补饲不同水平茉莉花渣对育成期水牛生长性能、肉用性能及血清生化指标的影响 被引量：5

1

作者 陈笑寒 黄才斌 +5 位作者 黄晨茜 黄雅鑫 朱远致 韦科龙 潘玉红 钟华配 《饲料研究》 CAS 北大核心 2022年第11期5-8,共4页

试验旨在研究不同茉莉花渣补饲水平对育成期水牛的生长性能、肉用性能及血清生化指标的影响。选取24头体重相近的12月龄育成期水牛,随机分成4组,每组6个重复,每个重复1头。对照组水牛饲喂基础日粮;试验组在基础日粮中分别添加200 (试验... 试验旨在研究不同茉莉花渣补饲水平对育成期水牛的生长性能、肉用性能及血清生化指标的影响。选取24头体重相近的12月龄育成期水牛,随机分成4组,每组6个重复,每个重复1头。对照组水牛饲喂基础日粮;试验组在基础日粮中分别添加200 (试验Ⅰ组)、400 (试验Ⅱ组)、600 g/(头·d)(试验Ⅲ组)茉莉花渣。结果显示:试验Ⅰ组和试验Ⅲ组水牛的平均日增重均显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅲ组水牛的胸宽、胸深显著优于对照组(P<0.05)。各组水牛的背膘厚度和眼肌面积差异不显著(P>0.05)。试验Ⅱ组水牛血清中总胆固醇、免疫球蛋白M含量显著低于对照组(P<0.05);各组水牛血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、甘油三酯、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、葡萄糖含量以及谷丙转氨酶活性差异均不显著(P>0.05)。研究表明,茉莉花渣可有效提高育成期水牛的平均日增重,降低水牛血清总胆固醇含量,对育成期水牛的免疫相关功能无不良影响,可作为新型日粮配方在育成牛养殖中推广应用。 展开更多

关键词 茉莉花渣 育成期水牛 生长性能 血清生化指标

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水牛DDR1基因生物信息学及细胞学功能分析

2

作者 陆杏蓉 段安琴 +6 位作者 邓廷贤 马小娅 杨春艳 郑海英 冯超 黄晨茜 尚江华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2023年第9期48-53,130,131,共8页

为了了解水牛DDR1蛋白的生物信息学和细胞学功能,试验采用ProtParam、ProtScale、SOPMA、SWISS-MODEL、PSORTⅡPredictio、NetPhos 3.1在线软件对水牛DDR1蛋白进行生物信息学分析,采用基因干扰的方法研究水牛DDR1基因对水牛乳腺上皮细... 为了了解水牛DDR1蛋白的生物信息学和细胞学功能,试验采用ProtParam、ProtScale、SOPMA、SWISS-MODEL、PSORTⅡPredictio、NetPhos 3.1在线软件对水牛DDR1蛋白进行生物信息学分析,采用基因干扰的方法研究水牛DDR1基因对水牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡、基因表达和迁移的影响。结果表明:水牛DDR1蛋白由915个氨基酸组成,分子式为C_(4538)H_(7029)N_(1261)O_(1287)S_(43),分子量为101222.99 u,半衰期为30 h,理论等电点为6.22,属于酸性、不稳定、可溶性蛋白质。DDR1蛋白的二级结构由256个α-螺旋(27.98%)、175个延伸链(19.13%)、55个β-折叠(6.01%)、429个无规则卷曲(46.89%)构成。亚细胞定位于内质网(44.4%)、高尔基体(33.3%)和质膜中(22.2%)中。DDR1蛋白共含有65个磷酸化位点,其中丝氨酸磷酸化位点35个,苏氨酸磷酸化位点18个,酪氨酸磷酸化位点12个。DDR1基因的最佳干扰片段为siDDR1-1,最佳干扰时间为48 h。DDR1基因干扰72小时时可极显著抑制水牛乳腺上皮细胞的增殖(P<0.01)。DDR1基因干扰显著或极显著上调凋亡相关基因BCL-2(P<0.01)、XIAP(P<0.05)、TP53(P<0.01)和增殖相关基因CCND1(P<0.01)的表达,下调凋亡相关基因CASPASE3(P<0.05)和CCDB1(P>0.05)的表达,但对细胞凋亡率的影响不显著(P>0.05)。此外,DDR1基因干扰可极显著降低水牛乳腺上皮细胞的迁移率(P<0.01)。说明DDR1基因干扰可极显著影响水牛乳腺上皮细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 DDR1基因 生物信息学 分析 乳腺上皮细胞 增殖 凋亡 迁移

