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火电机组灵活性运行技术综述与展望 被引量:122
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作者 牟春华 居文平 +1 位作者 黄嘉 张建元 《热力发电》 CAS 北大核心 2018年第5期1-7,共7页
为有效解决大气污染问题,国家大力推进能源结构清洁化改革,风力发电、太阳能发电装机容量迅速增长,加之传统煤电产能过剩,导致电网调峰困难,这对现役火电机组的灵活性以及深度调峰能力提出了更高要求。本文以我国新能源发展趋势以及弃... 为有效解决大气污染问题,国家大力推进能源结构清洁化改革,风力发电、太阳能发电装机容量迅速增长,加之传统煤电产能过剩,导致电网调峰困难,这对现役火电机组的灵活性以及深度调峰能力提出了更高要求。本文以我国新能源发展趋势以及弃风、弃光程度为切入点,综述了提升火电机组灵活性运行的现状,针对火电机组现存调峰能力不足、负荷响应速度迟缓、长期偏离设计工况运行等问题进行了分析,并介绍了应对技术以及应用情况,在此基础上对火电机组灵活性运行下一步的工作方向进行了预测。 展开更多
关键词 火电机组 调峰 灵活性 热电解耦 低压缸零出力 负荷响应速度 全厂灵活性决策
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新疆地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及其对抗菌药的敏感性试验 被引量:41
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作者 赵红琼 黄燕 +3 位作者 陈杖榴 简子健 陈建新 黄嘉 《中兽医医药杂志》 2005年第2期16-19,共4页
通过细菌形态学和细菌生化特性,分离和鉴定了新疆地区患子宫内膜炎的21头奶牛子宫分泌物中的病原菌分别为蜡样芽孢杆菌( 24 5% )、非溶血性链球菌( 18 4% )、大肠杆菌( 14 3% )、溶血性链球菌(10 2% )、表皮葡萄球菌(10 2% )、金黄色葡... 通过细菌形态学和细菌生化特性,分离和鉴定了新疆地区患子宫内膜炎的21头奶牛子宫分泌物中的病原菌分别为蜡样芽孢杆菌( 24 5% )、非溶血性链球菌( 18 4% )、大肠杆菌( 14 3% )、溶血性链球菌(10 2% )、表皮葡萄球菌(10 2% )、金黄色葡萄球菌(10 2% )、胎儿弯曲菌(10 2% )和不动杆菌等。其中革兰氏阳性菌检出率较高(73 5% )。子宫内膜炎病原菌以单一菌株感染为主(47 6% )。采用Kirby-Barer法测定了鉴定菌株对13种抗微生物药的体外药物敏感性。链球菌、大肠杆菌和葡萄球菌对氨苄西林不敏感,而对卡那霉素和庆大霉素敏感性较高;大肠杆菌对青霉素和氨苄西林全部耐药(100% ),对四环素和多西环素耐药率较高(均为83 3% );溶血性链球菌对青霉素和四环素全部耐药,对链霉素耐药率为80%;相对而言,表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的耐药率较低;氟喹诺酮类对各种分离菌株比较敏感。 展开更多
关键词 新疆地区 奶牛子宫内膜炎 病原菌 敏感性试验 分离鉴定 抗菌药 溶血性链球菌 表皮葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 蜡样芽孢杆菌 大肠杆菌 革兰氏阳性菌 细菌形态学 药物敏感性 抗微生物药 氟喹诺酮类 耐药率 生化特性 不动杆菌
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200MW高背压循环水供热机组热力特性研究 被引量:26
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作者 江浩 黄嘉 王浩 《热力发电》 CAS 北大核心 2015年第4期17-21,共5页
通过对200MW机组高背压循环水供热改造后的系统进行热力计算分析发现:热网循环水流量及采暖抽汽流量的变化对机组热耗率、出力、对外热负荷、循环水出水温度等参数的影响相对较小,各种运行工况下燃料利用系数均可达到90%左右,能源综合... 通过对200MW机组高背压循环水供热改造后的系统进行热力计算分析发现:热网循环水流量及采暖抽汽流量的变化对机组热耗率、出力、对外热负荷、循环水出水温度等参数的影响相对较小,各种运行工况下燃料利用系数均可达到90%左右,能源综合利用效果好;但对机组背压的影响较大,机组运行调整灵活性差,改造工作量大,改造后需把握好更换转子时机,对外供热热负荷较小的机组不宜实施改造;200MW机组改造后低压缸做功量小,建议采用低压缸解列方案,以缩小改造范围和难度。 展开更多
