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植物苯丙氨酸解氨酶表达调控机理的研究进展 被引量:32
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作者 赵德刚 《贵州农业科学》 CAS 2017年第4期16-20,共5页
植物苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC 4.3.1.5)是苯丙烷类化合物代谢的关键限速酶,在次生代谢物合成及抗逆过程中有重要作用。从植物苯丙氨酸解氨酶的基本特性、蛋白定位、基因特点以及组织表达模式等方面,对近几年PAL在次生代谢物的生物合成和... 植物苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC 4.3.1.5)是苯丙烷类化合物代谢的关键限速酶,在次生代谢物合成及抗逆过程中有重要作用。从植物苯丙氨酸解氨酶的基本特性、蛋白定位、基因特点以及组织表达模式等方面,对近几年PAL在次生代谢物的生物合成和信号调控中的研究进展进行综述,旨在为苯丙烷合成途径中重要关键酶基因的多样性、表达调控机制复杂性和次生代谢物积累的分子机理以及苯丙氨酸解氨酶的利用研究提供理论依据和应用参考。 展开更多
关键词 苯丙氨酸解氨酶 苯丙烷类代谢物 基因表达调控 泛素化
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常压页岩气勘探开发关键技术进展及攻关方向 被引量:24
2
作者 何希鹏 何贵松 +5 位作者 高玉巧 张龙胜 贺庆 张培先 王伟 《天然气工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1-14,共14页
常压页岩气是中国页岩气增储上产的重要对象,具有广阔的资源前景,但规模效益开发仍面临多方面的技术瓶颈。为了推动常压页岩气实现规模效益开发,以四川盆地渝东南地区页岩气为研究对象,系统梳理和总结了常压页岩气的形成机理与富集理论... 常压页岩气是中国页岩气增储上产的重要对象,具有广阔的资源前景,但规模效益开发仍面临多方面的技术瓶颈。为了推动常压页岩气实现规模效益开发,以四川盆地渝东南地区页岩气为研究对象,系统梳理和总结了常压页岩气的形成机理与富集理论、渗流机理与开发技术、低成本工程工艺技术等方面的研究成果与技术进展,指出了中国南方复杂构造区常压页岩气效益开采面临的难题与挑战,并从甜点优选、开发技术政策、低成本钻井技术、高效压裂技术等方面探讨了常压页岩气勘探开发的攻关方向。研究结果表明:①地质勘探理论已明确了常压页岩气形成机理,建立了“生—排—滞—聚”的成藏模式,提出了“三因素控藏”的富集理论,建立了甜点目标综合评价体系;②开发技术上制定了“多层系、变井距、长水平段、小夹角、低高差、强改造、控压差”的开发技术政策;③钻井工程上形成了以“二级结构+激进参数+一体化导向+不承压防漏固井”为核心的优快钻完井技术;④压裂工程上构建了以“多簇密切割+限流射孔+双暂堵+高强度加砂+全电动”为核心的低成本高效促缝压裂技术;⑤常压页岩气具有地质条件复杂、压力系数和含气量较低、资源禀赋较差等特点,资源动用仍然面临产建阵地不落实、单井产能和最终可采储量低、投资成本高、经济效益差等挑战。结论认为,深化常压页岩气富集高产机理与甜点优选研究,强化基于渗流机理的效益开发技术政策研究,加强低成本钻井关键技术攻关,加快研发低成本高效压裂关键技术,并通过不断降本增效,是实现低品位常压页岩气规模效益开发的重点攻关方向。 展开更多
关键词 常压页岩气 形成机理 富集规律 开发技术政策 优快钻井技术 高效缝网压裂技术
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中国南方3套海相页岩气成藏条件分析 被引量:22
3
作者 何贵松 何希鹏 +3 位作者 高玉巧 张培先 万静雅 《岩性油气藏》 CSCD 北大核心 2019年第1期57-68,共12页