原文传递

抑制BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响

3

作者 徐媛媛 郑海英 +8 位作者 杨春艳 邓廷贤 黄晨茜 冯超 陆杏蓉 段安琴 莫霞 马小娅 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2354-2362,共9页

【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过... 【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过实时荧光定量PCR检测Smad 4基因的表达水平,比较不同siRNA的干扰效率。然后利用筛选的干扰效率最高的siRNA,转染水牛卵巢颗粒细胞,通过CCK-8法检测对照组和干扰组细胞的增殖情况,实时荧光定量PCR检测上述两组细胞凋亡相关基因Bax和Bcl2,细胞周期相关调控基因CyclinD2和CDK4,以及类固醇激素合成相关基因Cyp19A1和Cyp11A1的表达水平,并通过ELISA检测雌二醇(E 2)和孕酮(P 4)的含量。【结果】基因干扰试验结果表明,3对siRNAs对Smad4基因的表达均具有极显著的干扰作用(P<0.01),其中Smad4-siRNA1的干扰效率最高,达到了64%。CCK-8检测结果显示,与对照组相比,干扰组细胞的增殖效率显著降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,干扰组Bcl2、CyclinD2、CDK4和Cyp19A1基因的表达量均显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01),而Cyp11A1基因的表达极显著上调(P<0.01),Bax基因的表达未受影响。ELISA检测结果表明,与对照组相比,干扰组雌二醇分泌量减少10.2%,孕酮的分泌量增加24.7%,差异均显著(P<0.05)。【结论】通过RNAi介导的Smad 4基因沉默对内源性BMP/Smad信号通路的中断不仅能够显著抑制水牛颗粒细胞的生长,而且能够诱导水牛颗粒细胞的凋亡,还会改变类固醇激素生成。BMP/Smad信号通路在调控水牛颗粒细胞生长和类固醇生成过程中具有重要的作用。 展开更多

关键词 水牛 BMP/Smad信号通路 Smad 4基因 颗粒细胞 RNA干扰 类固醇生成

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水牛腹泻细菌药敏试验 被引量：1

4

作者 朱远致 吕冠霖 +4 位作者 卓茜 黄晨茜 黄才斌 陈笑寒 黄雅鑫 《广西畜牧兽医》 2022年第2期76-78,共3页

为了筛选治疗水牛犊腹泻的敏感药物。本试验采集20头水牛犊的腹泻粪便,通过革兰氏染色后进行显微镜观察,然后分离培养并进行药敏试验。结果表明:病原菌大部分为革兰氏阴性杆菌,腹泻细菌对氧氟沙星和左氟沙星最敏感。此结果可供临床用药... 为了筛选治疗水牛犊腹泻的敏感药物。本试验采集20头水牛犊的腹泻粪便,通过革兰氏染色后进行显微镜观察,然后分离培养并进行药敏试验。结果表明:病原菌大部分为革兰氏阴性杆菌,腹泻细菌对氧氟沙星和左氟沙星最敏感。此结果可供临床用药参考。 展开更多

关键词 水牛 腹泻 药敏试验

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抗菌性茉莉花咀嚼片制备研究 被引量：2

5

作者 谢宏华 谢莹 +2 位作者 黄晨茜 梁跃辉 刘旭 《广东化工》 CAS 2022年第4期51-53,65,共4页

本文采用湿法制粒,以茉莉花干粉为主要原料,辅以其他药食同源的中药材,用正交试验和深度学习算法对茉莉花咀嚼片的主要配方进行了优化,可制得具备茉莉花特有香味、表面光滑美观、具有抑制幽门螺旋杆菌、祛除口臭功效的茉莉花咀嚼片。

关键词 茉莉花 咀嚼片 深度学习 正交实验 抗菌

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烧烫伤患者瘢痕整形围手术期护理干预效果的研究 被引量：3