关键词 200MW机组 高背压 循环水 供热系统 热力特性 燃料利用系数 热耗率
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三分仓空气预热器热力计算的简化方法 被引量:17
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作者 李杨 周元祥 +5 位作者 谢天 江浩 黄嘉 常东锋 王浩 李欣 《动力工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期37-41,共5页
提出了空气预热器热力计算的一种简化方法,该方法以空气预热器实际运行状况为前提,以回转式空气预热器的计算标准方法为基础.以某350MW超临界机组省煤器的改造方案为例,采用该方法对空气预热器进行了热力计算,得到空气预热器出口烟气温... 提出了空气预热器热力计算的一种简化方法,该方法以空气预热器实际运行状况为前提,以回转式空气预热器的计算标准方法为基础.以某350MW超临界机组省煤器的改造方案为例,采用该方法对空气预热器进行了热力计算,得到空气预热器出口烟气温度和空气温度的变化量.结果表明:该方法无需考虑蓄热元件的板型、结构和材质等参数的影响,尤其是在空气预热器发生堵灰和沾污情况下,避免了计算公式中一些难以估计的参数,准确性大大提高;采用该简化方法计算得到的排烟温度、热一次风温度和热二次风温度与哈尔滨锅炉厂有限责任公司的计算结果一致,2种方法计算结果的相对误差小于1%. 展开更多
关键词 三分仓 空气预热器 热力计算 简化方法
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200 MW机组蒸汽旁路热电解耦能力评估 被引量:17
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作者 黄嘉 刘永林 +3 位作者 付亦葳 王伟 徐海涛 居文平 《热力发电》 CAS 北大核心 2018年第10期90-95,共6页
为解决机组供热需求和电网调峰之间的矛盾,对运行方式、设备改造、系统结构3种热电解耦方案进行了对比分析,对实际机组使用蒸汽旁路进行热电解耦推荐使用主蒸汽+再热蒸汽旁路方案。同时,针对热电解耦方案评估,提出以机组最大供热增容能... 为解决机组供热需求和电网调峰之间的矛盾,对运行方式、设备改造、系统结构3种热电解耦方案进行了对比分析,对实际机组使用蒸汽旁路进行热电解耦推荐使用主蒸汽+再热蒸汽旁路方案。同时,针对热电解耦方案评估,提出以机组最大供热增容能力及最低电负荷作为定量评价指标。实际分析结果表明:某机组采用蒸汽旁路解耦方案后,供热能力增加119 MW,最低电负荷下降46 MW;采用蒸汽旁路扩容方案,供热能力增加180 MW,最低电负荷下降89 MW。 展开更多
关键词 热电解耦 蒸汽旁路 通流特性 增容能力 热电厂
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低压省煤器水侧系统连接方案优化分析 被引量:14
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作者 黄嘉 李杨 《热力发电》 CAS 北大核心 2011年第3期62-64,共3页
通过比较低压省煤器改造中水侧系统不同的连接方案,得出各连接方案对机组经济性的影响。分析表明,较常用连接方案,即低压省煤器供水取自末级低压加热器出口,回水到除氧器,经济性最低。继而对其它连接方案进行可行性分析,优选出了最经济... 通过比较低压省煤器改造中水侧系统不同的连接方案,得出各连接方案对机组经济性的影响。分析表明,较常用连接方案,即低压省煤器供水取自末级低压加热器出口,回水到除氧器,经济性最低。继而对其它连接方案进行可行性分析,优选出了最经济可行的连接方案。 展开更多
关键词 热力系统 低压省煤器 低压加热器 连接 水侧系统
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冷渣器冷却水回水接入点分析及改进方案 被引量:11
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作者 黄嘉 张爱军 +1 位作者 魏铜生 钱毓敏 《热力发电》 CAS 北大核心 2009年第3期75-77,80,共4页
