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卡方检验和精确检验在HWE检验中的应用 被引量：30
1
作者 黄代新 杨庆恩 《法医学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期116-119,共4页
综述了几种不同数据处理方法卡方检验和精确检验在法医人类遗传标记群体遗传学研究Hardy-Wein鄄berg平衡检验中的应用。强调了精确检验在多等位基因标记系统,尤其是以VNTR、STR为代表的法医DNA分析研究中的重要性。
关键词 卡方检验 精确检验 HWE检验 等位基因 遗传学
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常用STR基因座突变的观察与分析 被引量：27
2
作者 李秋阳 丰伟军 +3 位作者 杨庆恩 朱传红 黄代新 余纯应 《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期86-89,共4页
目的观察与分析常用STR基因座突变的特点。方法从1211例确定亲子关系的案例中收集到27个突变基因。用银染法和荧光标记试剂盒复核,并作序列测定证实。结果27个突变基因出现在15个基因座,突变方式符合步移突变模型。男女性别比例8∶1。... 目的观察与分析常用STR基因座突变的特点。方法从1211例确定亲子关系的案例中收集到27个突变基因。用银染法和荧光标记试剂盒复核,并作序列测定证实。结果27个突变基因出现在15个基因座,突变方式符合步移突变模型。男女性别比例8∶1。突变率与父亲年龄正相关。结论突变率与基因座各等位基因均一重复单位个数的几何平均数相关,数值高的突变率较高,亲子鉴定中应谨慎使用。 展开更多
关键词 STR基因座 突变基因 几何平均数 突变率 亲子关系 荧光标记 序列测定 突变模型 突变方式 性别比例 等位基因 父亲年龄 亲子鉴定 试剂盒 银染法 正相关
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片段长度差异等位基因特异性PCR—一种改良的SNP分型新方法 被引量：18
3
作者 黄代新 杨庆恩 赵贵森 《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期11-14,共4页
目的建立一种基于等位基因特异性PCR原理的改良SNP分型新方法:片段长度差异等位基因特异性PCR,并考察特异性引物的3'端第3位、第4位碱基错配对特异性延伸的影响。方法以SNP位点rs759117和rs760887为例,设计两条长度不同、3'末... 目的建立一种基于等位基因特异性PCR原理的改良SNP分型新方法:片段长度差异等位基因特异性PCR,并考察特异性引物的3'端第3位、第4位碱基错配对特异性延伸的影响。方法以SNP位点rs759117和rs760887为例,设计两条长度不同、3'末端分别与SNP两个等位基因碱基配对的上游引物,同时在两个等位基因特异性引物3'端第3或第4位碱基引入错配以增加特异性,下游为公用引物。PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显带后确定样本的基因型。结果不同SNP纯合子为长度不同的单一谱带,杂合子则为两条带,其结果与直接测序完全一致。两条特异性上游引物3'端第3或第4位碱基引入错配后非特异性延伸显著减少,且对PCR反应条件的严格性要求明显降低。结论片段长度差异等位基因特异性PCR是一种简单快速而有效的SNP分型新方法;两条特异性引物3'端第3。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性 片段长度差异等位基因特异性PCR 碱基错配 法医物证检验学
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HPLC法检测人外周血5-~mC含量及其与年龄相关性研究 被引量：20
4
作者 尹慧 黄代新 +1 位作者 翟仙敦 杨庆恩 《中国法医学杂志》 CSCD 2007年第1期8-11,共4页
