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抗血管内皮生长因子受体2双价单链抗体的构建表达及其活性研究
被引量:
2
1
作者
丁笠
王秀云
+5 位作者
齐海迪
李海鑫
周雅琼
陈耀祖
张娟
王旻
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期1-6,共6页
为了竞争性抑制血管内皮生长因子(VEGF)与其受体(VEGFR-2)的结合,构建表达了能够与VEGFR-2胞外3区(KDR3)特异结合的双价单链抗体(bivalent single-chain Fv,BsFv),并鉴定其生物活性。以KDR3特异结合单链抗体AK404(scFv AK404)基因为模板...
为了竞争性抑制血管内皮生长因子(VEGF)与其受体(VEGFR-2)的结合,构建表达了能够与VEGFR-2胞外3区(KDR3)特异结合的双价单链抗体(bivalent single-chain Fv,BsFv),并鉴定其生物活性。以KDR3特异结合单链抗体AK404(scFv AK404)基因为模板,设计引物引入中间连接肽(G4S)3连接两个scFv片段,将其克隆入原核表达载体pET22b,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物依次经过镍柱亲和层析纯化和透析复性;基于生物膜层表面干涉技术(Bio-LayerInterferometry,BLI)技术的体外亲和力监测实验和VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖实验鉴定表达产物与KDR结合的活性。酶切鉴定和DNA测序结果表明BsFv构建成功;SDS-PAGE显示37℃下1 mmol/L IPTG诱导细菌6 h获得包涵体,经镍柱亲和层析纯化和透析复性得到纯度为90%的BsFv;经Western blotting鉴定为目的蛋白;体外结合实验表明:BsFv特异性结合KDR胞外3区的亲合力约为单价抗体AK404的2倍;内皮细胞增殖抑制实验表明:BsFv可剂量依赖性地抑制HUVEC细胞增殖,且其抑制效果强于AK404。上述结果表明:BsFv在抗血管生成活性方面比其scFv具有明显优势,为进一步用于抗血管生成抗肿瘤治疗和肿瘤诊断奠定了基础。
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关键词
血管内皮生长因子受体2
双价单链抗体
生物膜层表面干涉技术
抗血管生成抗肿瘤治疗
原文传递
亲水突变法提高抗VEGFR2单链抗体的体外亲和力
被引量:
1
2
作者
齐海迪
缪小牛
+3 位作者
张娟
谷凯
张斯维
王旻
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1323-1328,共6页
为了提高抗VEGFR2单链抗体AK404R的亲和力,本研究采用亲水突变法将AK404R的重链CDR3区进行突变,建立次级突变单链抗体库。利用噬菌体展示技术从次级突变库中筛选具有抗VEGFR2特异性、高亲和力抗体,获得的抗体突变株经大肠杆菌HB2151分...
为了提高抗VEGFR2单链抗体AK404R的亲和力,本研究采用亲水突变法将AK404R的重链CDR3区进行突变,建立次级突变单链抗体库。利用噬菌体展示技术从次级突变库中筛选具有抗VEGFR2特异性、高亲和力抗体,获得的抗体突变株经大肠杆菌HB2151分泌表达,镍亲和色谱柱纯化,并采用竞争性ELISA法、生物信息学方法分别对其亲和力和结构进行了分析。本研究最终建立了6.4×105的次级突变单链抗体库,其中两株突变株的亲和力有明显提高,两株突变株经分离纯化得到电泳纯的蛋白,竞争性ELISA结果显示突变体WZ01和WZ02的亲和力比亲本提高了3倍;生物信息学方法分析突变体与抗原的作用面增大、契合紧密,这可能是亲和力提高的原因之一。研究结果表明,在重链CDR3区引入亲水性氨基酸构建抗体突变库,可有效提高scFv的亲和力。
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关键词
VEGFR2
亲水突变
亲和力成熟
噬菌体展示
单链抗体
原文传递
基于扩展置信规则库的海盗袭击事件风险预测
被引量:
2
3
作者
吕靖
齐海迪
李宝德
《交通运输系统工程与信息》
EI
CSCD
北大核心
2022年第3期247-254,266,共9页
为有效应对海盗袭击事件,减少可能产生的损失,本文提出一种新的基于扩展置信规则库(EBRB)联合优化的海盗袭击事件风险预测模型。通过引入Relief F算法和差分进化算法,从结构和参数两个角度对EBRB系统进行优化,以确保EBRB系统具有最优的...