6

作者 黄晨茜 陈磊 林巧 《中国医疗美容》 2021年第8期83-85,共3页

目的针对烧烫伤后瘢痕整形患者实施围手术期护理干预措施,并对其护理干预效果进行分析。方法选择76例烧烫伤后瘢痕整形患者为研究对象并分成两组,试验组与对照组各38例,给予不同的围手术期护理干预,对两组患者的护理效果进行对比。结果... 目的针对烧烫伤后瘢痕整形患者实施围手术期护理干预措施,并对其护理干预效果进行分析。方法选择76例烧烫伤后瘢痕整形患者为研究对象并分成两组,试验组与对照组各38例,给予不同的围手术期护理干预,对两组患者的护理效果进行对比。结果试验组患者的满意度94.47%高于对照组,且试验组的皮片融合时间、下床活动时间、康复出院时间、皮片成活率、皮肤恢复评分、机体功能评分、生活质量各项指标评分均优于对照组患者(P<0.05)。结论针对烧烫伤后瘢痕整形患者实施个性化围手术期护理干预措施,更有利于改善患者的术后恢复情况与提高患者满意度。 展开更多

关键词 烧烫伤 瘢痕整形 个性化 围手术期 护理干预

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水牛TRAIL基因克隆及生物信息学分析 被引量：2

7

作者 徐媛媛 莫霞 +6 位作者 黄晨茜 冯超 陆杏蓉 马小娅 杨春艳 郑海英 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第10期3693-3703,共11页

【目的】对水牛肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apotosis-inducing ligand,TRAIL)基因CDS序列进行克隆及序列分析,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析,为后期TRAIL蛋白调控水牛卵巢卵泡发育、... 【目的】对水牛肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apotosis-inducing ligand,TRAIL)基因CDS序列进行克隆及序列分析,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析,为后期TRAIL蛋白调控水牛卵巢卵泡发育、颗粒细胞增殖及凋亡的研究奠定基础。【方法】利用RT-PCR方法克隆水牛TRAIL基因CDS序列,对所获序列进行核苷酸序列、氨基酸序列相似性比对,构建系统进化树,并通过生物信息学软件分析TRAIL基因编码蛋白的结构和功能。【结果】试验成功克隆水牛TRAIL基因CDS序列,长864 bp,编码287个氨基酸;水牛TRAIL基因与牦牛、普通牛、山羊、绵羊、野猪、马、人、黑猩猩和家鼠的核苷酸序列相似性分别为99.2%、99.3%、95.9%、96.3%、84.7%、84.8%、81.3%、81.3%和70.0%。系统进化树结果表明,水牛与牦牛、普通牛的亲缘关系最近,与家鼠亲缘关系最远。氨基酸序列比对结果表明,在不同物种间,其跨膜结构域和TNF结构域序列保守性较高。TRAIL蛋白属于亲水性蛋白,存在1个跨膜结构域,140―285位氨基酸处为TNF区,具有29个磷酸化位点,无信号肽和糖基化位点,主要定位于细胞质中。TRAIL蛋白二级结构主要以无规则卷曲为主,约占51.57%,其次为延伸链(24.39%)和α-螺旋(24.04%)。TRAIL蛋白三级结构与二级结构一致,且与模型蛋白人TRAIL蛋白的相似性为75.53%。【结论】本试验克隆得到水牛TRAIL基因CDS区序列,大小为864 bp,编码287个氨基酸,水牛与牦牛、普通牛亲缘关系最近,TRAIL蛋白跨膜结构域和TNF结构域在不同物种间序列保守性较高,这可能与其功能有关。 展开更多

关键词 水牛 TRAIL基因 克隆 生物信息学分析

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热管式太阳能集热系统在郑州地区的供热特性研究 被引量：2

8

作者 郑慧凡 田国记 +2 位作者 李丹丹 黄晨茜 范晓伟 《流体机械》 CSCD 北大核心 2017年第6期73-76,72,共5页

搭建了热管式真空管太阳能集热装置供热性能测试平台,基于EES软件,建立了热管式集热装置供热性能仿真模型,试验验证了模型的正确性。分析了太阳能集热热水温度、集热效率、供热性能、贡献率等参数的变化规律。研究表明:太阳能集热效率... 搭建了热管式真空管太阳能集热装置供热性能测试平台,基于EES软件,建立了热管式集热装置供热性能仿真模型,试验验证了模型的正确性。分析了太阳能集热热水温度、集热效率、供热性能、贡献率等参数的变化规律。研究表明:太阳能集热效率和集热量随时刻的变化先上升后下降,集热效率最大达0.62、集热量最高可达8.02 k W。该系统对郑州地区某200 m2别墅供暖,11月至次年3月份的月平均供暖贡献率在40%~78%之间波动,平均值为54%,最大值达78%。 展开更多