目的探讨人外周血中5-^mC含量随年龄变化的规律。方法94例健康个体（4～87岁，男性50例，女性44例）按年龄分为6组：〈20岁、20～30岁、30～40岁、40～50岁、50～60岁及〉60岁组，用HPLC法对外周血中5种脱氧核苷进行定量分析。结果50～6... 目的探讨人外周血中5-^mC含量随年龄变化的规律。方法94例健康个体（4～87岁，男性50例，女性44例）按年龄分为6组：〈20岁、20～30岁、30～40岁、40～50岁、50～60岁及〉60岁组，用HPLC法对外周血中5种脱氧核苷进行定量分析。结果50～60岁组（平均年龄54．7岁）和〉60岁组（平均年龄71．7岁）间的5-^mC含量差异无显著性，但与其它4组有明显差异（P〈0．0001）；〈20岁、20～30岁、30～40岁和40～50岁4组间无显著性差异。男性5-^mC含量的均值（3.5％±0．005％）稍低于女性（3．32％±0．006％），但差异无统计学意义。结论5-^mC的含量随着年龄的增长呈下降趋势，但其下降程度很小。 展开更多
关键词 法医物证学 5-甲基脱氧胞苷 HPLC 年龄
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PCR-DGGE法检测浮游生物16S rDNA在溺死鉴定中的应用 被引量：19
5
作者 何方刚 黄代新 +3 位作者 刘良 闫平 孟祥志 张勇 《中国法医学杂志》 CSCD 2008年第4期234-237,共4页
目的建立并评估PCR-DGGE法检测浮游生物对溺死鉴定的应用价值。方法大白兔30只随机分为3组:溺死组(n=12),死后抛尸组(n=12)和对照组(n=6);溺死组和死后抛尸组又分为2个亚组:东湖水域组(n=6)和墨水湖水域组(n=6)。死后提取心血和肺、肝... 目的建立并评估PCR-DGGE法检测浮游生物对溺死鉴定的应用价值。方法大白兔30只随机分为3组:溺死组(n=12),死后抛尸组(n=12)和对照组(n=6);溺死组和死后抛尸组又分为2个亚组:东湖水域组(n=6)和墨水湖水域组(n=6)。死后提取心血和肺、肝、肾、脑等组织,匀浆后,采用Percoll密度梯度离心法分离浮游生物并提取其DNA,PCR扩增浮游生物特异的16S rDNA片段后分别用琼脂糖凝胶电泳及DGGE检测分析。2个溺死案例检材同法检验。结果溺死组各组织器官中浮游生物检测多呈阳性:肺(100%)、肝(83%)、肾(75%)、心血(83%)、脑(42%);死后抛尸组仅2例肺组织(16.7%)检出阳性;对照组全部阴性。溺尸肺组织DGGE分型图谱与相应溺死点水样分型图谱相似,而与非溺死点水样分型结果差异显著。2实际案例均呈阳性。结论本方法不仅有助于定性诊断溺死,而且通过比较产物的多样性可以推断溺死地点,在法医学溺死鉴定中具有较大实用价值。 展开更多
关键词 法医病理学 溺死 浮游生物 16S RDNA DGGE
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STR位点D19S253和D8S1179的多态性研究 被引量：13
6
作者 黄代新 杨庆恩 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期228-231,共4页
目的研究ＳＴＲ位点Ｄ１９Ｓ２５３和Ｄ８Ｓ１１７９的多态性，为法医学应用提供基础数据。方法应用ＰＣＲ及ＰＡＧ电泳技术对武汉地区２００多名汉族无关个体进行了调查。结果两位点各检出９个等位基因，首次获得汉族人群频率分布。两... 目的研究ＳＴＲ位点Ｄ１９Ｓ２５３和Ｄ８Ｓ１１７９的多态性，为法医学应用提供基础数据。方法应用ＰＣＲ及ＰＡＧ电泳技术对武汉地区２００多名汉族无关个体进行了调查。结果两位点各检出９个等位基因，首次获得汉族人群频率分布。两位点基因型频率分布符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡。家系调查证实了等位基因的传递遵循孟德尔遗传规律，观察１００次减数分裂未发现突变基因。Ｄ１９Ｓ２５３和Ｄ８Ｓ１１７９位点的杂合度观察值分别为０．８０８９和０．８７１２，多态性信息含量分别为０．７７５４和０．８２５８。两位点联合ＰＤ值为０．９９６６，累积非父排除率为０．８７９１。结论表明这两个多态位点在法医学个人识别及亲子鉴定中是很有价值的遗传标记系统。 展开更多
