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CYP3A4* 1G依赖的CYP3A4内含子10启动的真核表达载体的构建 被引量:1
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作者 赵云龙 杨卫红 +5 位作者 闫良 王沛 张卫 曾昭书 张莉蓉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期153-157,共5页
目的:构建CYP3A4*1G依赖的CYP3A4内含子10启动的真核表达载体,研究CYP3A4*1G依赖的CYP3A4内含子10的启动子功能。方法:以质粒p GEM-CYP3A4为模板扩增出CYP3A4 c DNA,PCR产物经EcoRV、XbaⅠ双酶切后插入到pc DNA3.1/Hygro(+)的EcoRV、Xb... 目的:构建CYP3A4*1G依赖的CYP3A4内含子10启动的真核表达载体,研究CYP3A4*1G依赖的CYP3A4内含子10的启动子功能。方法:以质粒p GEM-CYP3A4为模板扩增出CYP3A4 c DNA,PCR产物经EcoRV、XbaⅠ双酶切后插入到pc DNA3.1/Hygro(+)的EcoRV、XbaⅠ双酶切位点之间,构建pc DNA3.1-3A4。分别以人基因组DNA和p GEM-CYP3A4质粒DNA为模板,扩增出CYP3A4启动子和CYP3A4内含子10全长(野生型和突变型)序列,插入到pc DNA3.1-3A4的MluⅠ、NheⅠ双酶切位点之间,取代原有的CMV启动子,构建pc DNA3.1-P3A4、pc DNA3.1-W3A4(野生型)和pc DNA3.1-M3A4(突变型)。将质粒转染入HepG2细胞,检测CYP3A4 mRNA表达水平。结果:构建的重组质粒经酶切验证与测序鉴定,插入片段的序列和方向与预期完全一致。与转染pc DNA3.1/Hygro(+)的HepG2细胞比较,pcDNA3.1-P3A4、pc DNA3.1-W3A4、pc DNA3.1-M3A4转染组细胞CYP3A4 mRNA表达水平均提高(P<0.05),但pc DNA3.1-M3A4组表达水平低于pc DNA3.1-P3A4和pc DNA3.1-W3A4组(P<0.05)。结论:成功构建了CYP3A4*1G依赖的CYP3A4内含子10启动的真核表达载体;CYP3A4内含子10能够启动CYP3A4基因的表达,且存在CYP3A4*1G等位基因依赖性。 展开更多
关键词 CYP3A4 真核表达载体 启动子 内含子
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郑州市居民家庭过期药品回收现状及对策研究
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作者 高君 侯毅 +1 位作者 杨庆宇 《中国医药导刊》 2023年第5期543-548,共6页
目的:对郑州市居民家庭过期药品回收现状进行调查分析,旨在为建立过期药品回收长效机制提供参考。方法:以郑州市居民为调查对象,针对家庭过期药品回收相关知识、态度、行为、回收工作的建议等方面进行问卷调研。结果:共回收有效问卷292... 目的:对郑州市居民家庭过期药品回收现状进行调查分析,旨在为建立过期药品回收长效机制提供参考。方法:以郑州市居民为调查对象,针对家庭过期药品回收相关知识、态度、行为、回收工作的建议等方面进行问卷调研。结果:共回收有效问卷292份,有效回收率100%。调查结果显示,郑州市居民家庭储药现象普遍,但处理过期药品方式随意,居民过期药品回收知识及意识欠缺;加强科普宣传、回收的近便性以及回收流程的公开透明是推进过期药品回收的3个主要影响因素。结论:建议有关部门建立长效机制,推动家庭过期药品回收工作的开展,加强回收活动开展及宣传,合理设置回收点,优化流程,以促进家庭过期药品回收工作便利化、规范化、透明化。 展开更多
关键词 过期药品 药品回收 现状调研 用药安全
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