为有效应对海盗袭击事件,减少可能产生的损失,本文提出一种新的基于扩展置信规则库(EBRB)联合优化的海盗袭击事件风险预测模型。通过引入Relief F算法和差分进化算法,从结构和参数两个角度对EBRB系统进行优化,以确保EBRB系统具有最优的参数数量和取值,利用实际海盗事件数据集进行模型验证。结果显示,联合优化的EBRB系统预测结果与实际情况的拟合效果较好,相对于初始的EBRB系统,联合优化EBRB系统将海盗事件的风险预测准确性提高了60%。此外,与现有其他预测模型对比发现,基于联合优化EBRB系统的预测模型在提高预测准确性方面具有一定的优势。
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关键词
水路运输
风险预测
扩展置信规则库
海盗袭击
海上运输安全
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职称材料
基于磁生电原理的手摇式便携加温盒
被引量:
3
4
作者
常伟斌
王飞奇
+3 位作者
齐海迪
贾永凯
王桂民
韦依
《科技创新导报》
2019年第11期110-112,共3页
"节能减排"是当今中国乃至世界都极为看重的问题,而当下又是生活节奏极快的时代,人们旅游、外出或是忙于完成某种工作等很多时候都会面临一个问题--快捷食品不够健康,携带食物易变凉。本文创新性地利用磁发电原理,设计出一款...
"节能减排"是当今中国乃至世界都极为看重的问题,而当下又是生活节奏极快的时代,人们旅游、外出或是忙于完成某种工作等很多时候都会面临一个问题--快捷食品不够健康,携带食物易变凉。本文创新性地利用磁发电原理,设计出一款基于磁生电原理的手摇式便携加温盒。通过手摇手柄使得盒盖中的磁极转动,进而产生变化的磁场。固定在盒盖内的线圈因切割磁感线产生电流,电流流经盒体内的发热电阻产生热量加热食物。本装置操作简单,方便实用,能够实现节能减排的目的,有很好的发展前景。
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关键词
节能减排
便携饭盒
行星齿轮机构
磁生电原理
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职称材料
基于Android系统公交出行APP的研究
5
作者
于淼
赵景京
+2 位作者
栾广钰
齐海迪
杨冰冰
《中小企业管理与科技》
2019年第12期160-161,共2页
公交出行是当下最普遍快捷的公共出行方式,越来越多的人选择公交出行。为方便大众出行,论文设计了针对公交出行的掌上APP,只要手机在手,足不出户就可以清楚公交车的运行情况,节省等待公交的时间或根据自身情况及时更改出行计划。用户可...
