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观赏动物犬细小病毒的鉴定及VP2基因的序列分析
1
作者 庞卓 黄学喆 +4 位作者 左珂菁 陈绚姣 罗均 郭霄峰 黄勉 《广东畜牧兽医科技》 2023年第6期46-49,共4页
为了对疑似感染犬细小病毒(canine parvovirus;CPV)的海狸鼠和狞猫等观赏动物进行确诊及了解遗传进化情况,将其肛拭子和粪便提取基因组DNA,通过PCR方法鉴定,并对VP2进行基因扩增与测序,和国内外参考株进行遗传进化树分析。结果表明,送检... 为了对疑似感染犬细小病毒(canine parvovirus;CPV)的海狸鼠和狞猫等观赏动物进行确诊及了解遗传进化情况,将其肛拭子和粪便提取基因组DNA,通过PCR方法鉴定,并对VP2进行基因扩增与测序,和国内外参考株进行遗传进化树分析。结果表明,送检的15份样品均扩增出约为756 bp的特异性条带,与FPV标准株CU-4株序列比对后确定为CPV,阳性率达100%;遗传进化树显示,分离株与北京地区分离得到的CPV-2a、CPV-New2a亚型毒株遗传关系较近,与其他参考株遗传距离相对较远。该研究结果丰富了观赏动物犬细小的研究资料以及该病的遗传和预防提供了参考。 展开更多
关键词 观赏动物 犬细小病毒 VP2基因 遗传分析
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1株猫嵌杯病毒的分离鉴定及全基因序列分析
2
作者 陈昌毅 李根 +4 位作者 何红玲 陈昱彤 黄学喆 罗均 郭霄峰 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3707-3718,共12页
【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus, FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中,以RT-PCR筛选含有FCV的病料,利用F81细胞及病毒... 【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus, FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中,以RT-PCR筛选含有FCV的病料,利用F81细胞及病毒空斑纯化试验对其进行纯化和扩繁。电镜下观察纯净化分离病毒的形态。通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)测定病毒的半数组织培养感染剂量(median tissue culture infectious dose, TCID50)及不同收毒时间的病毒滴度,绘制分离病毒的一步生长曲线。对分离病毒全基因序列进行核苷酸序列测定,并对其遗传进化及相似性进行分析。【结果】从疑似患猫的粪便病料中分离获得1株FCV,经空斑纯化后,该毒株会导致F81细胞发生皱缩、变圆、葡萄串样聚集和脱落等细胞病变效应。在电镜下病毒粒子呈圆形、直径35~39 nm、无囊膜。IFA结果显示,分离病毒可与兔源FCV VP1-F蛋白特异性多克隆抗体发生结合,在荧光显微镜下可见明显特异性荧光,病毒滴度为1×109TCID50/mL。分离病毒基因组全长为7 722 bp,与FCV-SH毒株核苷酸相似性最高,为83.94%,属于同一分支。VP1基因与FCV-SH1902毒株核苷酸相似性最高,为81.32%,与FCV-SH1901毒株氨基酸相似性最高,为89.99%。【结论】本研究成功分离到1株FCV,并对其全基因序列进行分析。该研究为FCV致病机理及疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猫嵌杯病毒(FCV) 分离鉴定 基因测序 遗传进化分析
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