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题名水牛小腔卵泡分离方法的初步研究
被引量：3
- 1
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作者
李翠玲
李楠
黄章虎
蒋建荣
陆凤花
石德顺
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机构
广西大学动物繁殖研究所
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出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第11期38-41,共4页
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基金
国家农业部转基因重大专项(2008ZX08007-003)
国家自然科学基金项目(31072033)
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文摘
本研究比较了不同的分离方法和酶作用的不同时间,以及不同的卵巢表面状态等因素对水牛小腔卵泡分离效果的影响,以期建立有效的水牛小腔卵泡分离体系。结果发现,采用机械与酶结合的方法分离水牛小腔卵泡时,平均每个卵巢获得5.64个小腔卵泡,显著高于机械法分离平均每个卵巢获得的3.12个小腔卵泡数(P<0.05);当胶原蛋白酶作用12或15min,每个卵巢平均获得的小腔卵泡数均显著高于5和10min处理组(P<0.05),两组之间没有显著差异(P>0.05),但当消化时间延长到20min时,卵泡膜被酶消化而破裂,没法分离到小腔卵泡;从表面小于2mm卵泡且无黄体的卵巢分离获得的小腔卵泡平均数显著高于表面无可见卵泡且有黄体的卵巢组的平均数(7.50和2.25,P<0.05)。以上结果表明,选用表面无小于2mm卵泡且无黄体的卵巢,采用机械与酶结合的方法,酶作用时间为12～15min分离水牛的小腔卵泡,可获得的小腔卵泡数量最多。
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关键词
水牛
小腔卵泡
分离
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Keywords
buffalo
small antral follicles
isolation
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分类号
S823.83
[农业科学—畜牧学]
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题名徒手克隆工具自制及改进
被引量：1
- 2
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作者
黄章虎
任艳萍
谭世俭
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机构
广西大学动物繁殖研究所
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出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第5期237-240,共4页
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基金
广西科学基金(桂科自0832039)
广西研究生教育创新计划资助项目
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文摘
徒手克隆技术(handmade somatic cell cloning,HMC)解决了由于昂贵设备对核移植技术应用的制约问题。通过徒手克隆刀的自制,不但进一步节省了成本,且更能符合使用者的习惯,提高总的切割效率。试验结果表明,利用自制克隆刀进行半卵法去核,可以达到每小时切割496枚卵母细胞的切割速度和88.14%的存活率;自制聚集针具有制作简单,可以打磨、效果好等特点,可以进一步简化和降低徒手克隆技术的成本,提高克隆效率。
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关键词
徒手克隆
自制克隆刀
自制聚集针
徒手切割方法
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Keywords
HMC
self-made micro-knife
Well of Well needle
HMC cutting method
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
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题名乳腺组织染色质免疫共沉淀方法的改进
- 3
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作者
任艳萍
罗婵
黄章虎
黄时海
石德顺
李湘萍
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机构
广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
遵义医学院基础医学院
广西大学生命科学与技术学院
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期80-86,共7页
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基金
国家"863"计划(2011AA100607)
高等学校博士学科点专项科研基金(20126401110001)
广西自然科学基金(2014GXNSFAA118084)资助项目
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文摘
作为研究基因表达调控的重要方法,近年来染色质免疫共沉淀(ChIP)得到了越来越广泛的应用,但有关将乳腺组织作为ChIP材料的研究及其方法尚未见报道。采用传统的组织ChIP试剂盒处理乳腺组织时,存在样品回收率低、乳脂/乳蛋白影响杂交效率和超声积热等问题,针对以上问题对乳腺组织ChIP方法进行改进。新方法省略组织均一化步骤、用酶切-超声法代替超声法进行染色质片段化、在细胞裂解和酶切步骤间增加洗涤步骤。结果显示,与脾脏组织相比,乳腺组织不适合进行组织均一化处理。酶切-超声法比超声法更适于对乳腺组织进行染色质片段化。采用改进后的ChIP方法获得的DNA样品中,靶序列得到显著的富集,所得的DNA样品能够满足测序(ChIP-Seq)要求。结果说明,改进后的方法适用于乳腺组织染色质免疫共沉淀,并为研究乳腺组织基因表达调控奠定了基础。
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关键词
表观遗传学
染色质免疫共沉淀
CHIP
乳腺
micrococcal
NUCLEASE
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Keywords
Epigenetics Chromatin Immunoprecipitation ChIP Mammary Gland Micrococcal Nuclease
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分类号
Q352
[生物学—遗传学]
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题名水牛精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果
- 4
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作者
谭世俭
谢忠君
石德顺
谢体三
黄章虎
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机构
广西大学动物繁殖研究所
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出处
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2010年第9期26-29,共4页
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基金
广西科学基金项目(桂科自0832039)
国家自然科学基金项目(30460090)
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文摘
为验证精子蛋白对卵母细胞的激活效果,为提高核移植胚胎的质量提供可行方法,通过比较不同裂解方法提取的水牛精子蛋白,不同浓度提取液显微注入猪卵母细胞,对水牛精子提取物的孤雌激活效果进行研究。结果表明:采用液氮反复冻融法和超声波破碎法预处理后提取的水牛精子提取物对猪体外成熟卵母细胞都有显著的孤雌激活效果。水牛精子蛋白浓度在0.53～5.52 mg/mL,注射剂量为2～4 pL时均可有效激活猪卵母细胞,综合效果以1.77 mg/mL较佳。
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关键词
精子提取物
卵母细胞
显微注射
孤雌激活
水牛
猪
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分类号
S828.3
[农业科学—畜牧学]
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题名水牛卵母细胞孤雌激活方法的优化
- 5
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作者
黄章虎
祝晓丽
任艳萍
范晓明
谭世俭
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机构
广西大学动物繁殖研究所
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出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第8期60-61,共2页
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基金
广西科学基金项目(桂科自0832039)
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文摘
为了研究离子霉素(Ion)在不同环境下对水牛孤雌激活效果的影响及水牛卵母细胞在6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)液中以聚集激活或分离激活方式对激活效果的影响。试验对比了水牛卵母细胞在25℃室温环境和38.5℃CO2培养箱环境下的Ion激活效果,还比较了水牛卵母细胞在6-DMAP液中进行聚集激活和分离激活的孤雌激活效果。结果表明:试验组8-细胞胚胎率(54.11%)和囊胚率(31.51%)均高于对照组的8-细胞胚胎率(51.68%)和囊胚率(27.52%),但无统计学差异;在6-DMAP液中分离激活组(1组)的囊胚率明显优于聚集激活组(2组)的囊胚率。
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关键词
水牛卵母细胞
孤雌激活
激活温度
激活状态
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分类号
S823.83
[农业科学—畜牧学]
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