密码子优化的植酸酶基因appA-P在毕赤酵母中的高效表达 被引量：9

1

作者 黄光瑞 田丽春 +2 位作者 黄生平 蒋思婧 马立新 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2007年第3期290-293,共4页

根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子使用偏爱性,对Escherichia coli来源的高比活植酸酶基因（appA）全面地进行密码子优化,人工合成了植酸酶基因（appA-P）,并将该基因克隆到毕赤酵母诱导型分泌表达载体pHBM905A上,获得重组质粒pHBM... 根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子使用偏爱性,对Escherichia coli来源的高比活植酸酶基因（appA）全面地进行密码子优化,人工合成了植酸酶基因（appA-P）,并将该基因克隆到毕赤酵母诱导型分泌表达载体pHBM905A上,获得重组质粒pHBM905A-appA-P,通过PEG1000转化法将线性化的重组质粒转化毕赤酵母GS115菌株,筛选得到一个高效表达植酸酶的重组菌株GS115-appA-P,在25℃摇瓶培养168 h后酶活力达到422 U/mL,该植酸酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为4.5,在20-50℃、pH1.0-6.0范围内较稳定. 展开更多

关键词 高比活植酸酶基因 毕赤酵母 密码子优化 高效表达

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三峡库区香溪河消落带土壤磷时间动态研究 被引量：7

2

作者 陶佳丽 徐萌 +2 位作者 黄生平 张成虎 王建柱 《人民长江》 北大核心 2017年第15期10-16,共7页

为探讨水华主要影响因子对三峡水库支流及库湾水华发生的影响,根据三峡库区水位变动规律,在香溪河消落带连续2 a(2013~2014年)开展了土壤磷素采样分析,并探讨了磷形态之间及其与土壤理化性质之间的相关性。研究结果显示:(1)2个水位涨落... 为探讨水华主要影响因子对三峡水库支流及库湾水华发生的影响,根据三峡库区水位变动规律,在香溪河消落带连续2 a(2013~2014年)开展了土壤磷素采样分析,并探讨了磷形态之间及其与土壤理化性质之间的相关性。研究结果显示:(1)2个水位涨落周期内,香溪河消落带土壤TP、水溶性磷(WS-P)、Al-P、闭蓄态磷(O-P)和Ca-P平均含量分别为749.43±56.43,9.05±1.10,26.41±5.55,46.62±7.57,112.49±17.47,228.76±11.26 mg/kg;消落带土壤中钙磷Ca-P和O-P是无机磷(IP)的主要赋存形态,Ca-P/IP均值为53.27%,O-P/IP均值为26.52%。(2)2014年消落带土壤TP和Ca-P与2013年相比呈增加的趋势;2个水位涨落周期内,土壤Al-P在泄水期含量显著高于出露期和蓄水期,而Fe-P在蓄水期含量显著高于泄水期和出露期(p<0.05),两者呈相反的消涨趋势;消落带各海拔高程磷形态含量有所差异,变异系数分析表明,周期性淹水可导致消落带不同高程磷形态含量的变化,并增加了其分布的空间异质性。(3)冗余分析(RDA)排序和相关性分析得出p H是影响Ca-P的主要因素,土壤p H偏碱性是导致土壤Ca-P含量上升的重要原因;土壤有机质(SOM)是影响Al-P,Fe-P,O-P含量的主要因素;Al-P,Fe-P含量呈显著性正相关,而均与Ca-P含量呈显著性负相关(P<0.05)。 展开更多

关键词 消落带 磷形态分析 时间动态分析 三峡库区

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植酸酶和甘露聚糖酶双功能毕赤酵母工程菌的构建和产酶分析 被引量：4

3

作者 黄生平 汪昌丽 +1 位作者 张桂敏 马立新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期280-284,共5页

根据已发表的植酸酶基因和甘露聚糖酶基因序列设计并合成引物,应用PCR技术,分别以土曲霉总DNA和质粒pHBM1201为模板,扩增出均不含假定信号肽序列的植酸酶基因phyA和甘露聚糖酶基因man,将它们各自克隆到毕赤酵母表达载体pHBM907C上,分别... 根据已发表的植酸酶基因和甘露聚糖酶基因序列设计并合成引物,应用PCR技术,分别以土曲霉总DNA和质粒pHBM1201为模板,扩增出均不含假定信号肽序列的植酸酶基因phyA和甘露聚糖酶基因man,将它们各自克隆到毕赤酵母表达载体pHBM907C上,分别得到重组质粒pHBM907C-phyA和pHBM907C-man。将质粒pHBM907C-phyA上由乙醇氧化酶(AOX1)启动子和终止子引导表达、酿酒酵母α信号肽序列引导分泌的phyA表达盒式结构插入到质粒pHBM907C-man中,构成双基因表达分泌质粒pHBM907C-phyA-man。pHBM907C-phyA-man经SalⅠ酶切线性后转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115,获得了同时分泌表达植酸酶和甘露聚糖酶的双功能酵母工程菌。研究了该酵母工程菌所分泌表达的重组植酸酶和甘露聚糖酶的相关酶学性质,并进行了双功能酵母工程菌的稳定性测试。 展开更多

