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用链佐霉素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型及中药治疗效果的研究 被引量：3
1
作者 李韬 陶吉英 +4 位作者 黄广燕 黄凌凌 黎秋萍 朱晓莹 张树球 《实用糖尿病杂志》 2012年第1期18-20,共3页
小白鼠高脂高糖喂养一个月后,用链佐霉素小剂量多次腹腔注射造模。测定造模前后血糖含量。造模成功后将造模小鼠分组,即模型组、治1组和治2组,另设正常组。治2组用舒糖宝治疗,治1组用盐酸二甲双胍治疗(标准药物对照组),模型组和正常组... 小白鼠高脂高糖喂养一个月后,用链佐霉素小剂量多次腹腔注射造模。测定造模前后血糖含量。造模成功后将造模小鼠分组,即模型组、治1组和治2组,另设正常组。治2组用舒糖宝治疗,治1组用盐酸二甲双胍治疗(标准药物对照组),模型组和正常组为不治疗组。结果正常组、模型组、治1组、治2组依次为,造模前血糖为6.25±0.92、6.52±1.15、6.90±0.74、6.67±1.22(mmol/L),各组间无显著性差异(P>0.05);造模后血糖为6.12±0.90、14.89±1.44、23.31±6.90、20.52±6.22(mmol/L),正常组明显低于造模组,模型组也明显低于治疗组(P<0.01和<0.05),造模组明显高于造模前,差异有统计学意义,P<0.01;治疗后血糖分别为5.88±0.77、14.01±4.60、15.13±6.46、11.80±4.79(mmol/L);正常组明显低于模型组和治疗组(P<0.01)但治疗组治疗后明显低于治疗前,差异有统计学意义,P<0.01;总胆固醇(TC)分别为1.29±0.29、1.87±0.52、1.62±0.22、1.90±0.67(mmol/L),模型组明显高于正常组(P<0.05);甘油三酯(TG)分别为1.53±0.45、1.17±0.37、0.84±0.26、0.87±0.25(mmol/L),治疗组明显低于正常组(P<0.05和<0.01),治2组低于模型组(P<0.01)。结论治疗后,治1组和治2组血糖均明显下降,甘油三酯降低。 展开更多
关键词 链佐霉素 2型糖尿病 血糖 治疗
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微生物源果胶酶在猪PK15细胞中异源表达及其酶学性质分析 被引量：4
2
作者 莫健新 王豪强 +3 位作者 黄广燕 蔡更元 吴珍芳 张献伟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期736-745,共10页
果胶是植物细胞壁组分之一,是畜禽饲料中主要的抗营养因子,影响畜禽对日粮中能量和氮的利用效率。果胶酶在自然界中广泛存在于细菌、酵母和丝状真菌等微生物中,对解除果胶的抗营养作用、提高饲料利用率具有良好的效果。为了探索在猪细... 果胶是植物细胞壁组分之一,是畜禽饲料中主要的抗营养因子,影响畜禽对日粮中能量和氮的利用效率。果胶酶在自然界中广泛存在于细菌、酵母和丝状真菌等微生物中,对解除果胶的抗营养作用、提高饲料利用率具有良好的效果。为了探索在猪细胞中表达微生物源果胶酶基因的可行性,本研究通过脂质体转染法将微生物源果胶酶基因pg5a、pgI、pga3A和pgaA导入猪PK15细胞中进行异源表达,利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法测定这4种基因编码果胶酶的酶活力。结果显示,4种果胶酶基因均能在猪PK15细胞中转录出mRNA,但只有pg5a和pgI适应猪细胞表达系统。其中,果胶酶PG5A的最高酶活为0.95 U/mL,最适作用pH为pH4.0,在pH4.6~6.0范围内维持46%以上的酶活;PGI在pH5.0处获得最高酶活,为0.30 U/mL,在pH4.0~6.0范围内维持35%以上的酶活。消化蛋白酶耐受实验结果显示,PG5A和PGI对胃蛋白酶和胰蛋白酶均有较强的耐受能力,用1 mg/mL的猪胃蛋白酶处理2 h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为76%和71%;用1 mg/mL的猪胰蛋白酶处理2 h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为44%和93%。综上所述,果胶酶基因pg5a和pgI能在猪细胞中正常表达,其编码的果胶酶对猪消化道pH条件和消化蛋白酶具有较强的耐受能力,可作为制备转果胶酶基因猪的候选基因。 展开更多
关键词 果胶酶 果胶 抗营养因子 转基因 猪
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舒糖宝口服液治疗2型糖尿病小鼠模型的效果观察 被引量：2
3
作者 朱晓莹 黄广燕 +3 位作者 黎秋萍 黄凌凌 陶吉英 张树球 《广西医学》 CAS 2013年第1期35-37,共3页