关键词 热管式真空管 仿真 集热效率 贡献率

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疼痛护理在小儿漏斗胸Nuss术后的应用效果分析 被引量：2

9

作者 黄晨茜 《中外医疗》 2021年第23期111-114,共4页

目的探讨分析小儿漏斗胸Nuss术后疼痛护理的应用效果。方法方便选取该院2016年3月—2020年8月接受漏斗胸Nuss术的48例患儿作为该次研究对象,视患儿入院时间顺序分为对照组(常规护理)23例和干预组(疼痛护理)25例,比较两组患儿术后1-3 d... 目的探讨分析小儿漏斗胸Nuss术后疼痛护理的应用效果。方法方便选取该院2016年3月—2020年8月接受漏斗胸Nuss术的48例患儿作为该次研究对象,视患儿入院时间顺序分为对照组(常规护理)23例和干预组(疼痛护理)25例,比较两组患儿术后1-3 d的疼痛评分、哭闹发生率及护理满意度。结果术后第1天,对照组疼痛评分(6.35±2.23)分与干预组疼痛评分(6.02±2.03)分,差异无统计学意义(t=0.536,P>0.05);术后第2天及第3天对照组疼痛评分(5.16±1.05)分、(3.62±1.42)分均高于干预组疼痛评分(4.39±0.68)分、(2.71±1.31)分,差异有统计学意义(t=3.040、2.310,P<0.05);对照组哭闹发生率分别为95.65%、78.26%、43.47%均高于干预组48.00%、32.00%、4.00%,差异有统计学意义(P<0.05);对照组护理满意度52.17%(12/23)低于干预组护理满意度96.00%(24/25),差异有统计学意义(P<0.05)。结论疼痛护理应用于小儿漏斗胸Nuss术后的临床护理中,可有效缓解患儿术后各阶段的疼痛程度,减少患儿哭闹行为,降低患儿痛苦,提高护理满意度。 展开更多

关键词 疼痛护理 小儿漏斗胸 NUSS手术 应用效果

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一种新型复合热泵供热系统研究 被引量：1

10

作者 黄晨茜 胡秋月 朱新博 《建筑施工》 2021年第7期1367-1369,共3页

为打造"零能耗建筑",基于云智小镇项目,利用De ST-h建筑能耗模拟软件,模拟建立1栋2层别墅,在具体气象参数下模拟出该建筑物一年所需的生活用热水及采暖能耗情况。同时,创新性地提出了一种新型复合热泵近零能耗供热系统,应用... 为打造"零能耗建筑",基于云智小镇项目,利用De ST-h建筑能耗模拟软件,模拟建立1栋2层别墅,在具体气象参数下模拟出该建筑物一年所需的生活用热水及采暖能耗情况。同时,创新性地提出了一种新型复合热泵近零能耗供热系统,应用效果明显,社会效益和经济效益较好,验证了"零能耗建筑"的可行性,可为我国建筑节能领域"零能耗建筑"的发展提供借鉴。 展开更多

关键词 清洁能源 “零能耗建筑” COP 供暖

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太阳能喷射-压缩复合蓄冷系统的实验研究 被引量：1

11

作者 郑慧凡 黄晨茜 +1 位作者 范晓伟 张利贺 《太阳能学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期9-14,共6页

提出一种太阳能喷射-压缩复合蓄冷新系统,设计并搭建系统性能实验研究平台,以R134a为制冷剂,实验分析得出太阳能喷射-压缩复合蓄冷系统的最优运行工况。结果表明:系统能效比整体随蒸发温度的升高而升高;在不同的蒸发温度阶层内,系统能... 提出一种太阳能喷射-压缩复合蓄冷新系统,设计并搭建系统性能实验研究平台,以R134a为制冷剂,实验分析得出太阳能喷射-压缩复合蓄冷系统的最优运行工况。结果表明:系统能效比整体随蒸发温度的升高而升高;在不同的蒸发温度阶层内,系统能效比均呈先增加后降低的变化规律,系统功耗均呈先降低后上升的变化规律;在冷凝温度为32℃及中间温度为15℃时,存在最优的发生温度,最优发生温度介于76~78℃之间,此时能效比最高,可达2.65;总功耗最低,可达330 W。同样,系统在研究工况范围内存在最优的中间温度,当冷凝温度为35℃时,最优中间温度介于12~16℃之间,此时系统能效比最高,最高能效比可达2.6,总功耗呈不断减少的趋势,系统的总功耗最低为300 W。 展开更多

