LCR、SAT和LAMP方法检测CT、UU感染情况,比较不同方法的检测结果。结果186例PID患者中,CT感染率为20.43%,UU感染率为40.32%,CT+UU感染率为16.13%。不同年龄段PID患者CT、UU感染率比较,差异有统计学意义(P<0.05),CT感染率在20~35岁患者中最高,UU感染率在36~40岁患者中最高(P<0.05)。SAT检测CT的准确率明显高于LCR和LAMP(P<0.05),LCR和LAMP检测CT的准确率比较差异无统计学意义(P>0.05);SAT和LAMP检测UU、CT+UU的准确率明显高于LCR(P<0.059),SAT和LAMP检测UU、CT+UU的准确率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PID患者中,20~35岁患者CT感染率较高,36~40岁患者中UU感染率较高;SAT在检测PID患者宫颈CT感染方面效果优于LCR和LAMP,检测UU感染方面效果与LAMP相当,且优于LCR。 展开更多

关键词 盆腔炎 沙眼衣原体 解脲支原体 连接酶链反应法 实时恒温扩增RNA技术 环介导恒温扩增技术

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基于DLEC1基因表观遗传学调控探讨重楼皂苷Ⅰ的抗卵巢癌作用 被引量：8

5

作者 贾萍 龙方懿 +3 位作者 王华飞 卿轶 何梦婕 王婷 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第9期936-942,共7页

目的通过基于DLEC1基因表观遗传学调控探讨重楼皂苷Ⅰ抗卵巢癌作用及其分子机制。方法 MTT法检测不同浓度重楼皂苷Ⅰ(5、10、15与20μmol/L)对卵巢癌SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR及Western blot法检测重楼皂苷Ⅰ对SK... 目的通过基于DLEC1基因表观遗传学调控探讨重楼皂苷Ⅰ抗卵巢癌作用及其分子机制。方法 MTT法检测不同浓度重楼皂苷Ⅰ(5、10、15与20μmol/L)对卵巢癌SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR及Western blot法检测重楼皂苷Ⅰ对SK-OV-3与OVCAR-3细胞DLEC1表达的影响;RNAi技术及MTT法检测DLEC1基因对重楼皂苷Ⅰ抑制SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖作用的影响;甲基化特异性PCR及甲基化DNA免疫沉淀-qPCR技术检测重楼皂苷Ⅰ对SK-OV-3及OVCAR-3细胞中DLEC1基因启动子甲基化的影响。结果重楼皂苷Ⅰ可显著抑制SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖(P<0.05),且具有一定的浓度依赖性;可显著上调SK-OV-3及OVCAR-3细胞中DLEC1基因m RNA转录及蛋白的表达水平(P<0.05);可显著增强SK-OV-3及OVCAR-3细胞中DLEC1基因启动子的去甲基化作用(P<0.05)。同时,下调DLEC1表达可明显减弱重楼皂苷1对SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖抑制作用(P<0.05)。结论重楼皂苷Ⅰ可通过表观遗传学调控对DLEC1基因启动子发挥去甲基化作用,进而诱导DLEC1的表达而发挥抗卵巢癌作用。 展开更多

关键词 重楼皂苷Ⅰ DLEC1 表观遗传学 卵巢癌 SK-OV-3细胞 OVCAR-3细胞

原文传递

乳杆菌及其在阴道炎治疗中的研究进展 被引量：6

6

作者 吴忠梅 龙方懿 +2 位作者 刘寒 杜小华 贾萍 《现代医药卫生》 2018年第12期1851-1854,共4页

随着临床对阴道炎与阴道微生态联系的认识越来越全面,阴道微生态制剂的使用也越来越广泛,但对微生态制剂的性质了解不够深,在临床使用中,时常发生不合理使用现象。本文对目前国内的阴道用微生态制剂即乳杆菌制剂的微生物学性质、药理作... 随着临床对阴道炎与阴道微生态联系的认识越来越全面,阴道微生态制剂的使用也越来越广泛,但对微生态制剂的性质了解不够深,在临床使用中,时常发生不合理使用现象。本文对目前国内的阴道用微生态制剂即乳杆菌制剂的微生物学性质、药理作用机制、在阴道的定植能力作了归纳。 展开更多