关键词 短串联重复序列 D19S253 D8S1179 PCR 多态性
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湖北地区汉族人群24个Y-STR基因座遗传多态性研究 被引量：14
7
作者 朱传红 周翔 +6 位作者 邵毅 黄代新 胡青青 许帆叶 孙婧 宁平 刘艳 《刑事技术》 2014年第1期16-22,共7页
目的 对湖北汉族人群24个Y-STR基因座多态性进行调查,并获得相关的基础遗传学数据.方法 应用AGCU Y24 STR荧光标记复合直接扩增系统及3130XL型DNA测序仪,对湖北地区320对已确定父子关系的640个男性个体血样进行24个Y-STR检测分型.结果 ... 目的 对湖北汉族人群24个Y-STR基因座多态性进行调查,并获得相关的基础遗传学数据.方法 应用AGCU Y24 STR荧光标记复合直接扩增系统及3130XL型DNA测序仪,对湖北地区320对已确定父子关系的640个男性个体血样进行24个Y-STR检测分型.结果 在320名父亲男性个体中,在DYS391、DYS389工、DYS439、DYS389Ⅱ、DYS438、DYS449、DYS456、DYS458、DYS437、DYS635、DYS448、Y-GATA-H4、DYS447、DYS19、DYS392、DYS522、DYS393、DYS388、DYS390、DYS444基因座在湖北地区汉族人群分别检出4～17个等位基因,DYS527a/b检出45个等位基因组,DYS385a/b检出57个等位基因组,各基因座基因多样性最低为0.3838,最高为0.9650;并检出320种单倍型.比对320对父子Y-STR分型,在7680次基因遗传传递中,在DYS449、DYS527、DYS444、DYS389Ⅱ、DYS447、DYS522、DYS385、Y-GATA-H4等10个基因座中检出16个突变,突变率为1.5625‰～1.5653％,平均突变率为2.0833‰;等位基因增加突变与等位基因减少突变比为1∶1.结论 24个基因座单倍型在湖北地区汉族人群中具有丰富的遗传多态性,其数据对法医学应用、Y-STR数据库建设和群体遗传学等研究应用具有重要意义. 展开更多
关键词 Y-STR 复合扩增 遗传多态性 单倍型 突变
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Y-STR突变及快速突变Y-STR的法医学应用价值 被引量：11
8
作者 张文琼 刘宇轩 黄代新 《中国法医学杂志》 CSCD 2015年第4期380-383,共4页
Y染色体遗传标记在性犯罪案件及父系亲缘关系鉴定中具有特殊应用价值,但也存在同一父系男性个体间无法有效区分的局限性。快速突变Y-STR(rapidly mutating Y-STRs,RM Y-STRs)基因座的出现有望在一定程度上解决这一法医学应用局限。本文... Y染色体遗传标记在性犯罪案件及父系亲缘关系鉴定中具有特殊应用价值,但也存在同一父系男性个体间无法有效区分的局限性。快速突变Y-STR(rapidly mutating Y-STRs,RM Y-STRs)基因座的出现有望在一定程度上解决这一法医学应用局限。本文就STR的突变机制、Y-STR突变的影响因素、RM Y-STR的提出及其法医学应用价值作一简要综述。 展开更多
关键词 法医遗传学 突变机制 RM Y-STR 单倍型区分
原文传递
浮游生物16S rDNA检测在大鼠溺死鉴定中的价值 被引量：11
9
作者 何方刚 刘良 +3 位作者 黄代新 杨庆恩 翟仙敦 尹慧 《中国法医学杂志》 CSCD 2006年第6期331-333,共3页