关键词 植酸酶 甘露聚糖酶 毕赤酵母 共表达

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企业科研管理工作中的知识产权保护 被引量：2

4

作者 黄生平 《石油化工管理干部学院学报》 2009年第3期47-49,共3页

科研管理工作与知识产权保护密不可分,必须注重将知识产权保护融入科研管理工作,贯穿于科研工作的全过程。企业应从科研立项、科研过程、科研人才流动以及政策激励、提高意识等方面,采取具体措施,加强科研管理工作中的知识产权保护。

关键词 科研管理 知识产权 保护

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开拓技术市场 加速科技成果转化 被引量：1

5

作者 潘美岭 黄生平 《石油科技论坛》 1997年第6期34-36,共3页

随着社会主义市场经济体制的建立和发展,加速科技成果向现实生产力转化,对企业的生存和发展越来越显得突出和重要。因此我们狠抓了以下几项工作: 一、建立健全市场管理制度。

关键词 科技成果转化 江汉石油管理局 科技进步 测试技术 社会主义市场经济体制 科技人员 采油工艺研究院 市场管理制度 技术经营 环空测试

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一种新型巴斯德毕赤酵母表达载体的构建及甘露聚糖酶的表达

6

作者 黄生平 汪昌丽 马立新 《生物技术通讯》 CAS 2007年第2期220-223,共4页

目的:构建以带自身启动子的蔗糖转化酶基因(suc2)为选择标记的载体,用于外源基因在巴斯德毕赤酵母中的正确分泌表达。方法:根据已发表的蔗糖转化酶基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术,以啤酒酵母INVSC1总DNA为模板,扩增出包含自身... 目的:构建以带自身启动子的蔗糖转化酶基因(suc2)为选择标记的载体,用于外源基因在巴斯德毕赤酵母中的正确分泌表达。方法:根据已发表的蔗糖转化酶基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术,以啤酒酵母INVSC1总DNA为模板,扩增出包含自身启动子和终止区序列的suc2基因。将该基因与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了以suc2为选择标记的表达载体pPIC12K。将甘露聚糖酶基因man克隆入载体pPIC12K,用PEG/LiCl法转化毕赤酵母GS115菌株。以蔗糖为惟一碳源筛选转化子,利用底物平板检测筛选到的转化子中man基因的表达,并对重组表达菌株进行连续传代实验。结果:部分转化子周围产生明显的水解圈,证明甘露聚糖酶已经得到分泌表达;对重组表达菌株的连续传代实验证实了该表达载体具有良好的遗传稳定性。结论:以带自身启动子的suc2基因为选择标记的表达载体构建成功,并且这个新型表达载体能够对外源基因进行稳定有效的分泌表达。 展开更多

关键词 巴斯德毕赤酵母 表达载体 蔗糖转化酶基因 甘露聚糖酶 表达

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国际联盟与中国

7

作者 黄生平 邓建平 《历史学习》 2010年第5期16-17,共2页

国际联盟（简称“国联”）曾是世界历史上一个重要的国际组织，也是中学和大学历史教材的重要内容，例如人教版高中《历史·选修3》第二单元第二课、第四课分别就专节介绍了国际联盟的成立、概况以及它的活动与评价。

关键词 国际联盟 中国 世界历史 国际组织 历史教材 人教版

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加强知识产权保护 促进企业科技进步

8

作者 黄生平 《江汉石油职工大学学报》 2008年第5期89-91,共3页

要做好企业知识产权保护工作,领导重视是关键;提高全员知识产权保护意识是基础;加强管理是保证;服务于生产实践是知识产权保护工作的价值所在。只有这样才能从战略的高度充分认识知识产权工作的重要意义,在全员中树立用知识产权增强竞... 要做好企业知识产权保护工作,领导重视是关键;提高全员知识产权保护意识是基础;加强管理是保证;服务于生产实践是知识产权保护工作的价值所在。只有这样才能从战略的高度充分认识知识产权工作的重要意义,在全员中树立用知识产权增强竞争力、用知识产权振兴企业的观念。 展开更多

关键词 企业科技 知识产权 技术创新

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生态环保路扮靓“后花园”

9

作者 黄生平 袁细斌 《当代江西》 2006年第9期16-17,共2页

为服务崛起,江西12万交通职工用如椽的大笔,在赣鄱大地上纵横挥洒,建成高速公路1580公里,全面实现省会城市至各设区市及出省通道高速化。在加快交通发展的进程中,全省交通系统树立和落实以人为本,全面、协调、可持续的科学发展观,以实... 为服务崛起,江西12万交通职工用如椽的大笔,在赣鄱大地上纵横挥洒,建成高速公路1580公里,全面实现省会城市至各设区市及出省通道高速化。在加快交通发展的进程中,全省交通系统树立和落实以人为本,全面、协调、可持续的科学发展观,以实现交通节约型、效益型、环保型为着力点。 展开更多

