传染性法氏囊病毒VP2蛋白抗原表位多肽P22的免疫原性及生物学功能鉴定 被引量：8

1

作者 宋幸辉 王睿 +6 位作者 王选年 鲍登克 杨苏珍 卢清侠 王寅彪 赵东 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期692-697,共6页

为鉴定IBDV VP2蛋白线性B细胞抗原表位肽P22的免疫原性及生物学功能,作者采用固相多肽合成方法合成多肽P22,经纯化后用SMCC法分别与牛血清白蛋白(BSA)和细胞穿膜肽(PNT)进行偶联,得到免疫抗原P22-BSA和检测抗原P22-PNT;用P22-BSA免疫BAL... 为鉴定IBDV VP2蛋白线性B细胞抗原表位肽P22的免疫原性及生物学功能,作者采用固相多肽合成方法合成多肽P22,经纯化后用SMCC法分别与牛血清白蛋白(BSA)和细胞穿膜肽(PNT)进行偶联,得到免疫抗原P22-BSA和检测抗原P22-PNT;用P22-BSA免疫BALB/c小鼠3只,经3次免疫后得到多抗血清3份。应用ELISA检测了抗P22抗体的特异性,并通过抗P22多肽抗体作为特异性抗体检测了P22多肽结合CEF细胞的特性。结果经鉴定3份多抗血清均与P22多肽特异性反应,效价均达到1∶105,且能特异性检测P22多肽与CEF细胞的特异性结合。本试验成功制备了P22免疫原,获得了效价高、特异性较好的鼠源抗P22多抗血清,并证明P22多肽与CEF细胞能够特异性结合,为进一步研究多肽疫苗的设计或试纸条的研制及表位单抗的制备提供了新的思路和基础。 展开更多

关键词 IBDV VP2蛋白 P22多肽 抗原表位 免疫

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数字PCR及其在现代医学分子诊断中的应用 被引量：7

2

作者 胡思宏 鲍登克 万绍贵 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期861-866,共6页

数字PCR(digital PCR,d PCR)技术被认为是精确定量核酸分子的全新技术手段,因为具有较高的灵敏度和特异性等特点而得到迅速发展。数字PCR在临床上的多个领域展现出良好的应用前景,比如肿瘤液体活检、器官移植物损伤评估、无创产前筛查... 数字PCR(digital PCR,d PCR)技术被认为是精确定量核酸分子的全新技术手段,因为具有较高的灵敏度和特异性等特点而得到迅速发展。数字PCR在临床上的多个领域展现出良好的应用前景,比如肿瘤液体活检、器官移植物损伤评估、无创产前筛查、病原微生物分子诊断以及二代测序文库质控和结果验证等。本文就数字PCR在上述领域中的应用研究及其进展进行综述。 展开更多

关键词 数字PCR 液体活检 器官移植 无创产前筛查 病原微生物分子诊断 二代测序

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抗猪FcγRⅡb多抗阻断猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体依赖增强作用研究 被引量：6

3

作者 蒋志政 张改平 +6 位作者 刘明阳 乔松林 刘永晖 王蕊 万博 鲍登克 王爱萍 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第4期139-142,145,共5页

为验证猪FcγRⅡb在抗体依赖增强(ADE)作用中的功能,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性血清中提取IgG并制备F(ab′)2片段,将104 TCID50的PRRSV病毒与80μg/mL的F(ab′)2片段或抗PRRSV阳性血清(中和效价1/5.9,经128倍稀释)混合,共同... 为验证猪FcγRⅡb在抗体依赖增强(ADE)作用中的功能,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性血清中提取IgG并制备F(ab′)2片段,将104 TCID50的PRRSV病毒与80μg/mL的F(ab′)2片段或抗PRRSV阳性血清(中和效价1/5.9,经128倍稀释)混合,共同感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)和Marc-145细胞,发现亚中和滴度的阳性血清能显著增强病毒对PAM的感染,但不能增强病毒对Marc-145细胞的感染;而F(ab′)2片断不能增强病毒感染;用兔抗猪FcγRⅡb多抗孵育PAM细胞,再用上述病毒与阳性血清复合物感染PAM,结果阳性血清对病毒感染的增强作用受到明显抑制。表明猪FcγRⅡb能够介导PRRSV ADE作用。 展开更多