针对蒙西发电厂2×300 MW机组的冷渣器冷却水回水接入点不当,导致机组整体循环效率降低,影响机组运行经济性的问题进行了分析,提出了优化改进方案。与原接入点相比,采用将冷渣器冷却水回水接入7号低压加热器(低加)入口,且所有凝结... 针对蒙西发电厂2×300 MW机组的冷渣器冷却水回水接入点不当,导致机组整体循环效率降低,影响机组运行经济性的问题进行了分析,提出了优化改进方案。与原接入点相比,采用将冷渣器冷却水回水接入7号低压加热器(低加)入口,且所有凝结水串联通过冷渣器和7号低加的方案,可使机组负荷在292 MW时供电煤耗率下降1.25 g/(kW.h),在202 MW时供电煤耗率下降1.67 g/(kW.h);采用将冷渣器冷却水回水接入6号低加入口,且凝结水并联通过冷渣器和7号低加的方案,可使机组负荷在292 MW时供电煤耗率下降0.83 g/(kW.h),在202 MW时供电煤耗率下降1.22 g/(kW.h)。 展开更多
关键词 蒙西发电厂 300 MW机组 冷渣器 冷却水 回水 接入点 煤耗率
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烟气余热回收利用系统节能效果试验研究 被引量:11
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作者 刘永林 屈杰 +1 位作者 周科 黄嘉 《热能动力工程》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期76-79,共4页
以某660 MW机组低温省煤器为研究对象,以试验数据为基础,运用等效热降基本原理,科学划分烟气余热回收利用能级,将低温省煤器系统排挤做功划为三部分:第一部分为排挤8、7、6段抽汽做功;第二部分为排挤6段抽汽做功;第三部分为低温省煤器... 以某660 MW机组低温省煤器为研究对象,以试验数据为基础,运用等效热降基本原理,科学划分烟气余热回收利用能级,将低温省煤器系统排挤做功划为三部分:第一部分为排挤8、7、6段抽汽做功;第二部分为排挤6段抽汽做功;第三部分为低温省煤器出水温度与5号低加进水温度偏差,排挤5段抽汽做功,综合三部分计算低温省煤器系统节能效果。试验结果表明:低温省煤器吸热量35.2 MW,8号低加进水至6号低加出水排挤做功2.3 MW,7号低加出水至6号低加出水段吸热排挤做功2.8 MW,5号低加抽汽量增加,机组出力降低0.7 MW,总排挤做功4.4 MW,装置循环效率提高0.66%,热耗降低51.9 kJ/(kW·h),折合发电煤耗为1.91 g/(kW·h)。与低温省煤器系统停、投运汽轮机整机热力试验结果相比,热耗相差1.7 kJ/(kW·h),发电煤耗相差0.07 g/(kW·h)。由此可知,这种与试验方法相结合,基于烟气余热梯级利用的能效评估方法,在低温度省煤器系统能效评估中是可行的。与常规烟气余热回收系统停、投汽轮机热耗试验法相比,基于烟气余热梯级利用的能效评估方法,具有概念清晰、科学合理、简单易操作的特点。 展开更多
关键词 低温省煤器 能效评估 等效热降法 烟气余热利用
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600 MW超临界汽轮机中低负荷配汽优化研究 被引量:9
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作者 刘永林 黄嘉 +3 位作者 屈杰 余小兵 李永乐 王伟 《动力工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期792-796,803,共6页
以某600 MW超临界汽轮机为研究对象,分析了复合调节存在的节能潜力,通过试验确定各高压调门的流量特性,分析了高压调门不同阀序运行方式下的能耗特性及重叠度设定方法,并对高压调门开启顺序进行了优化。结果表明:优化后汽轮机中低负荷点... 以某600 MW超临界汽轮机为研究对象,分析了复合调节存在的节能潜力,通过试验确定各高压调门的流量特性,分析了高压调门不同阀序运行方式下的能耗特性及重叠度设定方法,并对高压调门开启顺序进行了优化。结果表明:优化后汽轮机中低负荷点500 MW、400 MW和330 MW工况下高压缸效率分别提升了1.53%、1.34%和1.42%,热耗率分别降低26.0 kJ/(kW·h)、23.2 kJ/(kW·h)和25.3 kJ/(kW·h)。 展开更多
关键词 600 MW超临界汽轮机 中低负荷 配汽优化 顺序阀 重叠度
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应用聚合酶链反应检测伪狂犬病病毒DNA 被引量:4
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作者 冉多良 王正党 +3 位作者 魏伟 黄嘉 韩新兵 邱扬 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1994年第4期366-368,共3页