关键词 太阳能 蓄冷 空调 能效比 喷射-压缩

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中空钢网内模轻质隔墙在郑州金融岛的应用及技术改进 被引量：1

12

作者 朱新博 黄晨茜 胡秋月 《建筑施工》 2021年第6期1026-1029,共4页

为了选出最适合郑州金融岛项目的墙体,通过在施工现场建立样板区进行技术指标对比得出:中空钢网内模轻质隔墙具有施工速度更快、劳动强度更小、抗冲击力更大、单点吊挂力更大等优点。在施工过程中创新性地对中空钢网内模轻质隔墙吊挂件... 为了选出最适合郑州金融岛项目的墙体,通过在施工现场建立样板区进行技术指标对比得出:中空钢网内模轻质隔墙具有施工速度更快、劳动强度更小、抗冲击力更大、单点吊挂力更大等优点。在施工过程中创新性地对中空钢网内模轻质隔墙吊挂件安装位置不明确、防锈蚀等问题进行了技术改进,实践证明改进后的工艺做法效果显著,同时具有良好的社会效益和经济效益,可为类似工程施工提供参考。 展开更多

关键词 轻质隔墙 砌块墙 防腐蚀 挂载力

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可视输精枪在广西母水牛生产中的应用

13

作者 陈笑寒 黄才斌 +4 位作者 钟华配 黄晨茜 黄雅鑫 赵朝步 韦科龙 《畜禽业》 2021年第12期66-67,共2页

通过对可视输精枪在广西母水牛生产中的应用分析,介绍了其特点和不足,以及与传统把握式输精法的区别,并就如何提高人工授精受胎率进行了简要分析,以期为人工授精技术发展提供参考。

关键词 可视输精枪 人工授精 受胎率

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水牛断角裂角和断尾的治疗

14

作者 吕冠霖 黄雅鑫 +6 位作者 黄才斌 陈笑寒 黄晨茜 朱远致 钟华配 韦科龙 覃容 《兽医导刊》 2021年第21期123-124,共2页

水牛高密度规模化养殖场,大部分属于圈养,由于群体内存在抢食、争斗等行为,会出现水牛牛角不同程度断裂损伤,同时也会出现不同类型断尾情况。本文就养殖场内日常出现的一些水牛断角、裂角及断尾的情况、处理治疗方式、预防建议等方面进... 水牛高密度规模化养殖场,大部分属于圈养,由于群体内存在抢食、争斗等行为,会出现水牛牛角不同程度断裂损伤,同时也会出现不同类型断尾情况。本文就养殖场内日常出现的一些水牛断角、裂角及断尾的情况、处理治疗方式、预防建议等方面进行阐述,为兽医临床方面提供参考。 展开更多

关键词 水牛 断角 断尾 治疗

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一例奶水牛子宫炎的治疗及建议

15

作者 吕冠霖 朱远致 +6 位作者 刘一宏 钟华配 韦科龙 黄才斌 陈笑寒 黄雅鑫 黄晨茜 《广西畜牧兽医》 2021年第5期215-216,共2页

水牛子宫炎症是奶水牛产后或者流产后较为常见的一种生殖器官疾病,病原体的侵入容易导致母牛子宫内膜炎的发生,致使子宫内膜表面黏膜产生黏液性或脓性分泌物流出。子宫炎症在各个繁殖过程中都有可能发生,且发病率高,对母牛危害大,治疗... 水牛子宫炎症是奶水牛产后或者流产后较为常见的一种生殖器官疾病,病原体的侵入容易导致母牛子宫内膜炎的发生,致使子宫内膜表面黏膜产生黏液性或脓性分泌物流出。子宫炎症在各个繁殖过程中都有可能发生,且发病率高,对母牛危害大,治疗后易复发,不仅会使母牛正常的生理功能受到影响,长时间炎症也会引发母牛其他的生殖器官疾病,导致受孕难度增大、不孕等,影响水牛业发展。该病没有明显的季节性,只要是养殖母牛全年都有可能发生[1],随着广西奶水牛产业不断壮大,其危害显得更为突出。 展开更多