目的建立2型糖尿病小鼠模型,观察中药舒糖宝口服液对其血糖、血脂及尿素含量的影响。方法 35只昆明种小鼠给予高糖、高脂饮食4周后腹腔注射链佐霉素(STZ)建立2型糖尿病模型,随机分为模型组11只、舒糖宝组12只、二甲双胍组12只,另取10只... 目的建立2型糖尿病小鼠模型,观察中药舒糖宝口服液对其血糖、血脂及尿素含量的影响。方法 35只昆明种小鼠给予高糖、高脂饮食4周后腹腔注射链佐霉素(STZ)建立2型糖尿病模型,随机分为模型组11只、舒糖宝组12只、二甲双胍组12只,另取10只正常小鼠为对照组。舒糖宝组、二甲双胍组分别给予舒糖宝口服液和二甲双胍灌服,对照组与模型组给予蒸馏水灌服。观察并记录各组小鼠饮水情况;检测给药前后各组小鼠血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿素(Urea)含量。结果给药后,舒糖宝组、二甲双胍组小鼠每天饮水量少于对照组、模型组(P<0.01);舒糖宝组、二甲双胍组小鼠血糖、TG含量低于模型组(P<0.01);降糖率分别达42.50%和35.09%。结论舒糖宝口服液能有效降低2型糖尿病小鼠血糖、三酰甘油及饮水量。 展开更多
关键词 2型糖尿病 舒糖宝口服液 链佐霉素 小鼠 模型
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替代法评定玉米及其副产物对成年麒麟母鸡的营养价值 被引量：2
4
作者 吴浩浩 郭战胜 +7 位作者 黄广燕 赵师磊 杨晓华 曾向杰 吴征敏 程贵兰 AGUZEY Harryawudza 高振华 《中国饲料》 北大核心 2018年第17期32-36,共5页
本试验旨在利用替代法评定玉米及其副产物对麒麟母鸡的营养价值,为麒麟鸡精准营养提供基础资料。选用80日龄健康、体重相近[(1.40±0.2)kg]的麒麟母鸡32只,随机分成4组,每组设8个重复,分别饲喂基础饲粮、玉米饲粮(20%的玉米+80%基... 本试验旨在利用替代法评定玉米及其副产物对麒麟母鸡的营养价值,为麒麟鸡精准营养提供基础资料。选用80日龄健康、体重相近[(1.40±0.2)kg]的麒麟母鸡32只,随机分成4组,每组设8个重复,分别饲喂基础饲粮、玉米饲粮(20%的玉米+80%基础饲粮)、喷浆玉米皮饲粮(20%喷浆玉米皮+80%基础饲粮)和玉米胚芽粕饲粮(20%玉米胚芽粕+80%基础饲粮),试验采用全收粪法。预试期3 d,正试期4 d。结果表明:玉米,喷浆玉米皮和玉米胚芽粕的表观代谢能、氮校正表观代谢能及干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)、钙(Ca)、能量(GE)等养分的代谢率分别为15.10 MJ/kg、14.98 MJ/kg、95.16%、43.71%、45.98%、32.38%、51.07%、91.74%;11.01 MJ/kg、10.98 MJ/kg、62.76%、56.65%、80.26%、89.64%、44.23%、61.82%;10.83 MJ/kg、10.89 MJ/kg、65.02%、92.46%、84.15%、89.56%、47.82%、64.79%。玉米表观代谢能、氮校正表观代谢能和能量表观代谢率高于喷浆玉米皮和玉米胚芽粕(P<0.05),CP、EE、Ash的表观代谢率均低于喷浆玉米皮和玉米胚芽粕(P<0.05)。 展开更多
关键词 麒麟鸡 玉米副产物 营养价值 养分代谢率
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CRISPR/Cas13系统敲减HEK293T细胞ku70和lig4基因表达 被引量：1
5
作者 王豪强 李国玲 +7 位作者 黄广燕 李紫聪 郑恩琴 徐铮 杨化强 吴珍芳 张献伟 刘德武 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1414-1421,共8页
成簇的规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)系统是目前基因编辑、基因表达研究的热点,其中靶向RNA的CRISPR/Cas13系统的开发... 成簇的规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)系统是目前基因编辑、基因表达研究的热点,其中靶向RNA的CRISPR/Cas13系统的开发为RNA的干扰和编辑提供了新的方向。文中针对HEK293T细胞非同源末端连接(Nonhomologousendjoining,NHEJ)通路修复关键因子Ku70和Lig4的编码序列,设计并合成CRISPR/Cas13a、b系统相应的gRNA,检测其对ku70和lig4基因表达的影响。结果显示,Cas13a对ku70和lig4的RNA敲减效果可以达到50%以上,Cas13b对ku70和lig4的RNA敲减效果分别达到92%和76%;同时Cas13a、b系统能将Ku70和Lig4蛋白水平分别下调至68%和53%。CRISPR/Cas13系统可有效敲减HEK293T细胞RNA和蛋白质表达,为基因功能和调控研究提供一种新的策略。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas13 KU70 lig4 基因敲减
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Cas9融合RAD18因子提高HEK293T细胞的定点敲入效率
6
作者 黄广燕 王豪强 +2 位作者 李国玲 吴珍芳 张献伟 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期8-18,共11页