选用标准的伪狂犬病病毒(PRV)闽A株,经BHK21细胞培养,提取PRVDNA作为摸板;合成1对20-mer寡核苷酸作为引物;选择扩增序列由262个碱基对组成的位于编码多糖蛋白gp50基因,用耐热的Taq-DNA聚合... 选用标准的伪狂犬病病毒(PRV)闽A株,经BHK21细胞培养,提取PRVDNA作为摸板;合成1对20-mer寡核苷酸作为引物;选择扩增序列由262个碱基对组成的位于编码多糖蛋白gp50基因,用耐热的Taq-DNA聚合酶经30个循环以后,扩增的产物直接用凝胶电泳检测,并用标准分子量确定。结果表明:以PRVDNA作为模板进行扩增,有扩增产物生成,以同科的疱疹病毒DNA作为模板在相同的条件下进行PCR扩增,无扩增产物生成,说明PRVPCR扩增是特异的。PCR技术检测PRVDNA敏感度为28.5pg.PRVPCR技术的建立,为伪狂犬病诊断和流行病学研究提供了更敏感、可靠的手段。 展开更多
关键词 伪狂犬病 病毒 PCR 多糖蛋白gp50 基因 核酸电泳
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高压调节阀配置方式对机组运行经济性的影响 被引量:7
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作者 江浩 常东锋 +4 位作者 蒋辉 黄嘉 李欣 李钊 王勇 《热力发电》 CAS 北大核心 2014年第12期14-18,24,共6页
论述了高压调节阀配置方式与汽轮机进汽压力的关系,以600 MW机组为例,计算得出了亚临界机组与超临界机组在不同调节阀配置方式下的经济性,以及在顺序阀定压与滑压运行方式下热耗率的变化规律,给出了各调节阀所控制的调节级喷嘴数不等时... 论述了高压调节阀配置方式与汽轮机进汽压力的关系,以600 MW机组为例,计算得出了亚临界机组与超临界机组在不同调节阀配置方式下的经济性,以及在顺序阀定压与滑压运行方式下热耗率的变化规律,给出了各调节阀所控制的调节级喷嘴数不等时,各调节阀配置方式下机组热耗率的变化规律及调节阀配置原则,并对重叠度对机组运行经济性的影响进行了定量分析.结果表明:不同调节阀配置方式对机组运行经济性影响明显,对于配置4个调节阀的机组,2阀点时,提前开启调节阀压损每增大2%,机组热耗率增加约13~15 kJ/(kW.h);3阀点时,机组热耗率仅增加约5~6 kJ/(kW.h);2阀点下,超临界机组热耗率增加略小. 展开更多
关键词 高压调节阀 配置方式 重叠度 定压运行 滑压运行 热耗率
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空气预热器旁路烟气余热利用系统热力特性数值模拟 被引量:9
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作者 谢天 范庆伟 +1 位作者 房瑾 黄嘉 《热力发电》 CAS 北大核心 2017年第10期100-105,共6页
燃煤电站锅炉普遍存在排烟温度高、排烟热损失大的问题。本文根据能量梯级利用的原则,以某超临界600 MW机组为例,采用商业软件EBSILON建立了包含锅炉、汽轮机和发电机的完整系统模型,并在此模型基础上对常规低压省煤器系统和空气预热器... 燃煤电站锅炉普遍存在排烟温度高、排烟热损失大的问题。本文根据能量梯级利用的原则,以某超临界600 MW机组为例,采用商业软件EBSILON建立了包含锅炉、汽轮机和发电机的完整系统模型,并在此模型基础上对常规低压省煤器系统和空气预热器旁路烟气余热利用系统进行了热力特性数值模拟。结果表明:空气预热器旁路烟气余热利用系统可提高烟气余热的利用能级,实现能量的梯级利用,其节能效果约为常规低压省煤器系统的2倍;空气预热器旁路烟气余热利用系统更适用于热一次风干燥能力较大的机组。 展开更多
关键词 燃煤锅炉 排烟温度 空气预热器 低压省煤器 旁路烟气 余热利用 EBSILON软件
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低β值喉部取压喷嘴在给水流量测量中的应用 被引量:6
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作者 江浩 于新颖 +7 位作者 郭俊文 常东锋 王浩 李欣 黄嘉 李杨 周元祥 谢天 《热力发电》 CAS 北大核心 2012年第10期44-47,共4页
对焊接结构的低β值喉部取压长颈喷嘴用于给水流量测量的分析表明,采用经过校验后的焊接结构低β值喉部取压长颈喷嘴测量给水流量的不确定度≤0.25%,符合ASME PTC6作为机组性能验收试验的要求,且具有宽量程、低能耗等特点。
关键词 给水流量 测量 低β值 喉部取压 喷嘴 焊接结构
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基于弹性网络回归的实际采暖热指标估算方法