关键词 乳杆菌属 阴道炎 微生物学 综述

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铁死亡相关的环状RNA在疾病中的作用及机制

7

作者 王芹 何梦婕 龙方懿 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期295-311,共17页

环状RNA(circular RNA,circRNA)是真核生物细胞中一类特殊的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA),具有高度稳定性。目前已广泛发现circRNA可作为微RNA(microRNA,miRNA)海绵参与各种疾病发生发展过程。作为近年来研究的热点,circRNA的功能... 环状RNA(circular RNA,circRNA)是真核生物细胞中一类特殊的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA),具有高度稳定性。目前已广泛发现circRNA可作为微RNA(microRNA,miRNA)海绵参与各种疾病发生发展过程。作为近年来研究的热点,circRNA的功能和作用不断被发现和利用,其既可作为蛋白质支架使靶点结合更紧密,也可以调节疾病信号分子的转录表达,还能作为翻译模板,参与蛋白质的表达。此外,研究证实了铁死亡在疾病发展中具有重要作用,而铁死亡相关circRNA的分子机制研究也是医学研究领域的新前沿。最近研究发现,circRNA不仅能作为miRNA和蛋白质支架参与调控铁死亡,还能从转录水平调节铁死亡相关信号分子。目前,人工合成的环状RNA已被设计用于RNA疫苗,各种基因治疗技术、药物递送载体也为靶向circRNA的药物开发提供重要依据。本文阐述了circRNA的功能和作用、铁死亡调控的关键靶点及其在疾病中的作用,并且着重阐释了铁死亡相关circRNA在肿瘤、神经系统疾病及糖尿病并发症等多系统疾病中的作用机制,概述了circRNA相关的药物开发策略,为基于铁死亡相关circRNA的药物开发提供新的思路。 展开更多

关键词 环状RNA 铁死亡 脂代谢 铁代谢 基因治疗

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环状RNA的m6A修饰在肿瘤中的作用 被引量：3

8

作者 林红 龙方懿 王婷 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期150-158,共9页

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种具有新型环状结构的RNA分子,广泛存在于多种生物体中,具有结构稳定、进化保守、高度丰富和组织特异性等特征。同时,它可通过充当微小RNA(microRNA,miRNA)分子海绵、调控基因转录、结合蛋白质和参与... 环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种具有新型环状结构的RNA分子,广泛存在于多种生物体中,具有结构稳定、进化保守、高度丰富和组织特异性等特征。同时,它可通过充当微小RNA(microRNA,miRNA)分子海绵、调控基因转录、结合蛋白质和参与蛋白质翻译等方式发挥生物学功能。且随着高通量测序技术和生物信息学的迅速发展,越来越多的circRNA被发现与肿瘤的发生有关。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)修饰是真核生物最常见的一种RNA修饰,它是由m6A甲基转移酶、去甲基化酶和m6A识别蛋白质共同参与的动态可逆的调节过程,广泛参与RNA的核输出、剪接、稳定性、翻译和降解等过程的调控。m6A修饰在多种人类疾病中发挥关键作用,例如癌症和心血管疾病等。近年来,在一些circRNA中也发现了m6A修饰,并报道了其在宫颈癌、结直肠癌、肝细胞癌、非小细胞肺癌和胃低分化腺癌等多种恶性肿瘤发生发展中的作用。本文总结了RNA m6A修饰机制、m6A修饰对circRNA的调控作用,以及circRNA的m6A修饰在肿瘤中的作用,也讨论了m6A修饰的circRNA的潜在临床应用价值,以期为肿瘤的早期诊断、临床治疗和预后判断提供新的思路与途径。 展开更多

关键词 环状RNA N6-甲基腺嘌呤修饰 核输出 翻译 肿瘤

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临床药师参与1例早产儿嗜麦芽窄食单胞菌感染抗菌药物治疗 被引量：3