关键词 抗体依赖增强(ADE) 阻断 IgGFc受体 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 感染

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口蹄疫诊断技术研究进展 被引量：6

4

作者 杨苏珍 李清州 +3 位作者 张改平 鲍登克 万博 刘庆堂 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第10期36-38,47,共4页

口蹄疫是一种严重影响畜牧业生产的急性传染病,防制口蹄疫的重要环节是要做出及时准确的诊断。随着对口蹄疫研究的不断深入,口蹄疫诊断技术也得到了很大发展。为此,对传统的病毒分离、ELISA方法、核酸探针技术、RT-PCR方法以及目前的免... 口蹄疫是一种严重影响畜牧业生产的急性传染病,防制口蹄疫的重要环节是要做出及时准确的诊断。随着对口蹄疫研究的不断深入,口蹄疫诊断技术也得到了很大发展。为此,对传统的病毒分离、ELISA方法、核酸探针技术、RT-PCR方法以及目前的免疫动物和自然感染动物的鉴别诊断技术以及合成肽ELISA技术进行了综述,旨在为口蹄疫的预防和控制提供参考。 展开更多

关键词 口蹄疫 诊断技术 核酸探针 RT-PCR 免疫动物

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磁共振弥散加权成像对中晚期食管癌放化疗疗效的评估价值

5

作者 马菁宇 左燕雨 +4 位作者 王大丰 惠双 鲍登克 张晓亚 万里新 《中国CT和MRI杂志》 2024年第4期72-75,共4页

目的探讨磁共振弥散加权成像技术在中晚期食管癌放化疗疗效中的评估价值。方法随机纳入2021年9月至2022年12月期间在南阳市中心医院行根治性放化疗的32例中晚期食管癌患者,于放化疗前后实施MRI及DWI扫描,根据实体肿瘤疗效评价结果分为... 目的探讨磁共振弥散加权成像技术在中晚期食管癌放化疗疗效中的评估价值。方法随机纳入2021年9月至2022年12月期间在南阳市中心医院行根治性放化疗的32例中晚期食管癌患者,于放化疗前后实施MRI及DWI扫描,根据实体肿瘤疗效评价结果分为缓解组和未缓解组,比较两组放化疗前后ADC值、肿瘤最大径、ADC值变化率及肿瘤最大径变化率有无差异。计量资料比较采用t检验,使用ROC曲线分析各参数对于中晚期食管癌患者放化疗疗效的评估价值。结果共32例接受放化疗的中晚期食管癌患者,缓解组25例,未缓解组7例。放化疗前,缓解组的ADC值、ADC值变化率大于未缓解组,但差异无统计学意义(P>0.05);放化疗结束后,缓解组的ADC值高于未缓解组,肿瘤最大径小于未缓解组,差异有统计学意义(P<0.05);所有患者治疗后的ADC值均较治疗前增高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,放化疗后的ADC值达到2.540×10^(-3)/(mm^(2)·s^(-1))时为最佳阈值,此时可以诊断食管癌患者在放化疗后达到缓解,其敏感度为72.0%,特异度为71.4%,ROC曲线下面积为0.791。结论磁共振弥散加权成像对评估中晚期食管癌患者放化疗效果有重要价值,其中放化疗后的ADC值可较为精准地预测其疗效。 展开更多

关键词 食管癌 弥散加权成像 表观弥散系数 放化疗

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家畜IgG Fc受体研究进展 被引量：5

6

作者 史平玲 王爱萍 +3 位作者 乔松林 张改平 邬成业 鲍登克 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第1期124-128,共5页

IgG Fc受体(Fcγreceptors,FcγRs)是一类重要的免疫细胞表面分子,对细胞反应的正向和负向调节发挥重要的免疫学功能,是治疗过敏和自身免疫性疾病理想的药物靶标。综述了FcγRs亚类的生物学特性及家畜FcγRs的研究进展,并对FcR(Fc受体)... IgG Fc受体(Fcγreceptors,FcγRs)是一类重要的免疫细胞表面分子,对细胞反应的正向和负向调节发挥重要的免疫学功能,是治疗过敏和自身免疫性疾病理想的药物靶标。综述了FcγRs亚类的生物学特性及家畜FcγRs的研究进展,并对FcR(Fc受体)免疫学功能也进行了阐述。 展开更多