为了揭示中国南方3套海相页岩的勘探潜力差异,利用黔南、渝东南和湘中地区典型钻井的岩心实验分析、钻井、压裂测试等资料,从先期建造和后期改造等方面对成藏条件进行对比。结果表明:(1)五峰组—龙马溪组为台内坳陷深水陆棚相硅质页岩型... 为了揭示中国南方3套海相页岩的勘探潜力差异,利用黔南、渝东南和湘中地区典型钻井的岩心实验分析、钻井、压裂测试等资料,从先期建造和后期改造等方面对成藏条件进行对比。结果表明:(1)五峰组—龙马溪组为台内坳陷深水陆棚相硅质页岩型,生烃潜力大和储层物性好,含气量和地层压力均较高,为最有利勘探开发层系;优质页岩厚度、保存条件和可压性均是选区评价的重点。(2)九门冲组为被动大陆边缘深水陆棚相粉砂质-硅质页岩互层型,生烃潜力大,但热成熟度高,物性较差,保存条件复杂,埋深大,为重要接替层系;热演化程度、构造稳定性和埋深均是选区评价的重点。(3)大隆组为裂陷盆地深水台凹泥岩-灰质泥岩互层型,生烃潜力大、物性好,但夹层多,黏土含量高,顶底板封盖性差,含气量较低,为潜在有利层系;有利相带、页岩连续厚度和可压性均是选区评价的重点。(4)川中、川南、川东南地区的五峰组—龙马溪组,川中、黔南、宜昌地区的九门冲组,湘中涟源地区的大隆组均是页岩气勘探开发有利区。 展开更多
关键词 页岩气 保存条件 泥页岩类型 成藏条件 五峰组-龙马溪组 九门冲组 大隆组 中国南方
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花魔芋组织培养初步研究 被引量:9
4
作者 鲁红学 胡桂香 +2 位作者 周燚 潘娜 《长江大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第5期52-54,共3页
以花魔芋球茎切块作外植体,接种在 MS 附加6-BA、NAA 和 KT 的培养基上诱导愈伤组织的形成。各种培养基均能诱导外植体产生愈伤组织,但不同激素浓度组合其诱导率不一样。其中以 MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 1.0mg/L 的诱导率最高,达84.62%。愈... 以花魔芋球茎切块作外植体,接种在 MS 附加6-BA、NAA 和 KT 的培养基上诱导愈伤组织的形成。各种培养基均能诱导外植体产生愈伤组织,但不同激素浓度组合其诱导率不一样。其中以 MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 1.0mg/L 的诱导率最高,达84.62%。愈伤组织芽分化最适培养基是 MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+KT2.0mg/L,分化率为73.81%。芽在 MS+NAA 0.5 nag/L 和1/2MS+NAA 0.5mg/L 培养基上的生根率均在78%以上。 展开更多
关键词 花魔芋 愈伤组织 分化培养
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南川地区南页1井五峰组-龙马溪组页岩特征与生物地层 被引量:11
5
作者 何贵松 万静雅 +4 位作者 周頔娜 刘娜娜 张海涛 程轶妍 《地层学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期376-388,共13页
南川区块为国内首个页岩气招拍挂区块,生产实践表明该区具有较大的页岩气勘探开发潜力。为了进一步分析南川地区五峰组一龙马溪组页岩气成藏条件,对该区岩芯资料较全的南页1井开展了系统的笔石鉴定和笔石带划分对比,建立了从凯迪阶的Dic... 南川区块为国内首个页岩气招拍挂区块,生产实践表明该区具有较大的页岩气勘探开发潜力。为了进一步分析南川地区五峰组一龙马溪组页岩气成藏条件,对该区岩芯资料较全的南页1井开展了系统的笔石鉴定和笔石带划分对比,建立了从凯迪阶的Dicellograptus complexus带(WF2带)至埃隆阶上部的Lituigraptus convolutus带(LM7带)连续的生物地层序列。同时利用薄片、有机地化、全岩X衍射、氮离子抛光扫描电镜等分析测试资料和测井资料,对五峰组一龙马溪组下部优质页岩段进行了精细岩石地层划分,发现①一③小层为深水陆棚亚相细粒沉积,富有机质纹层和含有机质纹层发育,海水富营养,古生物繁盛,有机质富集程度高,有机成因硅质含量高,储层物性好,页岩气成藏物质基础和富集条件优于④一⑤小层,是页岩气勘探开发甜点段。与威202井和宁211井生物地层对比表明,宁211井WF2-LM4带页岩气最富集层段沉积速率最快、厚度最大、页岩气成藏物质基础最好,南页1井、威202井沉积速率较慢、厚度较薄、页岩气成藏物质基础略差。 展开更多
关键词 岩石地层 生物地层 页岩气 页岩特征 笔石带 五峰组 龙马溪组 渝东南地区
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井中微地震监测技术在平桥南页岩气区块应用效果分析 被引量:8
6
作者 谷红陶 《油气藏评价与开发》 CSCD 2020年第1期43-48,共6页