9

作者 王华飞 贾萍 +2 位作者 龙方懿 伍国林 徐文芳 《儿科药学杂志》 CAS 2018年第11期34-37,共4页

目的:探讨临床药师参与特殊人群多重耐药菌抗菌药物治疗的意义。方法:针对1例早产儿嗜麦芽窄食单胞菌感染,临床药师运用专业知识参与抗菌药物治疗方案的制定过程。结果:临床药师利用药学专业知识,结合患儿的生理病理情况,在充分循证证... 目的:探讨临床药师参与特殊人群多重耐药菌抗菌药物治疗的意义。方法:针对1例早产儿嗜麦芽窄食单胞菌感染,临床药师运用专业知识参与抗菌药物治疗方案的制定过程。结果:临床药师利用药学专业知识,结合患儿的生理病理情况,在充分循证证据支持和知情告知下,针对嗜麦芽窄食单胞菌感染提出头孢哌酮/舒巴坦联合环丙沙星的抗菌治疗方案,有效控制了患儿的病情。结论:临床药师可成为临床治疗团队中重要的一员,在抗菌治疗方案制定过程中发挥专业作用,解决临床实际问题,为患者提供有效的个体化治疗,提高临床用药的安全性与有效性。 展开更多

关键词 临床药师 早产儿 嗜麦芽窄食单胞菌 抗菌药物

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宫颈癌组织差异表达环状RNA筛选及通路分析

10

作者 张纱纱 蒋刚 +2 位作者 王茜 龙方懿 王婷 《肿瘤预防与治疗》 2022年第2期134-141,共8页

目的:筛选宫颈癌组织中差异表达的环状RNA(circularRNA,circRNA),并对其结合的微小RNA(microR-NA,miRNA)及靶向的信使RNA(messengerRNA,mRNA)进行生物信息学分析。方法:从GEO数据库中检索并下载宫颈癌组织芯片数据,利用R4.1软件进行差... 目的:筛选宫颈癌组织中差异表达的环状RNA(circularRNA,circRNA),并对其结合的微小RNA(microR-NA,miRNA)及靶向的信使RNA(messengerRNA,mRNA)进行生物信息学分析。方法:从GEO数据库中检索并下载宫颈癌组织芯片数据,利用R4.1软件进行差异分析,选择表达上调/下调最显著的各5个circRNA,通过circinterac-tome网站预测miRNA和3个生物信息学网站(miRDB、TargetScan、miRTarBase)联合预测靶mRNA,通过Metascape数据库对其进行功能富集分析。应用STRING在线工具预测mRNA的蛋白互作网络并获得关键mRNA,最后预测关键mRNA与患者预后的关系。结果:通过差异分析,发现宫颈癌组织中共有75个差异表达的circRNA,通过上调/下调最显著的共10个circRNA预测获得202个miRNA和5个预后相关mRNA(POLR2D、JUN、CTNNB1、H2AFZ、RBBP7),最后确定了8条circRNA-miRNA-mRNA调控路径可能参与宫颈癌的发生发展。结论:在宫颈癌组织中异常表达的circRNA及其相关通路将可能成为宫颈癌诊断和治疗的新靶点。 展开更多

关键词 circRNA MIRNA 宫颈癌 通路 GEO数据库

原文传递

海洋生物碱Manzamine A的全合成研究进展

11

作者 何梦婕 李金桃 +2 位作者 贾萍 龙方懿 刘玲 《中国药业》 CAS 2022年第21期122-127,共6页

目的 为海洋天然产物生物碱Manzamine A的全合成研究提供参考。方法 检索相关文献,对已报道的5篇Manzamine A的全合成文献进行要点阐述,提炼合成路线的特点。结果 针对Manzamine A的全合成,已报道有不少新颖的合成方法,但总体较烦琐,合... 目的 为海洋天然产物生物碱Manzamine A的全合成研究提供参考。方法 检索相关文献,对已报道的5篇Manzamine A的全合成文献进行要点阐述,提炼合成路线的特点。结果 针对Manzamine A的全合成,已报道有不少新颖的合成方法,但总体较烦琐,合成效率不高,不利于更深入地开展生物活性的研究。结论 该类天然产物因其结构复杂,合成难度大,有待发掘更多新颖的合成方法和策略。 展开更多