公交出行是当下最普遍快捷的公共出行方式,越来越多的人选择公交出行。为方便大众出行,论文设计了针对公交出行的掌上APP,只要手机在手,足不出户就可以清楚公交车的运行情况,节省等待公交的时间或根据自身情况及时更改出行计划。用户可以通过在APP上发布出行动态,寻找有同样出行需求的伙伴结伴而行,在增加了出行安全性的同时还可以节省花销。
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关键词
车载终端
GPS定位
交互工具
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职称材料
题名
抗血管内皮生长因子受体2双价单链抗体的构建表达及其活性研究
被引量:
2
1
作者
丁笠
王秀云
齐海迪
李海鑫
周雅琼
陈耀祖
张娟
王旻
机构
中国药科大学生命科学与技术学院
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期1-6,共6页
基金
国家自然科学基金(81072561)
江苏省自然科学基金(BK2009299)
江苏省普通高校研究生科研创新计划(CX10B-376Z)资助项目
文摘
为了竞争性抑制血管内皮生长因子(VEGF)与其受体(VEGFR-2)的结合,构建表达了能够与VEGFR-2胞外3区(KDR3)特异结合的双价单链抗体(bivalent single-chain Fv,BsFv),并鉴定其生物活性。以KDR3特异结合单链抗体AK404(scFv AK404)基因为模板,设计引物引入中间连接肽(G4S)3连接两个scFv片段,将其克隆入原核表达载体pET22b,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物依次经过镍柱亲和层析纯化和透析复性;基于生物膜层表面干涉技术(Bio-LayerInterferometry,BLI)技术的体外亲和力监测实验和VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖实验鉴定表达产物与KDR结合的活性。酶切鉴定和DNA测序结果表明BsFv构建成功;SDS-PAGE显示37℃下1 mmol/L IPTG诱导细菌6 h获得包涵体,经镍柱亲和层析纯化和透析复性得到纯度为90%的BsFv;经Western blotting鉴定为目的蛋白;体外结合实验表明:BsFv特异性结合KDR胞外3区的亲合力约为单价抗体AK404的2倍;内皮细胞增殖抑制实验表明:BsFv可剂量依赖性地抑制HUVEC细胞增殖,且其抑制效果强于AK404。上述结果表明:BsFv在抗血管生成活性方面比其scFv具有明显优势,为进一步用于抗血管生成抗肿瘤治疗和肿瘤诊断奠定了基础。
关键词
血管内皮生长因子受体2
双价单链抗体
生物膜层表面干涉技术
抗血管生成抗肿瘤治疗
Keywords
Vascular endothelial growth factor receptor 2 Bivalent single chain Fv Bio-layer interferometry Antiangiogenic oncotherapy
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
亲水突变法提高抗VEGFR2单链抗体的体外亲和力
被引量:
1
2
作者
齐海迪
缪小牛
张娟
谷凯
张斯维
王旻
机构
中国药科大学
出处
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1323-1328,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(81072561)
江苏省普通高校研究生科研创新计划(CX10B-376Z)
江苏省省级大学生实践创新训练计划项目
文摘
为了提高抗VEGFR2单链抗体AK404R的亲和力,本研究采用亲水突变法将AK404R的重链CDR3区进行突变,建立次级突变单链抗体库。利用噬菌体展示技术从次级突变库中筛选具有抗VEGFR2特异性、高亲和力抗体,获得的抗体突变株经大肠杆菌HB2151分泌表达,镍亲和色谱柱纯化,并采用竞争性ELISA法、生物信息学方法分别对其亲和力和结构进行了分析。本研究最终建立了6.4×105的次级突变单链抗体库,其中两株突变株的亲和力有明显提高,两株突变株经分离纯化得到电泳纯的蛋白,竞争性ELISA结果显示突变体WZ01和WZ02的亲和力比亲本提高了3倍;生物信息学方法分析突变体与抗原的作用面增大、契合紧密,这可能是亲和力提高的原因之一。研究结果表明,在重链CDR3区引入亲水性氨基酸构建抗体突变库,可有效提高scFv的亲和力。
关键词
VEGFR2
亲水突变
亲和力成熟
噬菌体展示
单链抗体
Keywords
VEGFR2
hydrophilic shuffling
affinity maturation
phage display
scFv
分类号
R963 [医药卫生—微生物与生化药学]
原文传递