如何准确描述水平井水力压裂裂缝展布状态、储层改造体积、造缝主控因素是页岩气开发中一项关键技术。采用在邻井JY×-2中下放高精度检波器的方式对平桥南JY×-1页岩气井第10至15压裂段进行井中微地震监测。根据监测结果描述每... 如何准确描述水平井水力压裂裂缝展布状态、储层改造体积、造缝主控因素是页岩气开发中一项关键技术。采用在邻井JY×-2中下放高精度检波器的方式对平桥南JY×-1页岩气井第10至15压裂段进行井中微地震监测。根据监测结果描述每段压裂施工的裂缝发育过程,分析6段压裂后裂缝的分布特征:主要以人工裂缝为主,半缝长250 m,宽210 m,高85 m;储层改造体积2187×10^4 m^3,单段压裂区域有一定重合;主裂缝方向为北西60°,与最大主应力方向基本一致;压裂屏障是裂缝不对称发育的主控因素。结合三维地震曲率属性分析认为,储层内的天然闭合裂缝是压裂微裂缝延伸的屏障,影响压裂微裂缝延伸方向和长度的同时也会导致施工压力升高。 展开更多
关键词 平桥南页岩气 微地震监测 水平井水力压裂 压裂屏障 压裂微裂缝
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《细胞生物学》双语教学的思考与探索 被引量:4
7
作者 赵德刚 《教育教学论坛》 2016年第19期104-105,共2页
"细胞生物学"是现代生命科学的前沿分支学科之一,与其相关的基础知识和研究是生命科学发展的支柱。为了提高本科生的生物科学素养,培养出适应当代生命科学发展需要的应用型专门人才,推动《细胞生物学》的双语教学已经势在必... "细胞生物学"是现代生命科学的前沿分支学科之一,与其相关的基础知识和研究是生命科学发展的支柱。为了提高本科生的生物科学素养,培养出适应当代生命科学发展需要的应用型专门人才,推动《细胞生物学》的双语教学已经势在必行。本文作者在高校主讲《细胞生物学》课程,依据自己多年的教学经验和调查研究资料,结合贵州大学师生实际教与学的能力,探讨了如何在本科生教学中开展《细胞生物学》双语教学。 展开更多
关键词 贵州大学 细胞生物学 双语教学
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拟南芥PGK基因家族功能的初步分析 被引量:4
8
作者 赵懿琛 《山地农业生物学报》 2017年第1期12-17,35,共7页
磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase)是一类进化上非常保守的蛋白家族,因而利用模式植物拟南芥研究PGK家族基因功能具有普遍意义。拟南芥基因组中含有三个PGK基因家族成员(PGK1,PGK2和PGK3),但是对于它们的基因表达模式和蛋白定位... 磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase)是一类进化上非常保守的蛋白家族,因而利用模式植物拟南芥研究PGK家族基因功能具有普遍意义。拟南芥基因组中含有三个PGK基因家族成员(PGK1,PGK2和PGK3),但是对于它们的基因表达模式和蛋白定位的研究还不是很清楚。本文利用实时荧光定量PCR技术检测了PGK基因家族的表达模式,结果表明三个PGK基因在拟南芥的各个组织器官和发育阶段中都有表达。利用拟南芥原生质体瞬时转化系统对三个PGK蛋白进行亚细胞定位,结果显示PGK1和PGK3定位于细胞基质,而PGK2定位于叶绿体。另外,我们分离得到了PGK2基因的T-DNA插入敲除突变体pgk2。pgk2在正常条件下表现出叶片黄化,PR1基因上调表达和H_2O_2过量积累等类似于超敏反应的细胞死亡表型。进一步的遗传分析表明pgk2的细胞死亡表型和T-DNA插入位点紧密连锁,暗示着pgk2的细胞死亡表型是由于PGK2的基因缺失造成的,因此PGK2可能在调控植物细胞程序化死亡过程中有重要作用。以上研究结果对于进一步探讨PGK基因家族的功能具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 拟南芥 PGK基因家族 蛋白定位 细胞死亡
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两种产香微生物分离鉴定及其发酵液增香烟草研究 被引量:5
9
作者 杜飞 喻阑清 +3 位作者 周家喜 许绍欢 邹晓 《山地农业生物学报》 2021年第1期14-21,共8页