关键词 生殖器官疾病 牛子宫内膜炎 脓性分泌物 子宫炎症 奶水牛 繁殖过程 母牛 子宫内膜

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水牛人工授精培训新模式的探究

16

作者 朱远致 吕冠霖 +6 位作者 黄晨茜 曾令湖 李厅厅 郭艳霞 谢华德 江智杰 刘一宏 《兽医导刊》 2021年第23期100-101,共2页

随着水牛奶业产业不断壮大,对水牛优势品种改良需求尤为突出,而水牛人工授精技术是做好水牛品种改良和等方面的重要技术手段。近年来,农村农户对水牛人工授精技术渴望越发强烈,都希望得到学习培训的机会,掌握这一门关键技术。水牛人工... 随着水牛奶业产业不断壮大,对水牛优势品种改良需求尤为突出,而水牛人工授精技术是做好水牛品种改良和等方面的重要技术手段。近年来,农村农户对水牛人工授精技术渴望越发强烈,都希望得到学习培训的机会,掌握这一门关键技术。水牛人工授精培训新模式的探究在充分发挥传统模式优势基础上,创新探索新型水牛人工授精培训新模式,提高培训效率,扩大培训辐射面,让更多农户农技员学到技术,发挥所学技术为农村农户提供母牛品种改良服务,为三农事业做贡献,为乡村振兴助力。 展开更多

关键词 水牛 人工授精 培训

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光催化技术在温室气体治理上的研究发展

17

作者 黄晨茜 刘文占 +1 位作者 刘得章 王伟 《科学技术创新》 2020年第3期194-195,共2页

针对光催化技术在温室气体治理上的研究发展展开了论述。

关键词 温室气体 光催化技术 应用

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α-亚麻酸对水牛卵巢颗粒细胞体外培养的影响

18

作者 肖鹏 尚江华 +10 位作者 杨春艳 李孟琪 段安琴 马小娅 冯超 黄晨茜 张博 周金陈 韦科龙 郑威 郑海英 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2380-2387,共8页

【目的】研究α-亚麻酸(ALA)对水牛卵巢颗粒细胞体外培养过程中细胞活力、细胞凋亡、细胞周期相关基因表达及激素分泌功能的影响。【方法】为了筛选体外培养水牛卵巢颗粒细胞ALA最适浓度,在96孔板中加入起始细胞数量为1×104/mL的... 【目的】研究α-亚麻酸(ALA)对水牛卵巢颗粒细胞体外培养过程中细胞活力、细胞凋亡、细胞周期相关基因表达及激素分泌功能的影响。【方法】为了筛选体外培养水牛卵巢颗粒细胞ALA最适浓度,在96孔板中加入起始细胞数量为1×104/mL的水牛卵巢颗粒细胞,细胞贴壁12 h后更换含0(对照组)、10、50、100、200μmol/L ALA的培养液,在相同条件下处理24 h,用CCK-8进行细胞活力检测,筛选出最适处理浓度,并用于后续试验。后续试验分为对照组(0μmol/L)和处理组(50μmol/L)两组,用实时荧光定量PCR检测颗粒细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白1(p21)和增殖细胞核抗原(PCNA)基因的相对表达量,用免疫荧光对颗粒细胞中细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和细胞周期相关蛋白p21进行荧光检测和定量分析,用ELISA法检测培养液中水牛颗粒细胞分泌的雌二醇(E 2)和孕酮(P 4)含量。【结果】与对照组相比,水牛卵巢颗粒细胞经ALA处理24 h后,在10~50μmol/L范围内随着ALA浓度升高水牛卵巢颗粒细胞的细胞活力随之升高,处理浓度为50μmol/L时细胞活力相比对照组极显著提高(P<0.01),随着浓度继续增加,水牛卵巢颗粒细胞活力下降,200μmol/L时细胞活力极显著低于对照组(P<0.01),因此后续试验选用ALA的浓度为50μmol/L。与对照组相比,50μmol/L ALA处理后颗粒细胞中抗凋亡基因Bcl-2和增殖细胞核抗原基因PCNA相对表达量均无显著差异(P>0.05),但促凋亡基因Caspase-3和细胞周期基因p 21在mRNA和蛋白水平上的表达量均极显著降低(P<0.01),E 2和P 4水平显著或极显著增高(P<0.05;P<0.01)。【结论】培养液中添加50μmol/L ALA能够提升水牛卵巢颗粒细胞增殖活力、抗凋亡能力及激素分泌能力,本研究为调控水牛卵泡发育提供理论参考。 展开更多

关键词 α-亚麻酸(ALA) 水牛 颗粒细胞 增殖活力 基因表达

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