关键词 家畜IgG FC受体 免疫调节 抑制型受体 激活型受体

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线粒体功能异常与肿瘤 被引量：5

7

作者 李雨佳 庞米米 鲍登克 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2020年第4期283-288,共6页

线粒体是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的产能细胞器,是细胞进行有氧呼吸的主要场所,被称为“power house”。线粒体在细胞内的分布与细胞内的能量需求、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成、细胞凋亡及钙稳态等过程密... 线粒体是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的产能细胞器,是细胞进行有氧呼吸的主要场所,被称为“power house”。线粒体在细胞内的分布与细胞内的能量需求、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成、细胞凋亡及钙稳态等过程密切相关。越来越多的研究表明,线粒体功能异常参与调控多种生理病理过程,如:细胞存活与增殖,迁移与侵袭。同时,肿瘤细胞所表现出的无限增殖、代谢异常、凋亡抑制、强侵袭及易转移等恶性表型也与线粒体功能异常关系密切。本文将对线粒体功能异常与肿瘤的关系进行综述。 展开更多

关键词 线粒体 功能异常 肿瘤

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“互联网+”在药理学教学中的应用与思考 被引量：1

8

作者 方东 孙华 鲍登克 《教育教学论坛》 2023年第20期118-122,共5页

随着社会的迅速发展,科学技术也随之突飞猛进。科技的进步不仅体现在生活方式上的便捷,新颖的教育方式也是科技进步的重要体现。以教师和书本为中心的传统药理学教学模式已不再适应当今学生对于知识的需求,因此“互联网+教学”应运而生... 随着社会的迅速发展,科学技术也随之突飞猛进。科技的进步不仅体现在生活方式上的便捷,新颖的教育方式也是科技进步的重要体现。以教师和书本为中心的传统药理学教学模式已不再适应当今学生对于知识的需求,因此“互联网+教学”应运而生。探讨使用网络多样化新型教学模式下药理学的多样化教学方式和教学规律,提升药理学学科的教学建设,打造优质课堂,为其他学科的多样化教学提供借鉴。 展开更多

关键词 “互联网+” 药理学 教学模式

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线粒体损伤相关模式分子与宿主免疫调节 被引量：4

9

作者 赵静 万绍贵 鲍登克 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期38-43,共6页

线粒体是真核细胞至关重要的细胞器,参与机体细胞能量代谢和细胞凋亡等多种生物学过程。线粒体还参与机体的天然免疫反应的调节。线粒体不仅可以作为病毒免疫反应的载体,还可以通过产生ROS参与抗菌反应。线粒体受到损伤、刺激后,可释放m... 线粒体是真核细胞至关重要的细胞器,参与机体细胞能量代谢和细胞凋亡等多种生物学过程。线粒体还参与机体的天然免疫反应的调节。线粒体不仅可以作为病毒免疫反应的载体,还可以通过产生ROS参与抗菌反应。线粒体受到损伤、刺激后,可释放mt DNA,TFAM,ROS,ATP,心磷脂和甲酰肽等内容物。这些分子可以作为损伤相关模式分子(damage-associated molecular patterns,DAMPs)被模式识别受体识别,从而参与宿主的免疫调节。研究表明,线粒体已成为内源性DAMPs的重要来源,在先天性免疫应答以及疾病进展过程中发挥着重要的作用。本文就线粒体来源的损伤相关模式分子在机体免疫调节中的作用进行综述。 展开更多

关键词 线粒体 损伤相关模式分子 免疫调节

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华蟾毒它灵通过线粒体途径引起肝癌细胞凋亡 被引量：4

10

作者 潘越 胡思宏 +6 位作者 王佳鑫 李柯金 张亚霖 余诗佳 刘红亮 鲍登克 杨虎山 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期646-653,共8页