为增加烟草制品的香味,从茅台酒酒糟和茯砖茶中分别分离出一株产香酵母菌Z2和产香曲霉菌EC1,并采用形态及分子生物学特征进行鉴定,混以绿茶末等原料发酵,提取并添加发酵液至烟叶薄片后制成卷烟,送专家评吸,并用固相微萃取与气质联用技术... 为增加烟草制品的香味,从茅台酒酒糟和茯砖茶中分别分离出一株产香酵母菌Z2和产香曲霉菌EC1,并采用形态及分子生物学特征进行鉴定,混以绿茶末等原料发酵,提取并添加发酵液至烟叶薄片后制成卷烟,送专家评吸,并用固相微萃取与气质联用技术(SPME-GC/MS)对发酵液样品进行挥发性成分检测分析。结果表明:(1)两菌株分别为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和冠突散囊菌(Eurotium cristatum);(2)原料经发酵后能产生兼具茶香、酒香、蜜甜香及特殊香味的产物,提取并施用于烟草后可提高其感官品质;(3)SPME-GC/MS共检出56种挥发性成分,醇类16种,占41.64%;碳氢化合物类8种,占38.01%;酮类9种,占15.99%;脂类11种,占1.55%;醛类6种,占0.74%;杂环类5种,占1.43%;酚类1种,占0.07%。利用茶叶等原料以酿酒酵母结合冠突散囊菌发酵后可获得增加烟草制品香味的发酵液。 展开更多
关键词 酿酒酵母 冠突曲霉 分离鉴定 微生物发酵 烟用香料
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钻杆用双酚A甲醛酚醛环氧树脂内涂层的失效规律 被引量:3
10
作者 何毅 周斌葛 +3 位作者 徐中浩 薛石磊 杨敬 《腐蚀与防护》 CAS 北大核心 2013年第3期245-248,251,共5页
采用电化学阻抗谱、高温高压釜试验以及断口扫描电镜(SEM)分析技术,研究了双酚A甲醛酚醛环氧树脂管道内涂层在含饱和H2S/CO2的3.5%NaCl(质量分数)水溶液中不同温度下的失效规律。结果表明,在电化学阻抗测试中,随着温度(50℃,70℃,90℃)... 采用电化学阻抗谱、高温高压釜试验以及断口扫描电镜(SEM)分析技术,研究了双酚A甲醛酚醛环氧树脂管道内涂层在含饱和H2S/CO2的3.5%NaCl(质量分数)水溶液中不同温度下的失效规律。结果表明,在电化学阻抗测试中,随着温度(50℃,70℃,90℃)的升高,涂层失效减缓;在高温高压釜16h试验后,涂层表观正常(未出现起泡、开裂、表面颜色无明显变化)、附着力良好;结合端口扫描电镜(SEM)技术,进一步证明温度升高会导致涂层在含H2S/CO2的3.5%NaCl溶液中失效减缓。 展开更多
关键词 双酚A甲醛酚醛环氧树脂 涂层失效 电化学阻抗谱 H2S CO2
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五种药剂防治水稻二化螟的田间药效评估 被引量:1
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作者 郭明春 《农技服务》 2016年第15期68-69,共2页
为了筛选出高效低毒、性价比高的控制水稻二化螟虫的农药,更有效延缓害虫抗药性的形成。本文比较了五种田间常用的杀虫剂,通过大田试验比较评价了它们的药效。结果表明:五种药剂水溶喷洒茎叶的方法,其中两种杀虫剂康宽和10%氟虫双酰胺&#... 为了筛选出高效低毒、性价比高的控制水稻二化螟虫的农药,更有效延缓害虫抗药性的形成。本文比较了五种田间常用的杀虫剂,通过大田试验比较评价了它们的药效。结果表明:五种药剂水溶喷洒茎叶的方法,其中两种杀虫剂康宽和10%氟虫双酰胺·阿维菌素悬浮剂对控制二化螟引起的水稻枯心率都有良好效果,防治效率分别是98.84%和96.81%。喷药期间两种药剂作用区的水稻长势好,无毒副作用。综合考虑防治效率和用药成本等因素,本研究认为杀虫剂康宽,选择用量25ml/667m^2在生产中最为值得推广应用。 展开更多
关键词 高效低毒药剂 水稻二化螟 防效 成本
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贵州茶叶斑点病病原系统发育学分析与生物学特性 被引量:1
12
作者 程宇豪 +5 位作者 张金峰 孟泽洪 卢声洁 李帅 刘诗琪 周玉锋 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第13期4468-4476,共9页