关键词 交通系统 出省通道 工程建设者 公路文化 一级公路 景观要求 工程防护 互通立交 取土场 提升环

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疫情期间饮用水游离氯污染特征及风险评估

10

作者 刘沛友 赵文晋 +2 位作者 石越辉 燕蛟 黄生平 《能源与环境》 2021年第1期94-96,共3页

新型冠状病毒肺炎疫情期间,选取14个城市集中式饮用水水源作为监测与评估对象,分析水质游离氯的含量,采用污染指数法对水质污染现状进行评价、spearman秩相关系数法衡量水质污染变化趋势和标准指数法评价水质是否满足使用要求。结果表明... 新型冠状病毒肺炎疫情期间,选取14个城市集中式饮用水水源作为监测与评估对象,分析水质游离氯的含量,采用污染指数法对水质污染现状进行评价、spearman秩相关系数法衡量水质污染变化趋势和标准指数法评价水质是否满足使用要求。结果表明:14个饮用水水源的污染指数均小于1,未受到污染,说明在疫情期间,无论是水库型饮用水,还是河流型(地下河)饮用水,医疗机构加大废水消毒处理而排放的大量余氯未对饮用水水源地水质造成污染;14个饮用水中游离氯污染的秩相关系数rs绝对值均小于或等于临界值Wp,说明饮用水水质中游离氯的污染趋势变化平稳,饮用水被游离氯深度污染的风险较低;标准指数在0.1~0.2之间,14个饮用水水质满足使用要求,安全无风险。 展开更多

关键词 饮用水 游离氯 水质污染 污染趋势

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运用ABC分析法指导机关档案工作定级升级

11

作者 黄生平 戴晓鸿 《档案与建设》 北大核心 1991年第1期61-63,共3页

为使机关档案工作尽快适应我国经济改革形势需要,目前机关档案工作开展了上等级活动。这是我国档案管理事业上的一项重大改革,是加速和推动机关档案工作建设步伐,促进档案事业发展的一种新的有效的形式。

关键词 机关档案工作 ABC分析法 档案事业 档案业务 档案管理 职能活动 会计档案 改革形势 专门档案 档案基础

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浅析学生思想政治教育

12

作者 黄生平 《黑龙江科技信息》 2008年第33期227-227,278,共2页

思想政治素质是一国国民的根本素质之一,而思想政治教育是提升国民思想政治素养的重要手段和措施。学生时代是人的身心快速发展,不断成熟的阶段,提升国民的思想政治素养,理应抓住这一关键时期。

关键词 思想政治教育 社会意识 提高

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祥仔过“卡”

13

作者 黄生平 《阅读与写作》 1996年第5期35-36,共2页

抗战时期,珠江游击队在广州南郊活捉汉奸“十老虎”,得到一批金条,急需运回顺德西海根据地。郑队长将这任务交给了队员祥仔。“祥仔,你打算怎样回西海?”郑队长有点担心。

关键词 抗战时期 萝卜头 西海 汉奸 老虎 土匪 战士 队长 游击队 桑林

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毕节市中心城区道路交通噪声质量状况评价

14

作者 张春鑫 黄生平 +1 位作者 燕蛟 李钊 《资源节约与环保》 2016年第1期98-98,104,共2页

通过对2013年和2014年毕节市中心城道路区交通噪声常规数据统计分析,对该市声环境质量现状进行评价,对连续两年的监测结果进行比较分析。数据显示,与2013年相比,2014年全市道路交通噪声污染程度呈现出小幅度下降之势。

关键词 毕节市 交通噪声 质量状况评价

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思想政治教育问题探悉

15

作者 黄生平 《中国新技术新产品》 2008年第14期160-160,共1页

思想政治教育是追求和谐的社会性的思想活动。自改革开放以来,我国社会各种思潮相互激荡。充分发挥思想政治教育的意识形态功能正是用社会主义核心价值体系引领社会思潮的主要途径。

关键词 思想政治教育 主体性 社会主义核心价值 民族精神

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交通宣传有为才有位

16

作者 黄生平 《时代潮》 2005年第7期63-63,共1页

关键词 交通系统 对外宣传工作 舆论导向 政治事故 单位党组织 政治鉴别力 政治素养 政治素质 法律意识 信

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从高考评卷看考生答题

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作者 黄生平 《中学历史教学》 2009年第8期47-47,共1页

本人参加了广东2009年高考历史科第28题的评卷工作，下面对学生的答卷情况做一分析，供师生们参考。试题如下：

关键词 高考评卷 考生 评卷工作 第28题 答卷情况 历史科 学生 师生

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“崇尚科学 爱我中华”第13届全国少儿书画大赛暨青少年发明创新大赛来稿选登

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作者 郑舒涵 方柳(指导) +11 位作者 朱根 赵高岭(指导) 张恩熙 尤原谅(指导) 徐梦鑫 徐小东(指导) 范静萱 黄生平(指导) 倪冀梁 李艳青(指导) 孙嘉仪 马小红(指导) 《少儿科技》 2019年第12期F0003-F0003,共1页

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