目的:探讨华蟾毒它灵对肝癌细胞增殖的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测法检测华蟾毒它灵对肝癌细胞株SNU-739存活和毒性的影响。通过细胞集落形成实验和EdU细胞增殖实验研究华蟾毒它灵对... 目的:探讨华蟾毒它灵对肝癌细胞增殖的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测法检测华蟾毒它灵对肝癌细胞株SNU-739存活和毒性的影响。通过细胞集落形成实验和EdU细胞增殖实验研究华蟾毒它灵对SNU-739细胞增殖的作用。利用DAPI染色、TUNEL染色和流式细胞术检测华蟾毒它灵对SNU-739细胞凋亡的影响。采用RT-qPCR和Western blot法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax的水平及NF-κB p65活化的情况。通过JC-1荧光探针试剂盒和ATP检测试剂盒研究华蟾毒它灵对SNU-739细胞线粒体功能的影响。利用裸鼠体外成瘤实验研究华蟾毒它灵在体内对肝癌组织生长的影响。结果:MTT和LDH检测结果表明华蟾毒它灵可抑制肝癌细胞的活性(P<0.01),集落形成实验和EdU细胞增殖实验结果表明华蟾毒它灵可显著抑制肝癌细胞增殖(P<0.01)。DAPI染色结果显示,华蟾毒它灵处理后SNU-739细胞的核出现染色质凋亡形态。TUNEL染色和流式细胞检测结果显示,华蟾毒它灵可促进肝癌细胞凋亡(P<0.05)。RT-qPCR和Western blot结果显示,华蟾毒它灵处理后,SNU-739细胞内Bcl-2表达下调,Bax表达上调,Bax/Bcl-2比例升高(P<0.05)。另外,华蟾毒它灵作用后,肝癌细胞的线粒体膜电位呈现明显的下降趋势,ATP的生成量也显著减少(P<0.01)。裸鼠体外成瘤实验表明华蟾毒它灵能够明显抑制体内肝肿瘤组织的生长(P<0.05)。结论:华蟾毒它灵能抑制肝癌细胞的增殖,并通过线粒体途径促进肝癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 华蟾毒它灵 肝细胞癌 细胞增殖 细胞凋亡 线粒体

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猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展 被引量：3

11

作者 李清州 达龙珠 +4 位作者 鲍登克 陈海燕 杨春英 刘毓霞 乔松林 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第12期100-103,共4页

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病原,对PRRSV细胞受体的研究将有助于揭示PRRSV的感染途径、复制过程、致病机理和疫病预防及控制等一系列问题,细胞受体的研究已经成为目前PRRSV研究中的重要领域。论文... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病原,对PRRSV细胞受体的研究将有助于揭示PRRSV的感染途径、复制过程、致病机理和疫病预防及控制等一系列问题,细胞受体的研究已经成为目前PRRSV研究中的重要领域。论文从硫酸乙酰肝素受体、唾液酸黏附素受体、CD163分子、波形蛋白等方面综述了PRRSV细胞受体研究进展。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 硫酸乙酰肝素 唾液酸黏附素 CD163分子 波形蛋白

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蟾毒灵对食管癌增殖的影响及机制研究 被引量：3

12

作者 陈慧 聂雪珂 +5 位作者 杨雅亭 吴远远 王佳鑫 牛梦兰 刘红亮 鲍登克 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期1346-1353,共8页

目的探讨蟾毒灵对食管癌增殖的影响,并初步探讨其可能分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶细胞毒性检测法(LDH Assay Kit)检测蟾毒灵对食管癌细胞株KYSE-70活力的影响。通过细胞克隆形成法和EdU(5-ethynyl-2-deoxyurid... 目的探讨蟾毒灵对食管癌增殖的影响,并初步探讨其可能分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶细胞毒性检测法(LDH Assay Kit)检测蟾毒灵对食管癌细胞株KYSE-70活力的影响。通过细胞克隆形成法和EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)细胞增殖实验研究蟾毒灵对KYSE-70细胞增殖的抑制作用。利用DAPI染色、TUNEL、流式细胞术检测蟾毒灵对KYSE-70细胞凋亡的影响。采用实时荧光定量PCR技术(quantitative real time-PCR,qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、NF-κBp65、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平的变化。通过JC-1荧光探针试剂盒和ATP检测试剂盒研究蟾毒灵作用后对KYSE-70线粒体功能的影响。最后,利用裸鼠体外成瘤实验研究蟾毒灵在体内对食管癌生长的影响。结果MTT和LDH实验结果表明,蟾毒灵对KYSE-70细胞活力具有明显的抑制作用。克隆形成实验和EdU结果表明,蟾毒灵可显著抑制KYSE-70细胞增殖。DAPI染色结果显示,蟾毒灵处理后KYSE-70细胞的核出现染色质不均匀、浓缩、聚集及碎裂等凋亡形态。TUNEL染色和流式细胞检测结果显示,蟾毒灵作用后可促进KYSE-70细胞凋亡。qPCR和Western blot结果显示,蟾毒灵处理后KYSE-70细胞内Bcl-2表达下调,Bax表达上调,Bax/Bcl-2表达比例升高。另外,蟾毒灵作用后,KYSE-70细胞的线粒体膜电位呈现明显的下降趋势(P<0.01),ATP的生成量也显著减少。裸鼠体外成瘤实验表明,蟾毒灵能够明显抑制体内肿瘤的生长。结论蟾毒灵能通过抑制食管癌的增殖,并通过线粒体途径促进食管癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 蟾毒灵 食管癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 线粒体