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作者 康敬德 黄嘉 +8 位作者 乔磊 李杰 孙鹏 贺凯 刘圣冠 尚海军 王钰泽 史耀辉 宋佳怡 《热力发电》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期114-123,共10页
为满足热电联产企业估算区域热负荷的需求,提出一种使用弹性网络回归模型的估算方法。首先对实际采暖热指标的影响因素进行分析,确定模型的输入参数;然后以西安市123个小区2022—2023年采暖季的实际运行数据为基础建立估算模型,并证明... 为满足热电联产企业估算区域热负荷的需求,提出一种使用弹性网络回归模型的估算方法。首先对实际采暖热指标的影响因素进行分析,确定模型的输入参数;然后以西安市123个小区2022—2023年采暖季的实际运行数据为基础建立估算模型,并证明该模型相较于Lasso回归和岭回归模型的拟合优度分别提高了3.88%和4.22%;最后从多角度选取西安市部分小区相关数据构成验证集对弹性网络回归模型进行验证。验证结果表明:弹性网络回归模型综合了Lasso回归和岭回归的优点,模型的均方根误差和拟合优度分别为1.150和0.953,相较于传统模型能在符合热负荷需求的同时降低4%的能源消耗。说明该方法能准确估算不同参数条件下的实际采暖热指标,可以满足热电联产企业的实际需求。 展开更多
关键词 热电联产 实际采暖热指标 弹性网络回归模型 热负荷估算
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新疆幼畜和人非典型轮状病毒的调查和鉴定 被引量:7
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作者 王正党 单文鲁 +2 位作者 黄嘉 张福萍 刘明军 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期336-341,共6页
自1984至1994年10年间,在新疆采集了绵羊、山羊羔、仔猪、犊牛、骆驼羔和鸡的粪样1959份,以及住院腹泻婴幼儿、无症状新生儿和成人腹泻的粪样255份,共2214份。用PAGE法检测了这些粪样中的轮状病毒和非典型... 自1984至1994年10年间,在新疆采集了绵羊、山羊羔、仔猪、犊牛、骆驼羔和鸡的粪样1959份,以及住院腹泻婴幼儿、无症状新生儿和成人腹泻的粪样255份,共2214份。用PAGE法检测了这些粪样中的轮状病毒和非典型轮状病毒。按Saif电泳型分组法,检出的各组轮状病毒是:A组276份,在成人腹泻和驼羔中未检出;B组26份,都是从羊羔和仔猪中检出;C组22份,都是从仔猪中检出;D组2份,在鸡中检出;似E组1份,从仔猪中检出。取检出的各组非典型轮状病毒9株,即羊羔B组2株(KB-63和LB-60),仔猪B组4株(MPB-1、2,SPB-3、4),仔猪C组2株(SPC-11、ZPC-12),仔猪似E组1株(MPB-5),口服接种剥夺初乳的本种动物,接种后12-16小时动物都发生急性水样腹泻,并检出大量病毒。对这9株病毒和1株成人腹泻轮状病毒(ADRV),用ELISA和对流免疫电泳检测A、B组组抗原,结果ADRV、羊羔B组、仔猪B组和似E组共8株病毒都只有B组组抗原。用A、B组轮状病毒生物素核酸探针斑点杂交分别检测8株和10株病毒,血清学检测为B组者都只与B组有杂交信号。C组的两株则既无A、B组组抗原,也不与A、B? 展开更多
关键词 非典型轮状病毒 轮状病毒 调查
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致病性大肠杆菌微胶囊口服疫苗的制备及对其免疫功能的评价 被引量:5
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作者 黄嘉 苏艳 +5 位作者 周军 阿哈提 钟世勋 杨武干 钟先江 陈伟丽 《新疆农业大学学报》 CAS 北大核心 2009年第1期31-34,共4页
通过喷雾-界面配位改良法制备了大肠杆菌微胶囊口服疫苗,平均直径为10μm,包被率为65%;并通过体外试验证实了本疫苗能避免胃酸的破坏且肠溶性良好;利用淋巴细胞转化实验、玻板凝集试验、ELISA试验测定了其免疫效果,试验数据表明,大肠杆... 通过喷雾-界面配位改良法制备了大肠杆菌微胶囊口服疫苗,平均直径为10μm,包被率为65%;并通过体外试验证实了本疫苗能避免胃酸的破坏且肠溶性良好;利用淋巴细胞转化实验、玻板凝集试验、ELISA试验测定了其免疫效果,试验数据表明,大肠杆菌微胶囊口服疫苗能有效激活细胞免疫、体液免疫、黏膜免疫,可产生大量的IgA和IgG,并且使用方便,安全有效。 展开更多
关键词 大肠杆菌 微胶囊疫苗 大鼠 口服免疫 免疫功能
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汽轮机热力性能试验前后的不确定度分析方法研究 被引量:4