为明确贵州省部分茶区发生的茶叶斑点病病原是否一致,本研究结合病原显微结构特征图像采集、分子生物学和致病性验证等方法对分离于4个茶区的18株茶叶斑点病病原菌株(QLC3A,QLC4,QLC5m,QLC6,QLC15-1,QLC15-2,QLC16,DS1,DS6,YQ10,AS3A,AS... 为明确贵州省部分茶区发生的茶叶斑点病病原是否一致,本研究结合病原显微结构特征图像采集、分子生物学和致病性验证等方法对分离于4个茶区的18株茶叶斑点病病原菌株(QLC3A,QLC4,QLC5m,QLC6,QLC15-1,QLC15-2,QLC16,DS1,DS6,YQ10,AS3A,AS6B,CYX1,CYX1A,CYX4B,CY2B,CY7A和CY12)开展了系统发育学分析及其生物学特性研究。结果表明:分离的18株病原菌均为Didymella segeticola,其中代表菌株DS6的最适培养碳源为麦芽糖,最适培养氮源为亮氨酸,最适培养pH值为7,最适培养温度为25℃;35℃生长停滞,40℃致死,在MEA中生长速度最快,与PDA差异不显著。研究结果可为贵州茶叶斑点病的绿色防控提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 茶叶斑点病 显微形态特征 系统发育分析 柯赫氏法则 生物学特性
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利用小学语文教材培养学生优美人格 被引量:1
13
作者 《广西教育》 2013年第13期69-70,共2页
所谓的优美人格,是指用一种审美的心态去对待周围的世界。它强调人与社会、自然、自我的和谐统一,体现了和谐社会所要求的真善美相统一的价值追求,以及社会发展进程中以人为本的人文关系。语文是人文性与工具性相统一的学科。因此语... 所谓的优美人格,是指用一种审美的心态去对待周围的世界。它强调人与社会、自然、自我的和谐统一,体现了和谐社会所要求的真善美相统一的价值追求,以及社会发展进程中以人为本的人文关系。语文是人文性与工具性相统一的学科。因此语文教师除了要教给学生文本知识,还要注重培养学生的优美人格。那么,如何在语文教学中培养学生的优美人格呢?我认为应充分利用教材中的优美文本培养学生的优美人格。 展开更多
关键词 语文教材 培养 优美人格
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新准则与新税法的交叉影响与协调策略
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作者 《中国经贸》 2010年第20期181-183,共3页
一、问题的提出 2008年是新税法与新准则同时实施的一年,标志着我国税收改革与会计改革已经进入了一个新的阶段,预示着一个新时代的开始。在社会经济生活中,会计法与税法相互影响、相互作用、共同发展。但由于两者各自立法目的、原... 一、问题的提出 2008年是新税法与新准则同时实施的一年,标志着我国税收改革与会计改革已经进入了一个新的阶段,预示着一个新时代的开始。在社会经济生活中,会计法与税法相互影响、相互作用、共同发展。但由于两者各自立法目的、原则、调整对象和适用范围各不相同,许多理念、原则、方法都发生深刻地变化, 展开更多
关键词 新税法 协调策略 交叉影响 社会经济生活 2008年 会计改革 税收改革 相互作用
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茶树营养调控课程内容改革与思考
15
作者 《河南农业》 2021年第27期25-26,共2页
茶树营养调控是针对茶学专业开设的理论应用课程。首先分析了当前茶树营养调控课程教学存在的短板,结合茶产业链中实际存在的问题,从科学理论知识与茶产业实际应用相结合的角度出发,探讨了茶树营养调控教学内容在“系统性”和“实践性... 茶树营养调控是针对茶学专业开设的理论应用课程。首先分析了当前茶树营养调控课程教学存在的短板,结合茶产业链中实际存在的问题,从科学理论知识与茶产业实际应用相结合的角度出发,探讨了茶树营养调控教学内容在“系统性”和“实践性”两个方面进行改革,为进一步优化实践型课程教学、服务产业提供参考。 展开更多
关键词 茶树营养调控 课程 教学内容 改革
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华东石油局页岩气勘探再获商业发现特等奖 解放常压页岩气
16
作者 沈志军 何贵松 《中国石油石化》 2021年第3期48-49,共2页
日前,华东石油局页岩气勘探再获褒奖——东胜—平桥西区块勘探荣获中国石化2020年度重大商业发现特等奖。2020年,涪陵页岩气田东胜—平桥西五峰组—龙马溪组新增探明地质储量1918.27亿立方米,助推我国页岩气探明储量超过2万亿立方米。其... 日前,华东石油局页岩气勘探再获褒奖——东胜—平桥西区块勘探荣获中国石化2020年度重大商业发现特等奖。2020年,涪陵页岩气田东胜—平桥西五峰组—龙马溪组新增探明地质储量1918.27亿立方米,助推我国页岩气探明储量超过2万亿立方米。其中,华东石油局探区探明地质储量1446.58亿立方米。 展开更多