关键词 海洋生物碱 Manzamine A 核心骨架 全合成 研究进展

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黏膜特异性多肽修饰载胰岛素口服纳米粒的制备及其体内外评价 被引量：1

12

作者 刘智强 陈旭东 +1 位作者 龙方懿 祝慧凤 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期79-81,共3页

目的构建黏膜细胞特异性多肽(CSK)修饰的载胰岛素(insulin,INS)口服纳米粒(CSK—INS—NPs),并对其体外性质以及体内降血糖效果进行评价。方法用复乳法制备CSK修饰的载胰岛素聚乳酸羟基乙酸(poly lactic—co—glycolic acid,PLGA)纳米粒... 目的构建黏膜细胞特异性多肽(CSK)修饰的载胰岛素(insulin,INS)口服纳米粒(CSK—INS—NPs),并对其体外性质以及体内降血糖效果进行评价。方法用复乳法制备CSK修饰的载胰岛素聚乳酸羟基乙酸(poly lactic—co—glycolic acid,PLGA)纳米粒,对其理化性质和包封率进行考察。通过体外人克隆结肠腺癌细胞(Caco—2)摄取实验考察CSK修饰的纳米粒的细胞穿透能力和跨膜能力。构建糖尿病模型大鼠评价口服纳米粒的降血糖能力。结果制备得到的CSK—INS—NPs粒径为(134.4±15)nm,粒径多分散系数小于0.3,胰岛素的包封率(EE%)为71%。体外Caco—2细胞摄取实验表明,细胞对CSK—INS—NPs摄取量是INS—NPs的2.8倍。相比于INS—NPs,CSK—INS—NPs能够更加高效的穿透Caco—2细胞层。糖尿病大鼠的降糖实验表明,在10 h内,口服CSK—INS—NPs能够降低血糖浓度,且保持稳定。结论 CSK能够促进载胰岛素纳米粒跨越Caco—2细胞膜,CSK—INS—NPs是一种潜在的高效口服胰岛素载体给药系统。 展开更多

关键词 胰岛素 纳米粒 降糖作用 多肽

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氯化钴对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响及其机制 被引量：1

13

作者 贾朝莉 龙方懿 +4 位作者 刘智敏 杨俊艳 刘小花 董超然 王妮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期150-153,共4页

目的研究氯化钴(CoCl2)诱导的低氧对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响,初步探讨HIF-1α在其中的机制。方法 MTT检测CoCl2(50、100、150、200、250μmol/L)对细胞活力的影响,倒置显微镜观察低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、12... 目的研究氯化钴(CoCl2)诱导的低氧对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响,初步探讨HIF-1α在其中的机制。方法 MTT检测CoCl2(50、100、150、200、250μmol/L)对细胞活力的影响,倒置显微镜观察低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、12、24、48 h)对细胞形态的影响,Western blot检测低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、3、6、12、24 h)对HIF-1α、E-cadherin和Vimentin表达的影响,Transwell法检测低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、6 h)对细胞侵袭、转移的影响,用免疫荧光对HIF-1α蛋白进行亚细胞定位。结果低氧模拟剂CoCl2可抑制NPA细胞活力。随着CoCl2低氧处理时间的延长,NPA细胞逐渐获得间质细胞的形态特征,HIF-1α、Vimentin表达在0～6 h逐渐增加,随后开始下降,E-cadherin表达持续降低,低氧0 h与6 h相比各蛋白表达均具有统计学差异(P<0.01)。低氧组侵袭、转移细胞数目较对照组明显增加(P<0.01),同时低氧组细胞HIF-1α发生核转位。结论 CoCl2模拟化学性低氧可促进NPA细胞上皮间质转化及侵袭、转移,其分子机制可能涉及HIF-1α介导的信号通路对E-cadherin、Vimentin基因表达的调控。 展开更多

关键词 低氧诱导因子-1Α 上皮间质转化 甲状腺乳头状癌

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低氧诱导金属硫蛋白对甲状腺乳头状癌上皮间质转化的影响 被引量：1