17
作者 黄嘉 安敏善 《热力发电》 CAS 北大核心 2004年第8期22-24,共3页
介绍了汽轮机热力性能试验前后不确定度的研究分析方法 ,并给出了辨别多组试验结果不确定度有效性的图示方法。
关键词 汽轮机 热力性能 试验 不确定度分析方法
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B组轮状病毒RT-PCR来源的cDNA探针核酸诊断方法的建立 被引量:2
18
作者 韩新兵 王正党 黄嘉 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期183-187,共5页
近十年来,国内外学者相继报道在人以及牛、羊、猪、大鼠的腹泻粪样中检出B组轮状病毒〔1-3〕。洪涛等于1983年首次报道成人腹泻轮状病毒(ADRV)属于B组轮状病毒〔4〕。目前,轮状病毒B组已被公认为引起人及不同动物腹... 近十年来,国内外学者相继报道在人以及牛、羊、猪、大鼠的腹泻粪样中检出B组轮状病毒〔1-3〕。洪涛等于1983年首次报道成人腹泻轮状病毒(ADRV)属于B组轮状病毒〔4〕。目前,轮状病毒B组已被公认为引起人及不同动物腹泻的流行病学的重要因素。由于B组轮... 展开更多
关键词 B组 轮状病毒 RT PCR 光敏生物素 核酸探针 诊断
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“双碳”目标下清洁高效灵活煤电技术现状及煤电前景展望 被引量:1
19
作者 牟春华 居文平 +1 位作者 王洋 黄嘉 《热力发电》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1-10,共10页
阐述了“双碳”战略对煤电目前总体影响以及面临的发展问题;对煤电机组清洁排放、节能减碳、供热提效、灵活运行的现状和关键技术进行了梳理分析,展望了煤电发展前景,得出了基于我国资源禀赋及能源战略安全来积极看待煤电发展的结论,应... 阐述了“双碳”战略对煤电目前总体影响以及面临的发展问题;对煤电机组清洁排放、节能减碳、供热提效、灵活运行的现状和关键技术进行了梳理分析,展望了煤电发展前景,得出了基于我国资源禀赋及能源战略安全来积极看待煤电发展的结论,应重视清洁高效灵活煤电技术的研发与应用,与各种新能源的优势互补,动态协同发展,以推动新型电力系统稳健发展。 展开更多
关键词 “双碳” 清洁 高效 灵活 煤电技术
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信号肽序列对禽流感病毒H5N1HA蛋白GFP融合分子在真核细胞中表达的影响 被引量:4
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作者 苏艳 张宝江 +1 位作者 申煜 黄嘉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期351-356,共6页
【目的】构建绿色荧光蛋白(GFP)与禽流感病毒(AIV)HA基因的融合表达载体,观察信号肽序列的有无及位置对HA-GFP在293T细胞中的表达影响。【方法】应用PCR方法从H5N1亚型AIV质粒DNA中扩增出完整的或除去信号肽序列的HA基因片段,PCR产物经... 【目的】构建绿色荧光蛋白(GFP)与禽流感病毒(AIV)HA基因的融合表达载体,观察信号肽序列的有无及位置对HA-GFP在293T细胞中的表达影响。【方法】应用PCR方法从H5N1亚型AIV质粒DNA中扩增出完整的或除去信号肽序列的HA基因片段,PCR产物经XhoⅠ和SmaⅠ双酶切后定向插入绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1的不同位点,将得到的重组体M1,M2和M3分别转化宿主菌DH5α,经双酶切及DNA测序鉴定分析后,采用脂质体转染法将pEGFP-C1,M1,M2和M3转染人胚肾细胞系293T细胞,荧光显微镜下观察HA-GFP的表达,流式细胞仪检测表达HA蛋白的细胞百分数。【结果】经酶切及测序鉴定成功构建了HA-GFP重组表达载体M1,M2和M3,荧光显微镜及流式细胞仪检测到重组质粒转染的293T细胞表达强的荧光蛋白,信号肽的有无对HA-GFP融合蛋白在293T细胞中的表达有显著影响,信号肽序列使HA-GFP融合蛋白在293T细胞中的表达减少,而信号肽的位置对融合蛋白表达量的影响不显著。【结论】信号肽的有无对HA-GFP融合蛋白在细胞中的表达有显著影响。 展开更多
关键词 禽流感病毒HA蛋白 绿色荧光蛋白 融合分子 真核表达 信号肽序列
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