关键词 桥西区 探明储量 页岩气勘探 探明地质储量 涪陵页岩气田 华东石油局 东胜
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鸟王茶优良品系NW32组培快繁体系的建立 被引量:6
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作者 田维丽 谢恩俊 +5 位作者 岑露 周富裕 周国兰 李岩 赵德刚 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期7162-7172,共11页
鸟王茶是贵州省重要的经济作物之一,近年来其种植规模逐渐扩大。为了更好地研究鸟王茶优质品质的稳定遗传、大量增殖以及快速繁殖,本研究以鸟王茶NW32带腋芽茎段为外植体,研究外植体的灭菌条件、腋芽萌发与增殖诱导以及壮苗与生根的最... 鸟王茶是贵州省重要的经济作物之一,近年来其种植规模逐渐扩大。为了更好地研究鸟王茶优质品质的稳定遗传、大量增殖以及快速繁殖,本研究以鸟王茶NW32带腋芽茎段为外植体,研究外植体的灭菌条件、腋芽萌发与增殖诱导以及壮苗与生根的最佳培养基配方、炼苗及移栽的最佳处理条件。结果表明:(1) 75%酒精浸泡60 s,0.1%升汞浸泡13 min为最佳灭菌处理条件,该处理下污染率10.00%较低、成活率86.36%较高、并且死亡率1.21%较低。(2) MS+2.0 mg/L 6-BA+0.8 mg/L IBA+1.0 mg/L GA3为腋芽萌发最佳培养基,其诱导率高达95.56%。(3) MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+1.0 mg/L GA3为最佳增殖培养基,增值系数6.59为最高。(4) MS+2.0 mg/L 6-BA+0.8 mg/L IBA为最佳壮苗培养基,株高差为2.38 cm。(5) 50.0 mg/L IBA无菌溶液浸泡5 min,接种至1/2MS+1.5 mg/L IBA为最佳生根培养基,生根率高达100.00%。(6)以自然光照室温炼苗5 d,以V营养土∶V珍珠岩∶V蛭石=2∶1∶1为基质为最佳炼苗及移栽条件,其成活率高达90.00%。本研究获得了一套鸟王茶NW32完整的组培快繁体系,为鸟王茶工厂化育苗与规模化种植提供技术参考。 展开更多
关键词 鸟王茶 外植体 组培快繁
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高表达花烟草防御素1基因K326烟草叶片总蛋白的提取及其生物活性分析
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作者 龚伟伟 赵懿琛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期800-804,共5页
目的 提取高表达花烟草防御素1(Nicotiana alata defensin 1,NaD1)基因的K326烟草叶片总蛋白,并分析其生物活性。方法 从花烟草花、野生型(WT)和高表达NaD1基因(转基因)K326烟草叶片中提取总蛋白,Bardford法测定蛋白浓度。滤纸片法检测... 目的 提取高表达花烟草防御素1(Nicotiana alata defensin 1,NaD1)基因的K326烟草叶片总蛋白,并分析其生物活性。方法 从花烟草花、野生型(WT)和高表达NaD1基因(转基因)K326烟草叶片中提取总蛋白,Bardford法测定蛋白浓度。滤纸片法检测总蛋白对真菌的抑菌活性,CCK-8法检测对癌细胞(HeLa细胞)的抑制活性。结果 花烟草花、WT及转基因K326烟草叶片总蛋白浓度分别为11.25、10.33和10.14 mg/mL。转基因K326烟草叶片总蛋白对白色念珠菌的抑菌活性为(85.68±3.08)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.33和1.14倍(F=15 339,P <0.05);对尖孢镰刀菌的抑菌活性为(148.48±2.47)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.09和1.08倍(F=4 927,P <0.05)。转基因K326烟草叶片总蛋白对HeLa细胞的IC_(50)最小(6.11 mg/mL),抑制活性分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.56和1.21倍(F=89 748,P <0.05)。结论 高表达NaD1基因的K326烟草总蛋白具有良好的抑菌和抗癌生物活性,本研究为以烟草作为生物反应器生产抑菌和抗癌生物制剂提供了实验依据。 展开更多