原文传递

口蹄疫抗体免疫层析试纸的临床应用及性能评价 被引量：2

13

作者 杨苏珍 杨继飞 +6 位作者 李清州 卢清侠 万博 鲍登克 刘运超 柴书军 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第10期148-152,共5页

为评价前期研制的猪口蹄疫O型抗体检测试纸的临床应用效果,检测了162头份口蹄疫病毒(FMDV)多肽疫苗免疫猪血清和87头份灭活疫苗免疫猪血清,并与UBI FMDV抗体检测ELISA和美国BioXL FMDV抗体检测ELISA做平行对比试验。结果显示,试纸与2种E... 为评价前期研制的猪口蹄疫O型抗体检测试纸的临床应用效果,检测了162头份口蹄疫病毒(FMDV)多肽疫苗免疫猪血清和87头份灭活疫苗免疫猪血清,并与UBI FMDV抗体检测ELISA和美国BioXL FMDV抗体检测ELISA做平行对比试验。结果显示,试纸与2种ELISA方法的符合率分别为95.06%和96.55%。说明该试纸可以用于猪FMDV O型抗体的临床检测,为评价口蹄疫疫苗免疫效果提供了快速、简便的方法。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 免疫层析试纸 ELISA

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TLR9基因敲除小鼠的构建及表型初步鉴定 被引量：2

14

作者 庞米米 林涵 +6 位作者 李雨佳 许娜娜 潘越 聂雪珂 陈慧 万绍贵 鲍登克 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1714-1719,共6页

目的构建TLR9基因敲除小鼠模型,并对其表型进行初步鉴定。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建TLR9基因敲除小鼠;利用毛细管凝胶电泳技术鉴定敲除小鼠的基因型,并通过PCR产物测序分析对敲除效果进行鉴定;利用qRT-PCR和Western blot及... 目的构建TLR9基因敲除小鼠模型,并对其表型进行初步鉴定。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建TLR9基因敲除小鼠;利用毛细管凝胶电泳技术鉴定敲除小鼠的基因型,并通过PCR产物测序分析对敲除效果进行鉴定;利用qRT-PCR和Western blot及免疫组织化学技术分别检测TLR9基因在mRNA水平和蛋白质水平的表达情况;观察基因敲除小鼠的遗传性状、体重及血常规变化;并通过苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠组织的病理形态学变化。结果PCR和测序结果表明TLR9基因敲除成功。敲除小鼠的脾、肝组织中TLR9基因mRNA及蛋白质水平表达显著低于野生型小鼠;TLR9基因敲除小鼠可正常生长繁殖,体重、外周血血常规各项指标均正常。TLR9基因敲除小鼠各组织形态学特征与野生型小鼠相比无明显差异。结论成功建立TLR9基因敲除小鼠模型,为研究TLR9基因的生物学功能和调控机制提供实验动物模型。 展开更多

关键词 TLR9 基因敲除 构建 表型鉴定 遗传性状 动物模型

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猪IFN-β和IRF-3基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：2

15

作者 王蕊 张改平 +5 位作者 乔松林 刘永晖 蒋志政 万博 鲍登克 王爱萍 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第5期137-140,144,共5页