目的建立浮游生物16S rDNA PCR检脸法应用于溺死的鉴定。方法将15只SD大鼠随机分为溺死组、死后抛尸组和正常对照组,死后分别取脑、肝、肾和肺等脏器,提取DNA.用特异性引物扩增浮游生物16S rDNA第三和第四可变区特异片段。结果溺死组5例... 目的建立浮游生物16S rDNA PCR检脸法应用于溺死的鉴定。方法将15只SD大鼠随机分为溺死组、死后抛尸组和正常对照组,死后分别取脑、肝、肾和肺等脏器,提取DNA.用特异性引物扩增浮游生物16S rDNA第三和第四可变区特异片段。结果溺死组5例,肺全部检出(100%)浮游生物16S rDNA;肝、肾分别检出4例(80%);脑检出3例(75%)。死后抛尸组仅1例在肺中检出浮游生物(20%)。正常对照组均未检出。苗论浮游生物16S rDNA PCR检验法可用于溺死的鉴定。 展开更多
关键词 法医学 溺死 16S RDNA PCR
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4个多拷贝RM Y-STR基因座的异常分型 被引量：10
10
作者 张文琼 肖超 +2 位作者 余谨 贾雲舒 黄代新 《中国法医学杂志》 CSCD 2016年第5期476-479,共4页
目的观察湖北汉族人群中4个多拷贝RM Y-STR基因座的异常分型。方法使用文献报道及自行设计的荧光标记引物对252个无关男性个体样本进行扩增,并用AB 3130遗传分析仪对扩增产物进行检测分析。结果在所有样本中共发现25例异常多等位基因分... 目的观察湖北汉族人群中4个多拷贝RM Y-STR基因座的异常分型。方法使用文献报道及自行设计的荧光标记引物对252个无关男性个体样本进行扩增,并用AB 3130遗传分析仪对扩增产物进行检测分析。结果在所有样本中共发现25例异常多等位基因分型,其中基因座DYF387S1出现5例,DYF399S1出现15例,DYF403S1出现1例,DYF404S1出现4例。25例异常分型存在于20个样本中,发生率为7.94%,其中4个样本在两个以上基因座上均出现异常分型。结论多拷贝RM Y-STR基因座异常分型发生率较高,在法医学的实际应用中应予以注意。 展开更多
关键词 法医物证学 Y-STR 快速突变 异常基因型
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短串联重复序列D7S2201基因座的群体遗传学研究 被引量：6
11
作者 黄代新 张林 +2 位作者 吴梅筠 陈国弟 陈于波 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,共4页
用扩增片段长度多态性技术分析短串联重复序列D7S2201基因座的遗传多态性，在262个中国成都地区汉族无关个体及119个泰国曼谷地区泰人无关个体中分别发现7个和5个等位基因，首次获得该基因座在两群体中的频率分布，其等位基因片段大小... 用扩增片段长度多态性技术分析短串联重复序列D7S2201基因座的遗传多态性，在262个中国成都地区汉族无关个体及119个泰国曼谷地区泰人无关个体中分别发现7个和5个等位基因，首次获得该基因座在两群体中的频率分布，其等位基因片段大小范围为100～124bp。两群体的基因型频率分布均符合Hardy Weinberg平衡。该基因座在两群体中的个人识别能力（PD）、杂合度（H）、多态性信息含量（CPI）及非父排除率（PE）分别为0.7038、0.5992、0.4789、0.2900和0.7351、0.5882、0.5012、0.2770。家系调查证实了等位基因的传递遵循孟德尔遗传规律。χ2检验表明两群体间等位基因频率分布无显著性差异。 展开更多
关键词 短串联生育序列 聚合酶链反应 D7S2201基因座 多态性 群体遗传 人
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大鼠液压冲击脑损伤TGF-β1及其受体TβR I的表达 被引量：9
12
作者 黄代新 吴梅筠 +2 位作者 陈于波 张林 吴家馼 《中国法医学杂志》 CSCD 2002年第2期70-73,共4页
