林氏扇头蜱Kunitz型蛋白酶抑制剂Boophilin-H2原核表达及抗凝活性

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作者 赵培真 李尧 +6 位作者 余玲玲 谢子芳 陈杰 彭维祺 黎明成 赵建国 管庆丰 《中国热带医学》 CAS 北大核心 2024年第9期1106-1111,共6页

目的克隆林氏扇头蜱Boophilin-H2基因,构建重组表达载体,在大肠埃希菌中表达Boophilin-H2重组蛋白,并检测其抗凝活性。方法通过设计特异性引物,以林氏扇头蜱饱血成蜱RNA反转为cDNA为模板,PCR扩增Bo⁃ophilin-H2基因片段,克隆、连接到质粒... 目的克隆林氏扇头蜱Boophilin-H2基因,构建重组表达载体,在大肠埃希菌中表达Boophilin-H2重组蛋白,并检测其抗凝活性。方法通过设计特异性引物,以林氏扇头蜱饱血成蜱RNA反转为cDNA为模板,PCR扩增Bo⁃ophilin-H2基因片段,克隆、连接到质粒pSmart-I,构建重组表达载体pSmart-I/Boophilin-H2,BamHⅠ和XhoⅠ双酶切验证重组表达载体,将表达载体转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷低温诱导表达,Ni-NTA Resin纯化重组蛋白,12.5%SDS-PAGE检测重组蛋白表达及纯化情况,使用3.8%枸橼酸钠采血管收集新西兰大白兔股静脉血,离心分离吸取上层血浆,利用体外凝血四项检测盘检测重组蛋白抗凝活性。结果扩增并克隆出林氏扇头蜱Boophilin-H2基因片段387 bp,构建出原核表达载体pSmart-I/Boophilin-H2,双酶切验证载体构建成功,转入大肠埃希菌中经0.8 mmol/L IPTG诱导表达16 h,SDS-PAGE检测表明重组蛋白表达在上清液中,主要以可溶形式存在,编码的Boophilin-H2重组蛋白大小在35000左右,纯化Boophilin-H2重组蛋白进行抗凝活性检测表明,重组蛋白能显著延长活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT),并具有浓度依赖性,重组蛋白对凝血酶时间、凝血酶原时间、纤维蛋白原凝血时长的影响差异无统计学意义。结论本研究构建Boophilin-H2表达载体,其表达产物具有很强的APTT抗凝活性,揭示了重组蛋白发挥作用在内源凝血途径,可能作用于内源性凝血因子Ⅷ、Ⅺ、Ⅻ从而阻止血液凝固,为进一步蜱类防控疫苗和抗凝血药物的研发提供了参考依据和理论基础。 展开更多

关键词 林氏扇头蜱 Kunitz型蛋白酶抑制剂 原核表达 抗凝活性

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突变型顾客需求下的供应链系统稳定性 被引量：2

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作者 黎明成 《价值工程》 2015年第8期24-26,共3页

构建突变型顾客需求下的供应链系统模型,研究了供应链系统在OUT订货策略下的收敛时间与库存控制参数之间的关系,并进一步分析了稳定性与库存控制参数之间的关系,从而给企业在实际生产过程中的库存控制问题提供了一定的参考价值。

关键词 突变型需求 稳定性 库存控制 收敛时间

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完善农机法规宣传教育机制

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2000年第4期24-25,共2页

关键词 中国 农业机械化 政策法规 宣传教育

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以人为本构建农机监理人性化执法

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2006年第6期25-26,共2页

关键词 农机监理部门 人性化管理 行政执法 安全生产工作 农机监理人员 人文关怀 服务职能

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浅议农机违章行政处罚的一般原则

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作者 黎明成 《农机安全监理》 2002年第10期75-77,共3页

随着国家法制建设的不断完善,依法治国战略已贯穿于各行各业,作为农机管理部门现已实行了依法管理和依法治机的新机制。但是,处理农机违章是一项社会性、政策性很强的工作,关系到党和政府同人民群众之间的关系。因此,为体现农机监理机... 随着国家法制建设的不断完善,依法治国战略已贯穿于各行各业,作为农机管理部门现已实行了依法管理和依法治机的新机制。但是,处理农机违章是一项社会性、政策性很强的工作,关系到党和政府同人民群众之间的关系。因此,为体现农机监理机关“文明监理、优质服务”及严格执法的宗旨,在农机违章行政处罚中,必须坚持以下几项原则。 展开更多

关键词 农业机械 违章行为 行政处罚

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救死扶伤品德高 美名留传乡村间

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2003年第4期39-40,共2页

近日,在钦州市钦北区平吉镇那胜村里,传颂着农机监理员救死扶伤送伤员,做好事不留名的赞美声。 钦州市钦北区农机监理站的利艺、利历、黎作逸和林定超4名监理员前往平吉镇进行农机安全生产检查,当他们行至平吉镇那胜村附近一个路段时。

关键词 平吉镇 钦北区 伤员 监理员 钦州市

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农机监理业务公开的必要性

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2000年第6期26-27,共2页

关键词 农机 监理业务公开制度 必要性

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如何提高农机监理依法行政水平

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2001年第5期23-24,共2页

关键词 农机监理 依法行政执法 管理体制

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清理“黑车非驾”四到位

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作者 黎明成 《农机安全监理》 2002年第9期21-21,共1页

