为了探索几种蛋白质变性剂对多聚半乳糖醛酸酶的作用效果,以水溶性低分子量壳寡糖(COS,分子量约5000)作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶(PG)进行化学修饰,得到纯化的化学修饰酶(COS-PG),然后,测定不同蛋白变性剂(尿素、盐酸胍、SDS...为了探索几种蛋白质变性剂对多聚半乳糖醛酸酶的作用效果,以水溶性低分子量壳寡糖(COS,分子量约5000)作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶(PG)进行化学修饰,得到纯化的化学修饰酶(COS-PG),然后,测定不同蛋白变性剂(尿素、盐酸胍、SDS和苯酚)对纯化的PG和COS-PG催化活性的影响。结果表明,修饰后COS-PG的比活性是340.10 U(mg protein)1,比修饰前的PG提高了153%,COS-PG的糖含量比PG提高了43.11%,COS-PG的氨基修饰率为32.85%。SDS(十二烷基硫酸钠)、苯酚对PG和COS-PG活性有抑制作用,1 mmol L 1的SDS分别抑制了PG和COS-PG活性的80.99%和91.14%。10 mmol L 1的苯酚分别抑制了PG和COS-PG活性的34.08%和32.70%。低浓度的尿素和盐酸胍对PG有激活作用,5 mmol L 1的尿素使PG活性提高157.79%,3 mmol L 1的尿素使COS-PG的活性提高67.32%。2 mmol L 1的盐酸胍使PG活性提高57.64%,1 mmol L 1的盐酸胍使COS-PG的活性提高5.76%。展开更多
在海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on sodium alginate-chitosan,IPSAC)的实验中,当给酶量为1mgg-1载体时,酶活性为39.2U,酶活力回收为21.1%。在尼龙布固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on nylon,IPN)的实验中...在海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on sodium alginate-chitosan,IPSAC)的实验中,当给酶量为1mgg-1载体时,酶活性为39.2U,酶活力回收为21.1%。在尼龙布固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on nylon,IPN)的实验中,当每块尼龙布(3cm×3cm)给酶量为1mg时,酶活性为35.6U,酶活力回收为19.2%。木瓜蛋白酶(papain,PA)、IPSAC、IPN的最适pH分别为7.2、7.2和6.8。PA及IPSAC在70℃以下活性稳定;IPN在50℃以下活性稳定。IPSAC与IPN半衰期分别为59d和66d。展开更多
文摘为了探索几种蛋白质变性剂对多聚半乳糖醛酸酶的作用效果,以水溶性低分子量壳寡糖(COS,分子量约5000)作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶(PG)进行化学修饰,得到纯化的化学修饰酶(COS-PG),然后,测定不同蛋白变性剂(尿素、盐酸胍、SDS和苯酚)对纯化的PG和COS-PG催化活性的影响。结果表明,修饰后COS-PG的比活性是340.10 U(mg protein)1,比修饰前的PG提高了153%,COS-PG的糖含量比PG提高了43.11%,COS-PG的氨基修饰率为32.85%。SDS(十二烷基硫酸钠)、苯酚对PG和COS-PG活性有抑制作用,1 mmol L 1的SDS分别抑制了PG和COS-PG活性的80.99%和91.14%。10 mmol L 1的苯酚分别抑制了PG和COS-PG活性的34.08%和32.70%。低浓度的尿素和盐酸胍对PG有激活作用,5 mmol L 1的尿素使PG活性提高157.79%,3 mmol L 1的尿素使COS-PG的活性提高67.32%。2 mmol L 1的盐酸胍使PG活性提高57.64%,1 mmol L 1的盐酸胍使COS-PG的活性提高5.76%。
文摘在海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on sodium alginate-chitosan,IPSAC)的实验中,当给酶量为1mgg-1载体时,酶活性为39.2U,酶活力回收为21.1%。在尼龙布固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on nylon,IPN)的实验中,当每块尼龙布(3cm×3cm)给酶量为1mg时,酶活性为35.6U,酶活力回收为19.2%。木瓜蛋白酶(papain,PA)、IPSAC、IPN的最适pH分别为7.2、7.2和6.8。PA及IPSAC在70℃以下活性稳定;IPN在50℃以下活性稳定。IPSAC与IPN半衰期分别为59d和66d。