14

作者 贾朝莉 吴婷婷 +1 位作者 龙方懿 刘智敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期671-674,共4页

目的研究低氧诱导金属硫蛋白(metallothioneins,MTs)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人甲状腺乳头状癌NPA细胞为研究模型,将其分为正常氧组(21%... 目的研究低氧诱导金属硫蛋白(metallothioneins,MTs)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人甲状腺乳头状癌NPA细胞为研究模型,将其分为正常氧组(21%O2)、低氧组(5%O2)和MTs-siRNA干扰低氧组,Western blot、RT-PCR方法检测各组细胞MTs、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)和间质细胞波形蛋白(Vimentin)的表达,Transwell/Matrigel方法检测各组细胞侵袭转移细胞数。结果低氧可诱导NPA细胞表达MTs,并伴随有EMT标志性分子E-cadherin表达的下调和Vimentin表达的升高,侵袭细胞数由正常氧组15.6±2.8增加到40.3±5.1,迁移细胞数由25.1±5.6增加到48.7±7.6,均有统计学差异(P<0.01);MTs靶向干扰可有效抑制低氧诱导的MTs蛋白表达,同时E-cadherin表达回升,Vimentin表达下降,侵袭细胞数仅增加到25.7±4.2,迁移细胞数仅增加到35.5±5.4,与低氧组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论低氧所诱导表达的MTs对人PTC细胞发生EMT有促进作用,MTs靶向干扰可使EMT受到部分抑制。 展开更多

关键词 金属硫蛋白 上皮间质转化 低氧 甲状腺乳头状癌

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Klotho通过抑制自噬逆转乳腺癌紫杉醇耐药的作用机制研究 被引量：2

15

作者 龙方懿 贾萍 +7 位作者 王华飞 卿轶 熊婷婷 何梦婕 孙瑾 陈芳 孙倩茹 王婷 《局解手术学杂志》 2017年第11期796-799,共4页

目的探讨Klotho逆转乳腺癌紫杉醇耐药的分子机制。方法 Western blot法检测乳腺癌细胞MCF-7与紫杉醇耐药的乳腺癌细胞MCF-7/PTX中Klotho的表达情况,MTT法检测Klotho对MCF-7/PTX细胞紫杉醇耐药的影响;Western blot法考查Klotho与自噬抑制... 目的探讨Klotho逆转乳腺癌紫杉醇耐药的分子机制。方法 Western blot法检测乳腺癌细胞MCF-7与紫杉醇耐药的乳腺癌细胞MCF-7/PTX中Klotho的表达情况,MTT法检测Klotho对MCF-7/PTX细胞紫杉醇耐药的影响;Western blot法考查Klotho与自噬抑制剂3-methyladenine(3-MA)对MCF-7/PTX细胞Beclin1蛋白表达的影响,并利用MTT法检测Klotho与3-MA对该细胞紫杉醇耐药的影响。结果 MCF-7/PTX细胞中Klotho的表达较MCF-7细胞低,Klotho可增强MCF-7/PTX细胞对紫杉醇的敏感性;MCF-7/PTX细胞中Beclin1表达较MCF-7细胞高,而Klotho与3-MA均可降低该细胞中Beclin1的表达,且Klotho对该细胞紫杉醇耐药的逆转作用与3-MA相仿。结论乳腺癌细胞的紫杉醇耐药与Klotho表达有关,Klotho可通过抑制自噬进而逆转乳腺癌紫杉醇耐药。 展开更多

关键词 KLOTHO 自噬 乳腺癌 紫杉醇 耐药

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阿司匹林对抑制结肠癌小鼠肝转移的作用及机制研究

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作者 袁文 陈秋娟 +4 位作者 刘鑫 杨自豪 刘平 龙方懿 王婷 《局解手术学杂志》 2017年第5期319-323,共5页