广西钦州市钦北区农机监理站重视“黑车非驾”的清理整顿,立足在“实”字做文章,使清理“黑车非驾”四到位。 (1)领导措施到位。成立县(区)、镇、村三级农机监理网络的清理工作领导小组,领导措施到位,层层签订责任状,将任务分解,包干到... 广西钦州市钦北区农机监理站重视“黑车非驾”的清理整顿,立足在“实”字做文章,使清理“黑车非驾”四到位。 (1)领导措施到位。成立县(区)、镇、村三级农机监理网络的清理工作领导小组,领导措施到位,层层签订责任状,将任务分解,包干到人,责任到人。 展开更多

关键词 黑车非驾 农机监理 清理整顿 组织领导 宣传 服务

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钦北区“安全生产月”无事故

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2002年第4期27-27,共1页

6月是全国第一个“安全生产月”。钦州市钦北区农机安全监理站狠抓农机安全生产宣传教育及清理整治“黑车非驾”活动,从源头上防范农机事故的发生,“安全生产月”平安度过,有力地促进了钦北区社会稳定和农村经济的快速健康发展。

关键词 安全生产月 钦北区 农机事故 黑车非驾 监理站 无事故 农村经济 宣传教育 强制报废 违章行为

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应对WTO农机安全监理必须强化三个意识

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2002年第5期12-12,共1页

我国加入WTO后,己按照承诺履行了自己的职责和义务,各行各业都重新调整了自己的机制和结构应对WTO的挑战。在这种新形势下,农机安全监理部门必须进一步加强队伍建设、法制建设、创新管理模式,才能应对WTO的挑战。

关键词 农机安全监理 农机手 农机安全生产 WTO

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田检路查应把握“四性”

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2003年第1期25-25,共1页

田检路查是农机监理工作的一项重要内容,切实做好田检路查是整治“黑车非驾”和消除农机事故隐患的重要手段,笔者认为,要从根本上抓好田检路查工作,应把握好以下“四性”。

关键词 田检 事故隐患 安全隐患 “四性” 黑车非驾

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实施“阳光工程” 促进政务公开

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2003年第4期29-29,共1页

近年来,钦州市钦北区农机监理站积极开展创建"文明监理,优质服务"窗口活动,实施"阳光工程",努力推进监理政务公开工作,取得了较好的效果.

关键词 监理员 农机监理 政务公开

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打假护"三农" 维权保春耕

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2005年第2期37-37,共1页

根据农业部《关于开展农资打假专项治理行动的通知》和《关于开展“放心农资下乡进村宣传周”活动的通知》精神，积极普及推广农机科技知识，维护农民消费者的合法权益，为农机及时备战春耕，净化农资市场，支持“三农”发展，钦州市钦... 根据农业部《关于开展农资打假专项治理行动的通知》和《关于开展“放心农资下乡进村宣传周”活动的通知》精神，积极普及推广农机科技知识，维护农民消费者的合法权益，为农机及时备战春耕，净化农资市场，支持“三农”发展，钦州市钦北区农机化管理中心于3月14日在板城镇举办了农机“3·15”维权打假活动，活动的主题是“打假护‘三农’，维权保春耕”。 展开更多

关键词 “三农” 打假 春耕 维权 专项治理 科技知识 合法权益 农资市场 管理中心 活动 宣传周 农业部 消费者 农机化 钦州市 精神 农民

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联合治“黑” 成效显著

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2004年第3期11-11,共1页

关键词 矿山 机动车 管理 驾驶执照

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做好农机安全监理工作的“五要素”

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2002年第6期17-17,共1页

一、农机监理必须走社会化管理的路子,构筑齐抓共管的格局.社会性强,涉及面广,是农机监理工作最基本的特点;农机安全生产,涉及到许多方面和部门,若只靠农机监理一个部门去管理,是没有出路的,因此,必须坚持走社会化管理的路子,构筑农机... 一、农机监理必须走社会化管理的路子,构筑齐抓共管的格局.社会性强,涉及面广,是农机监理工作最基本的特点;农机安全生产,涉及到许多方面和部门,若只靠农机监理一个部门去管理,是没有出路的,因此,必须坚持走社会化管理的路子,构筑农机安全生产齐抓共管的格局. 展开更多

关键词 农机监理人员 齐抓共管 格局 农机安全生产 农机手

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加强宣传教育之我见

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作者 黎明成 《农机安全监理》 2001年第11期11-11,共1页

关键词 农机监理工作 农机安全教育 宣传形式 宣传内容 队伍建设 安全生产

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抓队伍建设 树行业新风——钦州市农机安全监理所“窗口”建设展新貌

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作者 杨其松 黎明成 《广西农业机械化》 2001年第5期25-25,共1页

关键词 广西钦州 农机安全监理所 行风建设 人员素质

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钦北区推出“五个零”承诺服务

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作者 黎明成 《广西农业机械化》 2003年第6期38-38,共1页

关键词 农机手 承诺服务 服务承诺 商业服务 钦北区

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