目的观察脑损伤后TGF-β1及其受体TβRI蛋白表达及其时序性变化,探讨脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断。方法用免疫组织化学方法观察大鼠液压冲击脑损伤后TGF-β1及其受体TβRI蛋白在伤后不同时间(30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、... 目的观察脑损伤后TGF-β1及其受体TβRI蛋白表达及其时序性变化,探讨脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断。方法用免疫组织化学方法观察大鼠液压冲击脑损伤后TGF-β1及其受体TβRI蛋白在伤后不同时间(30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d)的表达情况,以正常大鼠及手术大鼠作为对照。结果 (1)正常及手术对照组大鼠脑组织内有低水平的TGF-β1及TβRI表达;(2)脑损伤后1～3d,大脑皮质和脑干TGF-β1/TβRI蛋白表达逐渐增加,7 d时仍维持在高表达水平;(3)海马冲击后12 h～1 d逐渐增加,3 d时仍处于高表达水平,7 d时已开始下降。结论脑损伤可诱导TGF-β1/TβRI基因在脑内表达,其时序性改变可望用于法医学脑损伤时间推断。 展开更多
关键词 液压冲击脑损伤 TGF-Β1 TΒR I 免疫组织化学
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反义硫代磷酸寡核苷酸逆转肝癌细胞多药耐药的实验研究 被引量：9
13
作者 罗华友 杨家印 +5 位作者 林琦远 严律南 黄代新 张洁 雷松 赵永恒 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2001年第4期220-222,共3页
目的　观察反义硫代磷酸寡核苷酸 (ASOND)逆转耐药肝癌细胞的多药耐药作用。方法　用人工合成互补于mdrl基因 5′端AUG起始密码子的反义 2 0聚硫代磷酸寡核苷酸 ,以Lipofectamine为载体 ,转染人耐药肝癌细胞SMMC 772 1,MTT测定细胞对化... 目的　观察反义硫代磷酸寡核苷酸 (ASOND)逆转耐药肝癌细胞的多药耐药作用。方法　用人工合成互补于mdrl基因 5′端AUG起始密码子的反义 2 0聚硫代磷酸寡核苷酸 ,以Lipofectamine为载体 ,转染人耐药肝癌细胞SMMC 772 1,MTT测定细胞对化疗药物的敏感性 ,通过RT PCR检测mRNA的表达 ,流式细胞仪分析P 170的表达。结果　ASOND可抑制SMMC 772 1细胞mRNA及P 170的表达 ,增加耐药细胞对化疗药物的敏感性 ,最佳ASOND作用浓度为 0 .5 μmol/L。 结论　ASOND可增加耐药细胞对化疗药物的敏感性 ,部分逆转耐药肝癌细胞耐药。 展开更多
关键词 人肝癌细胞 多药耐药 反义硫代磷酸寡核苷酸 逆转 化疗
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反义寡核苷酸降低细胞株SMMC-7721/ADM之MRP基因表达的研究 被引量：7
14
作者 杨家印 罗华友 +5 位作者 林琦远 严律南 林萍 雷松 黄代新 赵永恒 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2001年第3期141-144,共4页
目的研究反义硫代磷酸寡核苷酸（ＡＳ－ＯＤＮ）抑制人肝癌细胞耐药株（ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ）ＭＲＰ 基因表达的作用。方法用人工合成互补于ＭＲＰ 基因ｍＲＮＡ特定片断的反义硫代磷酸寡核苷酸，以脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍ... 目的研究反义硫代磷酸寡核苷酸（ＡＳ－ＯＤＮ）抑制人肝癌细胞耐药株（ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ）ＭＲＰ 基因表达的作用。