目的探讨阿司匹林抑制结肠癌小鼠肝转移的作用及可能机制。方法 32只BALB/C小鼠注射CT26结肠癌细胞建立结肠癌肝转移模型,死亡3只,得到对照组15只和实验组14只,对照组给予生理盐水灌胃0.2 mL/d,实验组给予阿司匹林灌胃30 mg/kg。干预30 ... 目的探讨阿司匹林抑制结肠癌小鼠肝转移的作用及可能机制。方法 32只BALB/C小鼠注射CT26结肠癌细胞建立结肠癌肝转移模型,死亡3只,得到对照组15只和实验组14只,对照组给予生理盐水灌胃0.2 mL/d,实验组给予阿司匹林灌胃30 mg/kg。干预30 d后处死小鼠并开腹剥离肝脾计算肝重量及转移瘤数量,免疫组化法进行HE和CD31染色,观察肿瘤转移和血管形成情况。Western blot法分析VEGF及cox-2蛋白表达量。结果实验组小鼠平均肝重及肝转移瘤结节数均显著低于对照组(P<0.05);病理检查结果显示实验组小鼠肝肿瘤细胞的数量及肝新生血管均显著少于对照组(P<0.05);Western blot结果显示阿司匹林干预后CT26细胞的VEGF及cox-2表达均显著下调(P<0.05)。结论阿司匹林可通过下调VEGF及cox-2蛋白的表达抑制结肠癌肝转移肿瘤的增殖及血管生成,从而抑制结肠癌细胞的肝转移,达到治疗的目的。 展开更多

关键词 结肠癌 肝转移 阿司匹林 血管内皮生长因子

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新型口腔凝胶对大鼠牙龈炎的治疗作用

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作者 马凯婷 王慧珊 +2 位作者 洪智 杜俊蓉 龙方懿 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期29-32,共4页

目的研究新型口腔凝胶对大鼠牙龈炎的治疗作用。方法通过临床正畸用钢丝结扎健康SD大鼠左上颌第二磨牙(M2)颈部,每天给予大鼠10%高糖水浸饲料,连续2周,诱导大鼠实验性牙龈炎。选取模型成功的大鼠,随机分为模型组和口腔凝胶组,另设不做... 目的研究新型口腔凝胶对大鼠牙龈炎的治疗作用。方法通过临床正畸用钢丝结扎健康SD大鼠左上颌第二磨牙(M2)颈部,每天给予大鼠10%高糖水浸饲料,连续2周,诱导大鼠实验性牙龈炎。选取模型成功的大鼠,随机分为模型组和口腔凝胶组,另设不做处理的对照组。治疗7 d后,观察大鼠的探诊深度、龈沟出血指数和牙龈指数等临床指标,通过q-PCR检测白细胞介素(IL)-6、IL-1βmRNA的含量,HE染色观察牙龈组织病理学的改变。结果与模型组比较,治疗7 d后,口腔凝胶组大鼠的牙龈红肿明显减轻,探诊深度、龈沟出血指数和牙龈指数均有所下降,IL-6、IL-1βmRNA的含量也明显降低,牙龈组织水肿明显改善。结论新型口腔凝胶可改善大鼠实验性牙龈炎的临床指标,并缓解其症状。 展开更多

关键词 口腔凝胶 牙龈炎 探诊深度 龈沟出血指数 牙龈指数 炎症 组织水肿 治疗

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新型益生菌制剂对小鼠实验性牙周炎的防治作用

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作者 王慧珊 杨雪琴 +2 位作者 薛丽 杜俊蓉 龙方懿 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2023年第6期671-674,共4页

目的研究嗜酸乳杆菌、唾液链球菌K12、唾液链球菌M18混合配制的新型益生菌制剂对小鼠实验性牙周炎的防治作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型组、益生菌组,模型组和益生菌组小鼠通过丝线结扎法诱导实验性牙周炎模型,益生... 目的研究嗜酸乳杆菌、唾液链球菌K12、唾液链球菌M18混合配制的新型益生菌制剂对小鼠实验性牙周炎的防治作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型组、益生菌组,模型组和益生菌组小鼠通过丝线结扎法诱导实验性牙周炎模型,益生菌组小鼠于结扎后第2天给予益生菌治疗,每天两次,共计14 d,空白对照组和模型组小鼠给予等量超纯水。14 d后,处死小鼠并取右上颌牙齿和牙龈组织,用于生化和病理检测。结果新型益生菌制剂可显著改善实验性牙周炎导致的牙槽骨吸收,改善牙周组织结构损伤并降低牙龈炎症因子的表达。结论新型益生菌制剂可缓解小鼠实验性牙周炎导致的牙周损伤。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌 唾液链球菌K12 唾液链球菌M18 实验性牙周炎 牙槽骨吸收 促炎因子