题名
基于扩展置信规则库的海盗袭击事件风险预测
被引量:
2
3
作者
吕靖
齐海迪
李宝德
机构
大连海事大学
出处
《交通运输系统工程与信息》
EI
CSCD
北大核心
2022年第3期247-254,266,共9页
基金
国家自然科学基金(71974023)
国家社科基金重大研究专项基金(18VHQ005)
中央高校基本科研业务费专项资金(313209302)。
文摘
为有效应对海盗袭击事件,减少可能产生的损失,本文提出一种新的基于扩展置信规则库(EBRB)联合优化的海盗袭击事件风险预测模型。通过引入Relief F算法和差分进化算法,从结构和参数两个角度对EBRB系统进行优化,以确保EBRB系统具有最优的参数数量和取值,利用实际海盗事件数据集进行模型验证。结果显示,联合优化的EBRB系统预测结果与实际情况的拟合效果较好,相对于初始的EBRB系统,联合优化EBRB系统将海盗事件的风险预测准确性提高了60%。此外,与现有其他预测模型对比发现,基于联合优化EBRB系统的预测模型在提高预测准确性方面具有一定的优势。
关键词
水路运输
风险预测
扩展置信规则库
海盗袭击
海上运输安全
Keywords
waterway transportation
risk prediction
extended belief rule base
pirate attacks
maritime safety
分类号
U698 [交通运输工程—港口、海岸及近海工程]
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职称材料
题名
基于磁生电原理的手摇式便携加温盒
被引量:
3
4
作者
常伟斌
王飞奇
齐海迪
贾永凯
王桂民
韦依
机构
东北林业大学
出处
《科技创新导报》
2019年第11期110-112,共3页
文摘
"节能减排"是当今中国乃至世界都极为看重的问题,而当下又是生活节奏极快的时代,人们旅游、外出或是忙于完成某种工作等很多时候都会面临一个问题--快捷食品不够健康,携带食物易变凉。本文创新性地利用磁发电原理,设计出一款基于磁生电原理的手摇式便携加温盒。通过手摇手柄使得盒盖中的磁极转动,进而产生变化的磁场。固定在盒盖内的线圈因切割磁感线产生电流,电流流经盒体内的发热电阻产生热量加热食物。本装置操作简单,方便实用,能够实现节能减排的目的,有很好的发展前景。
关键词
节能减排
便携饭盒
行星齿轮机构
磁生电原理
Keywords
Energy conservation and emissions reduction
Portable container
Planetary gear
Principle of magnetoelectricity
分类号
G634 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
基于Android系统公交出行APP的研究
5
作者
于淼
赵景京
栾广钰
齐海迪
杨冰冰
机构
东北林业大学交通学院
出处
《中小企业管理与科技》
2019年第12期160-161,共2页
文摘
公交出行是当下最普遍快捷的公共出行方式,越来越多的人选择公交出行。为方便大众出行,论文设计了针对公交出行的掌上APP,只要手机在手,足不出户就可以清楚公交车的运行情况,节省等待公交的时间或根据自身情况及时更改出行计划。用户可以通过在APP上发布出行动态,寻找有同样出行需求的伙伴结伴而行,在增加了出行安全性的同时还可以节省花销。
关键词
车载终端
GPS定位
交互工具
Keywords
car-mounted terminal
GPS positioning
interactive tool
分类号
U580 [交通运输工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗血管内皮生长因子受体2双价单链抗体的构建表达及其活性研究
丁笠
王秀云
齐海迪
李海鑫
周雅琼
陈耀祖
张娟
王旻
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
原文传递
2
亲水突变法提高抗VEGFR2单链抗体的体外亲和力
齐海迪
缪小牛
张娟
谷凯
张斯维
王旻
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
原文传递
3
基于扩展置信规则库的海盗袭击事件风险预测
吕靖
齐海迪
李宝德
《交通运输系统工程与信息》
EI
CSCD
北大核心
2022
2
下载PDF
职称材料
4
基于磁生电原理的手摇式便携加温盒
常伟斌
王飞奇
齐海迪
贾永凯
王桂民
韦依
《科技创新导报》
2019
3
下载PDF
职称材料
5
基于Android系统公交出行APP的研究
于淼
赵景京
栾广钰
齐海迪
杨冰冰
《中小企业管理与科技》
2019
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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