关键词 K326烟草 花烟草防御素1 转基因 生物活性
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茶树NPR基因家族成员鉴定与表达分析及冷诱导CsNPR 3的基因克隆 被引量:1
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作者 薛承进 赵兰馨 +1 位作者 赵德刚 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第7期1511-1522,共12页
冷胁迫是影响茶树(Camellia sinensis)产量和品质的主要非生物胁迫。病程相关基因非表达子(non-expresser of pathogenesis-related genes,NPRs)是植物抗病途径中的主要免疫调节蛋白。目前,茶树中NPR基因家族及其在冷响应中的作用研究... 冷胁迫是影响茶树(Camellia sinensis)产量和品质的主要非生物胁迫。病程相关基因非表达子(non-expresser of pathogenesis-related genes,NPRs)是植物抗病途径中的主要免疫调节蛋白。目前,茶树中NPR基因家族及其在冷响应中的作用研究相对较少。该研究首先利用生物信息学分析,在茶树基因组中筛选鉴定出3个定位于不同的染色体的NPR基因,命名为CsNPR 1、CsNPR 2和CsNPR 3(GenBank No.ON794747)。这些基因均包含家族保守的BTB/POZ、Ankyrin重复结构域以及多个半胱氨酸残基。进化分析发现,茶树的NPR家族成员的数量虽然与其他物种存在差异,但进化中表现出很强的保守性,与拟南芥及其他物种的分类结果相同。基因结构分析表明,茶树NPR家族与拟南芥具有相似的内含子外显子结构。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,探明CsNPR 1、CsNPR 2和CsNPR 3的组织表达模式以及对冷刺激和水杨酸(SA)的响应情况。进一步克隆被冷信号和SA信号同时诱导表达的CsNPR 3,比对发现该蛋白氨基酸序列存在着品种差异性。该研究对探明茶树NPR基因家族参与冷胁迫与水杨酸的交叉调控有一定参考意义。 展开更多
关键词 茶树 冷胁迫 NPR 基因家族 水杨酸
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超高效液相测定棉酚含量方法的建立 被引量:4
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作者 阳腾 赵懿琛 +1 位作者 赵德刚 《种子》 北大核心 2019年第11期34-38,共5页
棉花种子富含蛋白和油脂,而种子中含有的棉酚对人和多种单胃动物具有不可逆的毒害作用,严重限制棉籽的应用。本研究建立了超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)检测棉酚的方法,色谱条件:色谱柱Hypersil GOLD T... 棉花种子富含蛋白和油脂,而种子中含有的棉酚对人和多种单胃动物具有不可逆的毒害作用,严重限制棉籽的应用。本研究建立了超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)检测棉酚的方法,色谱条件:色谱柱Hypersil GOLD TM C18柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm);乙腈-0.2%磷酸(90∶10)为流动相;0.4 mL·min^-1的流速;25℃的柱温;检测波长235 nm;进样量10μL。结果表明:棉酚在0.1~50μg·mL^-1的浓度范围内线性关系良好(R 2=0.9999),平均回收率为98.47%,相对标准偏差RSD为0.10%。经方法学检验,该检测方法精密度高、重复性好,符合检测的要求。 展开更多
关键词 超高效液相色谱 棉酚 方法
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