【目的】在哺乳动物细胞中,RAD51和RAD18是调节同源定向修复和非同源末端连接的关键因子。本研究目的在于探讨这2个因子在eSpCas9系统中对HEK293T细胞的定点敲入(Knock-in,KI)效率的影响,进而提高KI效率。【方法】通过构建eSpCas9-RAD51... 【目的】在哺乳动物细胞中,RAD51和RAD18是调节同源定向修复和非同源末端连接的关键因子。本研究目的在于探讨这2个因子在eSpCas9系统中对HEK293T细胞的定点敲入(Knock-in,KI)效率的影响,进而提高KI效率。【方法】通过构建eSpCas9-RAD51、eSpCas9-RAD18融合蛋白以及过表达RAD51、RAD18载体,比较它们的KI效率差异。【结果】eSpCas9-RAD18系统可以显著提高HEK293T细胞KI效率,约为原来eSpCas9系统的1.4~1.9倍(P<0.01),而e Sp Cas9-RAD51系统和过表达RAD51/RAD18对KI效率无显著提高作用。【结论】本研究构建的eSpCas9-RAD18系统可以有效地提高HEK293T细胞的KI效率,可为基因编辑、基因治疗及定点转基因提供一种新的辅助整合工具。 展开更多
关键词 基因编辑 CRISPR/Cas9系统 基因敲入 RAD18 融合蛋白
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MEK抑制剂PD0325901显著提高猪胎儿成纤维细胞ssODN介导的HDR效率
7
作者 欧浩 李国玲 +5 位作者 王豪强 黄广燕 蔡更元 李紫聪 吴珍芳 张献伟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期327-336,共10页
基因组DNA发生双链断裂(double strand break, DSB)后主要通过同源定向修复(homologous-directed repair, HDR)和非同源末端连接(nonhomologous end joining, NHEJ)两种途径进行修复,其中单链寡聚核苷酸(single-stranded oligodeoxyribo... 基因组DNA发生双链断裂(double strand break, DSB)后主要通过同源定向修复(homologous-directed repair, HDR)和非同源末端连接(nonhomologous end joining, NHEJ)两种途径进行修复,其中单链寡聚核苷酸(single-stranded oligodeoxyribonucleotide, ssODN)介导的同源定向修复是动物基因组常用的基因组定点修饰技术,具有较大的科研和应用价值。为提高猪基因组ssODN介导HDR效率,本研究以猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts, PFFs)为研究对象,利用丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase, MEK)抑制剂PD0325901培养细胞,研究其对HDR效率的影响及作用分子机理。结果显示,PD0325901能显著提高PFFs的G_2期和S期细胞群百分比,减少G_1期细胞群比率,促进HDR修复因子的表达。在最适浓度250 nmol/L时,PD0325901使ssODN介导的GFP报告载体的修复效率提高了58.8%;同时使PFFs基因组位点DMD和ROSA26定点修饰效率分别提高了48.16%和17.64%。本研究表明,MEK抑制剂PD0325901能显著提高猪基因组ssODN介导的同源定向修复效率,为高效制备定点基因修饰动物模型提供了新思路。 展开更多
关键词 MEK抑制剂 同源定向修复(HDR) PD0325901 基因编辑
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R290电动汽车热泵空调性能实验研究 被引量：4
8
作者 黄广燕 邹慧明 +3 位作者 唐明生 田长青 吴江 于卫滨 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期40-46,共7页
本文搭建了带水环路的R290电动汽车热泵空调实验台,研究了不同工况下系统的制冷性能和制热性能。实验结果表明:35℃常规制冷工况时,压缩机转速从1800 r/min增加到6600 r/min,系统制冷量从1789 W提升至4027 W,而系统COP从3.65下降至1.82... 本文搭建了带水环路的R290电动汽车热泵空调实验台,研究了不同工况下系统的制冷性能和制热性能。实验结果表明:35℃常规制冷工况时,压缩机转速从1800 r/min增加到6600 r/min,系统制冷量从1789 W提升至4027 W,而系统COP从3.65下降至1.82;45℃高温制冷工况时,压缩机转速从2700 r/min增加到4500 r/min,系统制冷量从1973 W提升至3031 W,而系统COP从2.10下降至1.88;在-20℃/20℃低温制热工况、压缩机转速6000 r/min时,系统制热量为2911 W,对应的系统COP为1.80;在-25℃/20℃低温制热工况、压缩机转速3600 r/min时,对应的系统制热量为1658 W、系统COP为2.16。同时发现采用水环路的系统形式,提高了系统的安全可靠性,但与常规循环系统相比,系统性能存在一定程度的衰减,制冷量衰减300~500 W,制热量衰减200~400 W。 展开更多
关键词 热泵 电动汽车 R290 系统性能
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