为建立猪IFN-β及IRF-3基因实时荧光定量PCR检测方法,依据GenBank中IFN-β和IRF-3基因的保守序列,设计并合成各自特异性引物,并以β-actin为内参基因,采用SYBR Green-Ⅰ为染料,建立实时荧光定量检测方法。提取猪肺泡巨噬细胞总RNA,经反... 为建立猪IFN-β及IRF-3基因实时荧光定量PCR检测方法,依据GenBank中IFN-β和IRF-3基因的保守序列,设计并合成各自特异性引物,并以β-actin为内参基因,采用SYBR Green-Ⅰ为染料,建立实时荧光定量检测方法。提取猪肺泡巨噬细胞总RNA,经反转录得cDNA,用特异性引物经PCR扩增得到IFN-β和IRF-3基因,将其克隆至pMD-19T载体,经测序鉴定后得重组质粒,依次10倍稀释做为标准品,建立标准曲线及溶解曲线。结果表明,β-actin基因、IFN-β基因和IRF-3基因标准曲线线性关系较好,R2≥0.997;溶解曲线为特异性单峰,无非特异性扩增,检测下限可达100个拷贝/μL。建立的猪IFN-β和IRF-3基因实时荧光定量RT-PCR检测方法,特异性强、重复性好,为从分子水平上研究猪的免疫应答奠定了基础。 展开更多

关键词 猪 实时荧光定量PCR IFN-β基因 IRF-3基因

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游离核酸在肿瘤液体活检中的应用及临床意义 被引量：2

16

作者 陈楠 鲍登克 万绍贵 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1260-1265,共6页

随着分子生物学技术的不断发展,以检测游离核酸作为无创分子诊断标志物的液体活检技术得以实现,且日益受到关注。与传统分子诊断技术相比,液体活检技术主要以游离核酸为检测对象,具有更全面地反映肿瘤特性、克服肿瘤异质性难题以及可以... 随着分子生物学技术的不断发展,以检测游离核酸作为无创分子诊断标志物的液体活检技术得以实现,且日益受到关注。与传统分子诊断技术相比,液体活检技术主要以游离核酸为检测对象,具有更全面地反映肿瘤特性、克服肿瘤异质性难题以及可以非侵入性多次取样等优点,既可以减轻患者痛苦,也提高了对肿瘤特性及其负荷评估的准确性。游离核酸无创分子标志物的研究在肿瘤早期诊断、治疗监测和预后评价等方面具有重要的临床意义。本文对游离核酸作为肿瘤液体活检标志物的临床意义及其初步应用的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 肿瘤 循环游离核酸 循环游离DNA 循环游离RNA 液体活检

原文传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化 被引量：2

17

作者 刘永晖 张改平 +6 位作者 乔松林 刘明阳 蒋志政 王蕊 万博 鲍登克 王爱萍 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第5期141-144,共4页

为了解nsp7重组蛋白的免疫学活性,采用RT-PCR的方法从猪繁殖与呼吸道综合症病毒(PRRSV)BJ-4毒株中扩增得到nsp7基因,将基因连接到pET-28a载体并转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达,利用Ni-NTA进行亲和纯化,通过SDS-PAGE和Western-blot对... 为了解nsp7重组蛋白的免疫学活性,采用RT-PCR的方法从猪繁殖与呼吸道综合症病毒(PRRSV)BJ-4毒株中扩增得到nsp7基因,将基因连接到pET-28a载体并转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达,利用Ni-NTA进行亲和纯化,通过SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行分析和鉴定,通过间接ELISA方法研究了重组蛋白的免疫学活性。结果表明,成功制备了nsp7重组蛋白,间接ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,为建立nsp7特异性抗体的间接ELSIA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合症病毒 nsp7蛋白 BJ-4病毒 原核表达

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单克隆抗体及其在畜禽传染病诊治中的应用研究进展 被引量：1

18

作者 鲍登克 杨苏珍 +1 位作者 万博 杨兴琪 《河南畜牧兽医（综合版）》 2009年第5期9-10,共2页

单克隆抗体（monoclonal antibody，McAb）是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞产生的单一抗原决定簇。单克隆抗体与抗血清（又称多克隆抗体，polyclonal antibody，PcAb）主要区别是单克隆抗体为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫... 单克隆抗体（monoclonal antibody，McAb）是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞产生的单一抗原决定簇。单克隆抗体与抗血清（又称多克隆抗体，polyclonal antibody，PcAb）主要区别是单克隆抗体为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子，所以单克隆抗体是B细胞克隆的标志。是一种独特型的抗体，它的特异性是针对一个抗原决定簇的。与多克隆抗体相比单克隆抗体具有无可比拟的优越性： 展开更多