方法用人工合成互补于ＭＲＰ 基因ｍＲＮＡ特定片断的反义硫代磷酸寡核苷酸，以脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ为载体转染ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ细胞株，用ＲＴ－ＰＣＲ测定ｍＲＮＡ表达，流式细胞技术测定细胞膜ＭＲＰ１蛋白Ｐ１９０表达及ＭＴＴ法检测细胞对柔红霉素（ＤＮＲ）和阿霉素（ＡＤＭ）的敏感性。结果 ＡＳ－ＯＤＮ能抑制 ＭＲＰｍＲＮＡ和其蛋白 Ｐ１９０表达，提高细胞对 ＤＮＲ和 ＡＤＭ的敏感性。结论① ＡＳ－ＯＤＮ能降低 ＭＲＰ基因表达；② ＭＲＰ介导的多药耐药（ ＭＤＲ）是ＳＭＭＣ－７７２１／ＡＤＭ耐药的重要机理之一。 展开更多
关键词 反义硫代磷酸寡核苷酸 多药耐药性 人肝癌细胞 MRP 基因表达
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人体组织/体液来源的法医学鉴定 被引量：8
15
作者 马丽莉 马红杜 黄代新 《中国法医学杂志》 CSCD 2013年第4期291-294,共4页
生物检材的组织/体液来源鉴定是法医学检验的重要内容之一。法医学组织/体液鉴定的方法较多,无论是基于酶促反应或免疫学检测的传统鉴定方法,还是光谱法或近年来基于mRNA、microRNA或DNA甲基化差异的分子生物学组织鉴定技术,均各有特点... 生物检材的组织/体液来源鉴定是法医学检验的重要内容之一。法医学组织/体液鉴定的方法较多,无论是基于酶促反应或免疫学检测的传统鉴定方法,还是光谱法或近年来基于mRNA、microRNA或DNA甲基化差异的分子生物学组织鉴定技术,均各有特点。本文就各种法医学组织/体液鉴定方法的特点及其法医学应用价值作一简要综述。 展开更多
关键词 法医物证学 生物检材 组织来源鉴定
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生物检材中的PCR抑制物及其处理技术 被引量：7
16
作者 胡清清 刘宇轩 +3 位作者 何仕霞 马丽莉 马红杜 黄代新 《中国法医学杂志》 CSCD 2014年第3期243-246,共4页
DNA分型技术在刑事案件的侦破中已得到广泛应用,但不同来源的各种生物检材往往含有PCR抑制物,其对扩增反应的影响不容忽视。因此,DNA样本扩增前预处理就显得尤为重要。本文主要就PCR抑制物种类及其对PCR的抑制机制、PCR抑制物应对技术... DNA分型技术在刑事案件的侦破中已得到广泛应用,但不同来源的各种生物检材往往含有PCR抑制物,其对扩增反应的影响不容忽视。因此,DNA样本扩增前预处理就显得尤为重要。本文主要就PCR抑制物种类及其对PCR的抑制机制、PCR抑制物应对技术等相关研究进展进行简要综述,旨在为相关研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 法医物证学 生物检材 PCR抑制物
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变性梯度凝胶电泳及其在法医学中的应用 被引量：7
17
作者 黄代新 王功跃 《法律与医学杂志》 2005年第2期145-148,共4页
关键词 变性梯度凝胶电泳 法医学应用
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武汉汉族群体3个多拷贝Y-STR基因座的遗传多态性 被引量：7
18
作者 黄代新 朱传红 +3 位作者 方慧 刘翠兰 杨罕 杨庆恩 《中国法医学杂志》 CSCD 2007年第2期76-80,共5页
目的提供DYS385、DYS459和DYS464基因座的群体遗传学资料。方法用荧光标记引物及ABI 3100型基因分析仪对武汉地区176名汉族男性无关个体的DYS385、DYS459和DYS464 3个多拷贝Y-STR基因座进行分型。结果在DYS385和DYS459基因座的个体,可... 目的提供DYS385、DYS459和DYS464基因座的群体遗传学资料。方法用荧光标记引物及ABI 3100型基因分析仪对武汉地区176名汉族男性无关个体的DYS385、DYS459和DYS464 3个多拷贝Y-STR基因座进行分型。结果在DYS385和DYS459基因座的个体,可观察到1～2个不同长度的扩增产物;DYS464基因座个体,可观察到1～4个不同长度的扩增产物。DYS385基因座检出14个等位基因及47种单倍型,DYS459检出4个等位基因及7种单倍型,DYS464检出9个等位基因及51种单倍型,其单倍型多样性分别为0.9591、0.6047和0.9560。3个基因座构成的联合单倍型共有133种,其多样性值达0.9909。结论3个多拷贝Y-STR基因座均为高多态性的遗传标记,联合应用具有较高的个体分辨能力。 展开更多