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低氧诱导因子-1α、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E在人乳腺癌组织中的表达及其意义 被引量：3

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作者 龙方懿 印国兵 +4 位作者 刘智敏 吴婷婷 贾朝莉 杨俊艳 刘小花 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第7期884-887,共4页

目的探讨低氧诱导因子-1α(Hgpoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E(E-cadherin)在人乳腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测术前未接受过放疗、化疗及激素治疗的69名患者乳腺癌组织标本... 目的探讨低氧诱导因子-1α(Hgpoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E(E-cadherin)在人乳腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测术前未接受过放疗、化疗及激素治疗的69名患者乳腺癌组织标本中HIF-1α、Twist和E-cadherin的表达,并分析三者表达的相关性。结果在69份乳腺癌组织标本中,HIF-1α、Twist和E-cadherin的阳性表达率分别为71.01%(49/69)、57.97%(40/69)和50.72%(35/69);HIF-1α、Twist和E-cadherin的阳性表达率与TNM分期和腋淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),与患者年龄、肿瘤大小和病理类型无关(P>0.05)。HIF-1α与Twist的表达呈显著正相关(r=0.286,P<0.05),Twist与E-cadherin的表达呈显著负相关(r=-0.371,P<0.01)。结论 HIF-1α、Twist和E-cadherin在乳腺癌中的表达情况可作为监测乳腺癌发展的指标。 展开更多

关键词 乳腺癌 低氧诱导因子 TWIST E-cadherin

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低氧诱导因子-1α和上皮间质转化相关蛋白在甲状腺滤泡状癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1

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作者 龙方懿 杨俊艳 +4 位作者 刘智敏 贾朝莉 刘小花 董超然 王旎 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第12期1671-1675,1679,共6页

目的探讨低氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和上皮间质转化(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)相关蛋白在甲状腺滤泡状癌(Follicular thyroid carcinoma,FTC)组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法... 目的探讨低氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和上皮间质转化(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)相关蛋白在甲状腺滤泡状癌(Follicular thyroid carcinoma,FTC)组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测42份FTC组织中HIF-1α、锌指转录因子(Snail)、波形蛋白(Vimentin)和钙黏蛋白E(E-cadherin)的表达;MTT法检测不同浓度CoCl2对FTC WRO细胞增殖活力的影响;RT-PCR法检测不同浓度CoCl2对WRO细胞HIF-1α基因mRNA转录水平的影响;免疫荧光法观察150μmol/L CoCl2处理24 h的WRO细胞中HIF-1α蛋白的核定位;Western blot检测150μmol/LCoCl2处理不同时间对WRO细胞中HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白表达的影响;Transwell小室试验检测150μmol/LCoCl2处理24 h对WRO细胞中侵袭及迁移能力的影响。结果在42份FTC组织中,HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达与多项临床指标相关,且4者表达显著相关(P<0.05);CoCl2可抑制WRO细胞的增殖活力;随着CoCl2浓度的增高,WRO细胞中HIF-1α基因mRNA的转录水平先增高然后趋于平稳;150μmol/L CoCl2处理24 h的WRO细胞内HIF-1α蛋白发生核转位;CoCl2处理的WRO细胞中随着HIF-1α蛋白表达的增多,Snail和Vimentin蛋白的表达逐渐增多,E-cadherin蛋白的表达逐渐减少(P<0.05);150μmol/L CoCl2处理24 h后,侵袭、迁移细胞数目较对照组明显增加。结论 HIF-1α能够通过上调Snail与Vimentin的表达,下调E-cadherin的表达,进而促进FTC EMT的发生。 展开更多

关键词 低氧诱导因子-1Α 甲状腺滤泡状癌 上皮间质转化

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