关键词 单克隆抗体 畜禽传染病 抗原决定簇 多克隆抗体 应用 诊治 细胞分化 细胞克隆

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MCUR1表达对卵巢癌细胞生长的影响及作用机制 被引量：2

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作者 白翔宇 曹珊珊 +3 位作者 杨世荣 高天 陈艳琴 鲍登克 《中国癌症防治杂志》 CAS 2020年第1期21-27,共7页

目的探讨线粒体钙单向转运体调节分子1(mitochondrial calcium uniporter regulator 1,MCUR1)与卵巢癌患者预后的关系,及其对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响和可能的作用机制。方法从TCGA(the cancer genome atlas)数据库下载372例卵巢癌... 目的探讨线粒体钙单向转运体调节分子1(mitochondrial calcium uniporter regulator 1,MCUR1)与卵巢癌患者预后的关系,及其对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响和可能的作用机制。方法从TCGA(the cancer genome atlas)数据库下载372例卵巢癌患者数据集,采用Kaplan-Meier法分析MCUR1与卵巢癌患者预后的关系。采用免疫组织化学法检测MCUR1在卵巢癌组织中的表达水平。转染MCUR1干扰片段及过表达质粒至卵巢癌A2780细胞(siMCUR1组和MCUR1组),分别设置相应阴性对照(siCtrl组和EV组)。采用qRT-PCR和Western blot实验检测转染效果。采用MTS法、克隆形成实验检测细胞增殖情况。裸鼠皮下荷瘤后采用免疫组织化学法和组织TUNEL法检测增殖和凋亡情况,Western blot检测细胞增殖和凋亡相关分子的表达情况。结果MCUR1高表达组中位生存期高于低表达组(53.7个月vs 41.3个月,P=0.003)。与siCtrl组相比,siMCUR1组细胞增殖能力升高(P<0.01),裸鼠皮下荷瘤生长速度加快(P<0.01),Ki67表达升高(P<0.01),细胞凋亡能力减弱(P<0.05),p53、Caspase-3和Bax蛋白表达下调,而Bcl2、Cyclin D1和Cyclin E蛋白表达上调;与EV组相比,MCUR1组细胞增殖能力下降(P<0.01),裸鼠皮下荷瘤生长速度减缓(P<0.01),Ki67表达降低(P<0.01),细胞凋亡能力增强(P<0.05),p53、Caspase-3和Bax蛋白表达上调,而Bcl2、Cyclin D1和Cyclin E蛋白表达下调。结论MCUR1通过调控p53通路进而调控卵巢癌细胞的增殖与凋亡,MCUR1可能作为抑癌因子在卵巢癌中发挥作用,有望成为卵巢癌诊断及治疗靶点。 展开更多

关键词 卵巢癌 线粒体钙单向转运体调节因子1 增殖 凋亡 预后

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动物病毒microRNA的研究进展 被引量：1

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作者 薛白 王树芬 +2 位作者 鲍登克 邓瑞广 李学伍 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第6期15-18,共4页

MicroRNAs(miRNAs)是一种含有约22～25个核苷酸的非编码单链RNA分子,广泛存在于人类及其他各种生物中。它通过与靶mRNA特异性的碱基互补配对,引起靶mRNA降解或者抑制其翻译,从而调节基因的转录后表达水平。病毒microRNA是新发现的一类mi... MicroRNAs(miRNAs)是一种含有约22～25个核苷酸的非编码单链RNA分子,广泛存在于人类及其他各种生物中。它通过与靶mRNA特异性的碱基互补配对,引起靶mRNA降解或者抑制其翻译,从而调节基因的转录后表达水平。病毒microRNA是新发现的一类miRNA,综述了近年来病毒microRNA的产生、作用机制、生物学功能及其在动物上的研究进展。 展开更多

关键词 病毒 MICRORNA 基因调控 动物疾病

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