关键词 法医物证学 多拷贝基因 Y-STR基因座 遗传多态性
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印记基因H19上游高甲基化区SNPs多态性研究 被引量：6
19
作者 林晓燕 黄代新 +3 位作者 翟仙敦 林宇新 李小廷 杨庆恩 《中国法医学杂志》 CSCD 2008年第5期302-305,308,共5页
目的建立简单、高效的DNA甲基化标记和SNPs联合检测技术,并用于H19基因上游高甲基化区两组SNPs群体遗传学检测。方法用PCR-DGGE技术对232例武汉汉族无关个体H19基因上游启动子区H19FR1和H19FR2单倍型进行检测;同时选用两种甲基化敏感的... 目的建立简单、高效的DNA甲基化标记和SNPs联合检测技术,并用于H19基因上游高甲基化区两组SNPs群体遗传学检测。方法用PCR-DGGE技术对232例武汉汉族无关个体H19基因上游启动子区H19FR1和H19FR2单倍型进行检测;同时选用两种甲基化敏感的限制酶(msRE)HpaⅡ和HhaⅠ,检测H19FR等位基因亲代来源。结果H19FR1区检出5种单倍型、9种表型组合,其个体识别能力(DP)、多态性信息含量(PIC)和非父排除率(PE)分别为0.803、0.58和0.322;H19FR2区检出2种单倍型、3种表型组合,其DP、PIC和PE值分别为0.626、0.37和0.162。测序结果显示,片段H19FR1含有a7342g、a7357g和g7547a 3个SNPs与1个g7351c点突变;H19FR2仅含a8097g 1个SNP。msRE HpaⅡ或HhaⅠ可消化个体母源等位基因,PDP-DGGE分析仅能检测到父源等位基因。结论PDP-DGGE是一种简单、灵敏、高效的DNA甲基化标记和SNPs联合分析技术,其在进行多态性分型同时还可以确定等位基因的亲代来源,具有较高的法医学应用价值。 展开更多
关键词 法医物证学 印记基因 SNP 聚合酶链反应 变性梯度凝胶电泳 甲基化敏感的限制酶
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HUMARA基因座差异甲基化的法医学意义 被引量：4
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作者 赵贵森 杨庆恩 +2 位作者 黄代新 余纯应 杨荣芝 《中国法医学杂志》 CSCD 2004年第5期275-277,共3页
目的　探讨X连锁差异甲基化多态性基因座的法医学应用意义。方法　以STR基因座HUMARA为例 ,应用甲基化敏感性限制酶消化后PCR技术 ,复合分析该基因座的STR多态性和甲基化状态 ,调查并比较男、女检材的分型效果。结果　基因组DNA经HpaⅡ... 目的　探讨X连锁差异甲基化多态性基因座的法医学应用意义。方法　以STR基因座HUMARA为例 ,应用甲基化敏感性限制酶消化后PCR技术 ,复合分析该基因座的STR多态性和甲基化状态 ,调查并比较男、女检材的分型效果。结果　基因组DNA经HpaⅡ消化后 ,男性没有扩增产物 ,女性分型不受影响 ,男女混合检材得到女性的分型图谱。女性单克隆瘤细胞只能检出 1个等位基因。结论　差异甲基化的HUMARA基因座是混合斑分析、性别鉴定和组织克隆性判断的有用工具。 展开更多
关键词 甲基化状态 分型 女性 多态性 瘤细胞 基因座 克隆性 检材 法医学应用 混合斑
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